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水稻植株形态突变体(pad)的基因克隆与功能研究

论文创新点第5-10页
摘要第10-13页
ABSTRACT第13-16页
第一章 绪论第17-48页
    1. 控制水稻株型相关基因的研究进展第17-32页
        1.1 水稻株型的概念第17-18页
        1.2 水稻株型各个性状对产量的影响第18-21页
            1.2.1 分蘖第18页
            1.2.2 株高和茎秆第18-19页
            1.2.3 穗部性状第19页
            1.2.4 叶片形态第19-20页
            1.2.5 理想株型第20-21页
        1.3 水稻株型的遗传控制及分子基础第21-32页
            1.3.1 控制分蘖数基因定位及克隆第23-26页
            1.3.2 分蘖角基因定位及克隆第26-27页
            1.3.3 穗部性状相关基因的研究进展第27-28页
            1.3.4 叶片形态建成的分子机制第28-30页
            1.3.5 控制株高的相关基因的研究进展第30-32页
    2. 高等植物中赤霉素代谢与信号通路的研究进展第32-45页
        2.1 赤霉素代谢途径第34-38页
            2.1.1 赤霉素生物合成第34-37页
            2.1.2 赤霉素去活化第37-38页
        2.2 赤霉素的代谢调控第38-42页
            2.2.1 发育调控第38-39页
            2.2.2 赤霉素体内平衡维持第39-40页
            2.2.3 其它激素对赤霉素的代谢调控第40-41页
            2.2.4 环境对GA的调控第41-42页
        2.3 赤霉素信号转导途径第42-45页
            2.3.1 赤霉素受体GID1第42-43页
            2.3.2 赤霉素信号通路的关键调控子:DELLA蛋白第43-44页
            2.3.3 赤霉素信号转导机制第44-45页
    3. 蛋白MCA的研究进展第45-48页
        3.1 MCA1与MCA2在拟南芥中的研究第46-47页
        3.2 OsMCA1在水稻中的研究第47-48页
第二章 材料与方法第48-65页
    1. 实验材料第48页
        1.1 水稻品种与种植第48页
        1.2 作图群体的构建第48页
        1.3 菌株和质粒第48页
    2. 实验试剂与仪器设备第48-49页
        2.1 实验试剂第48-49页
        2.2 仪器设备第49页
    3. 农艺性状考查第49-50页
    4. DNA小量提取第50页
    5. SSR引物多态性筛选与标记分析第50-51页
    6. 载体构建的常规实验流程第51-52页
        6.1 PCR产物凝胶回收第51页
        6.2 T载体连接第51页
        6.3 细菌转化第51页
        6.4 挑斑,摇菌第51-52页
        6.5 质粒提取第52页
        6.6 酶切检测第52页
    7. 本研究所用各种载体的构建第52-54页
        7.1 过量表达载体第52页
        7.2 遗传互补载体第52-53页
        7.3 共抑制表达载体第53页
        7.4 GUS报告基因表达载体第53页
        7.5 GFP融合表达载体第53-54页
        7.6 原核表达载体第54页
    8. 定点突变第54-55页
    9. 农杆菌介导的水稻遗传转化及转基因植株的阳性鉴定第55-57页
        9.1 本实验所用的培养基及配方第55页
        9.2 转化方法第55-57页
        9.3 转基因植株阳性鉴定第57页
    10. 亚细胞定位第57-58页
    11. 组织特异性表达检测第58页
    12. 组织切片分析第58-59页
    13. 原核表达第59-60页
    14. 生物信息学分析第60页
        14.1 结构域预测第60页
        14.2 进化树分析第60页
    15. RNA提取,cDNA合成和定量PCR第60-62页
        15.1 trizol法提取RNA第60页
        15.2 DNaseI处理总RNA,去除基因组DNA第60-61页
        15.3 反转录cDNA第61页
        15.4 实时定量PCR实验第61-62页
    16. 外源GA效应和GA含量分析第62页
    17. 本研究所用引物第62-65页
第三章 水稻植株形态突变体pad的基因克隆第65-76页
    1. 前言第65页
    2. 结果与分析第65-76页
        2.1 突变体材料pad来源第65页
        2.2 突变体表型性状分析第65-67页
        2.3 突变体影响种子充实度第67-68页
        2.4 组织切片分析第68-69页
        2.5 突变体pad的遗传分析第69-70页
        2.6 PAD基因的初步定位第70-71页
        2.7 PAD基因的精细定位与测序分析第71-72页
        2.8 候选基因确定及结构分析第72-76页
第四章 PAD基因功能研究第76-99页
    1. 前言第76页
    2. 结果与分析第76-99页
        2.1 候选基因的功能互补验证第76-79页
        2.2 OsMCA1/PAD基因的共抑制表达第79-81页
        2.3 OsMCA1/PAD组织表达模式分析第81-84页
            2.3.1 OsMCA1/PAD器官特异性表达模式第81-82页
            2.3.2 OsMCA1/PAD的组织特异性表达特性第82-84页
        2.4 OsMCA1/PAD亚细胞定位第84-86页
        2.5 OsMCA1/PAD蛋白原核表达及纯化第86-88页
        2.6 OsMCA1/PAD蛋白的系统进化第88-90页
        2.7 OsMCA1/PAD对GA代谢的调控作用第90-99页
            2.7.1 外源GA能部分恢复pad突变体的株高第90-92页
            2.7.2 野生型与突变体的节间GA成分含量的分析第92-93页
            2.7.3 GA合成和代谢相关基因的表达谱变化第93-97页
            2.7.4 pad突变体茎节间中参与GA信号转导的基因的表达变化第97-99页
第五章 讨论第99-103页
    1. OsMCA1/PAD编码一个功能保守的膜蛋白第99-100页
    2. OsMCA1/PAD参与水稻植株的形态建成第100页
    3. OsMCA1/PAD的点突变可能造成生物学功能的改变第100-101页
    4. OsMCA1/PAD对GA的代谢途径具有调控作用第101-103页
参考文献第103-119页
附录 组培培养基配方第119-121页
博士在读期间已发表的文章第121-122页
致谢第122页

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