| 摘要 | 第3-10页 |
| ABSTRACT | 第10-19页 |
| 第1章 前言 | 第24-49页 |
| 1.1 前列腺癌的流行病学 | 第24-25页 |
| 1.2 前列腺癌发生和进展的机制 | 第25-26页 |
| 1.3 前列腺癌早期发现和诊断的方法 | 第26-27页 |
| 1.3.1 直肠指检(Digital rectal examination,DRE) | 第26-27页 |
| 1.3.2 前列腺特异性抗原(Prostate-specific antigen,PSA) | 第27页 |
| 1.3.3 经直肠超声检查(Transrectal ultrasonography,TRUS) | 第27页 |
| 1.4 前列腺癌治疗的现状 | 第27-33页 |
| 1.4.1 前列腺癌的自然病程 | 第27-28页 |
| 1.4.2 前列腺癌的治疗方案 | 第28-30页 |
| 1.4.3 判断前列腺癌的预后及治疗难点 | 第30-33页 |
| 1.5 miRNAs与前列腺癌 | 第33-39页 |
| 1.5.1 miRNAs的基本结构及生物学功能 | 第33-34页 |
| 1.5.2 miRNAs在肿瘤中的角色 | 第34-37页 |
| 1.5.3 miRNAs的功能和表达具有组织特异性 | 第37-38页 |
| 1.5.4 miRNAs在前列腺癌中的角色 | 第38-39页 |
| 1.6 miR－195的研究进展 | 第39-42页 |
| 1.6.1 miR-195的基本结构 | 第39-40页 |
| 1.6.2 miR-195的生物学功能 | 第40-41页 |
| 1.6.3 miR-195与疾病 | 第41页 |
| 1.6.4 miR-195与肿瘤 | 第41-42页 |
| 1.7 S6K1的研究进展 | 第42-47页 |
| 1.7.1 S6K1的基本结构 | 第42页 |
| 1.7.2 S6K1是mTOR通路下游重要的效应因子 | 第42-43页 |
| 1.7.3 S6K1的下游和互相作用的蛋白 | 第43-45页 |
| 1.7.4 S6K1与肿瘤相关的功能 | 第45-47页 |
| 1.8 本研究拟解决的问题 | 第47-49页 |
| 1.8.1探索miR-195在人类前列腺癌中的表达情况、临床意义以及生物学功能 | 第47-48页 |
| 1.8.2 探索并明确miR-195在前列腺癌中直接调控的关键靶基因 | 第48页 |
| 1.8.3 验证靶基因是否为miR-195在前列腺癌中发挥作用的关键媒介 | 第48页 |
| 1.8.4 探索靶基因下游的关键效应因子 | 第48-49页 |
| 第2章 材料与方法 | 第49-78页 |
| 2.1 材料 | 第49-52页 |
| 2.1.1 组织来源及临床资料 | 第49-50页 |
| 2.1.2 动物 | 第50页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第50-51页 |
| 2.1.4 实验主要试剂 | 第51页 |
| 2.1.5 实验主要仪器 | 第51-52页 |
| 2.2 方法 | 第52-78页 |
| 2.2.1 慢病毒载体转染构建细胞株 | 第52-53页 |
| 2.2.2 核酸和质粒转染构建细胞株 | 第53-57页 |
| 2.2.3 建立裸鼠移植瘤模型 | 第57页 |
| 2.2.4 荧光素酶报告系统分析 | 第57-60页 |
| 2.2.5 miRNA靶基因生物信息学预测 | 第60页 |
| 2.2.6 荧光实时定量PCR(qRT-PCR) | 第60-67页 |
| 2.2.7 免疫组织化学染色 | 第67-70页 |
| 2.2.8 Western blot | 第70-71页 |
| 2.2.9 应用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术进行质谱分析 | 第71-75页 |
| 2.2.10 细胞功能实验 | 第75-76页 |
| 2.2.11 统计学处理 | 第76-78页 |
| 第3章 结果 | 第78-118页 |
| 3.1 miR-195在人类前列腺癌细胞株和临床组织中表达下调 | 第78-80页 |
| 3.2 miR-195的表达水平与前列腺癌患者的临床病理特征的相关性 | 第80-82页 |
| 3.3 miR-195的低水平表达与前列腺癌预后差有关 | 第82-83页 |
| 3.4 miR-195可作为判断前列腺癌预后的独立指标 | 第83-84页 |
| 3.5 miR-195在体外能够抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,以及诱导细胞凋亡 | 第84-92页 |
| 3.6 miR-195在体内能够抑制肿瘤生长、侵袭和血管生成 | 第92-95页 |
| 3.7 iTRAQ质谱分析由miR-195介导的蛋白质合成的变化 | 第95-97页 |
| 3.8 S6K1是miR-195直接调控的下游靶基因 | 第97-103页 |
| 3.9 S6K1是miR-195抑制前列腺癌进展的重要媒介 | 第103-112页 |
| 3.10 S6K1的表达与前列腺癌的进展和临床预后差密切相关 | 第112-116页 |
| 3.11 MMP-9、VEGF、BAD和E-cadherin是miR-195-S6K1轴的下游效应因子 | 第116-118页 |
| 第4章 讨论 | 第118-124页 |
| 4.1 miR-195在前列腺癌中的表达下调 | 第118-119页 |
| 4.2 miR-195表达水平与前列腺癌的恶性程度和预后负相关 | 第119页 |
| 4.3 miR-195在前列腺癌中的分子生物学功能 | 第119-120页 |
| 4.4 高通量数据分析miR-195在前列腺癌中涉及的分子功能及通路 | 第120-121页 |
| 4.5 S6K1是受miR-195直接调控的靶基因 | 第121-122页 |
| 4.6 MMP-9、VEGF、BAD和E-cadherin是miR-195-S6K1信号轴下游的效应因子 | 第122页 |
| 4.7 miR-195-S6K1信号轴联合调控前列腺癌的进展 | 第122-124页 |
| 结论 | 第124-125页 |
| 本研究的不足之处 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-144页 |
| 附录 | 第144-147页 |
| 攻读博士学位期间的成果 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149-151页 |
| 统计学证明 | 第151页 |
