| 主要缩略词表 | 第9-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一部分：热休克蛋白70在乳腺癌组织中的表达及临床价值分析 | 第17-47页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 1 资料与实验方法 | 第21-23页 |
| 1.1 一般资料 | 第21-22页 |
| 1.2 定性检测HSP70蛋白在乳腺癌患者中的表达及其与无病生存的相关性 | 第22页 |
| 1.3 定量分析HSP70mRNA在不同乳腺癌组织中表达差异 | 第22页 |
| 1.4 分析HSP70表达与乳腺癌相关性因素的关系 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第23-26页 |
| 2.1 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 主要试剂及耗材 | 第23-26页 |
| 3 实验方法 | 第26-30页 |
| 3.1 应用免疫组织化学法检测HSP70抗原在乳腺癌患者中的表达情况 | 第26-27页 |
| 3.2 定量检测HSP70 mRNA在乳腺癌手术标本不同组织中的表达水平 | 第27-29页 |
| 3.2.1 提取乳腺组织中的RNA | 第27页 |
| 3.2.2 反转录cDNA合成 | 第27-28页 |
| 3.2.3 使用Real time-qPCR对样品进行相对定量分析 | 第28-29页 |
| 3.3 HSP70mRNA的表达与乳腺癌相关性因素的关系 | 第29-30页 |
| 结果 | 第30-37页 |
| 讨论 | 第37-40页 |
| 全文总结 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 第二部分：HSP70基因的表达对体外乳腺癌细胞株生物学功能的影响 | 第47-75页 |
| 前言 | 第47-51页 |
| 2 资料与实验方法 | 第51-54页 |
| 2.1 一般资料和方法 | 第51页 |
| 2.1.1 构建HSP70mRNA慢病毒载体,并通过细胞转染方法来了解HSP70mRNA蛋白的表达水平 | 第51页 |
| 2.1.2 观察MDA-MB-231细胞转染后抗增殖作用和生物学功能的影响 | 第51页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第51-54页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第51-52页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第52-54页 |
| 3 实验方法 | 第54-58页 |
| 3.1 HSP70mRNA慢病毒载体的构建和细胞转染 | 第54页 |
| 3.2 HSP70mRNA转染后HSP70表达水平检测 | 第54-56页 |
| 3.2.1 细胞RNA的提取(Trizol法)+cDNA反转录 | 第54-55页 |
| 3.2.2 PCR产物的扩增和电泳检测 | 第55-56页 |
| 3.3 观察MDA-MB-231细胞株的形态学和生物学功能 | 第56-58页 |
| 3.3.1 MTT法检测细胞增殖活性 | 第56页 |
| 3.3.2 流式细胞仪检测乳腺癌细胞周期和凋亡 | 第56-57页 |
| 3.3.3 划痕实验测定细胞的运动特性 | 第57页 |
| 3.3.4 Transwell小室法检测转染后细胞的迁移和侵袭能力 | 第57-58页 |
| 结果 | 第58-65页 |
| 2.1 HSP70mRNA转染后HSP70基因表达水平的检测 | 第58-59页 |
| 2.2 HSP70mRNA转染后HSP70蛋白表达水平的检测 | 第59-60页 |
| 2.3 HSP70mRNA转染后对细胞株生物学功能检测 | 第60-65页 |
| 2.3.1 MTT法检测细胞增殖活性和黏附能力 | 第60-61页 |
| 2.3.2 形态学观察 | 第61-62页 |
| 2 .3.3 Sub-G1法检测细胞凋亡率 | 第62-63页 |
| 2.3.4 细胞划痕实验 | 第63-64页 |
| 2.3.5 细胞迁移和侵袭能力 | 第64-65页 |
| 讨论 | 第65-69页 |
| 全文总结 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 综述：热休克蛋白70在乳腺癌的诊治中应用 | 第75-83页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 攻读博士学位期间科研成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
