论文创新点 | 第5-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
第一章 绪论 | 第17-48页 |
1. 控制水稻株型相关基因的研究进展 | 第17-32页 |
1.1 水稻株型的概念 | 第17-18页 |
1.2 水稻株型各个性状对产量的影响 | 第18-21页 |
1.2.1 分蘖 | 第18页 |
1.2.2 株高和茎秆 | 第18-19页 |
1.2.3 穗部性状 | 第19页 |
1.2.4 叶片形态 | 第19-20页 |
1.2.5 理想株型 | 第20-21页 |
1.3 水稻株型的遗传控制及分子基础 | 第21-32页 |
1.3.1 控制分蘖数基因定位及克隆 | 第23-26页 |
1.3.2 分蘖角基因定位及克隆 | 第26-27页 |
1.3.3 穗部性状相关基因的研究进展 | 第27-28页 |
1.3.4 叶片形态建成的分子机制 | 第28-30页 |
1.3.5 控制株高的相关基因的研究进展 | 第30-32页 |
2. 高等植物中赤霉素代谢与信号通路的研究进展 | 第32-45页 |
2.1 赤霉素代谢途径 | 第34-38页 |
2.1.1 赤霉素生物合成 | 第34-37页 |
2.1.2 赤霉素去活化 | 第37-38页 |
2.2 赤霉素的代谢调控 | 第38-42页 |
2.2.1 发育调控 | 第38-39页 |
2.2.2 赤霉素体内平衡维持 | 第39-40页 |
2.2.3 其它激素对赤霉素的代谢调控 | 第40-41页 |
2.2.4 环境对GA的调控 | 第41-42页 |
2.3 赤霉素信号转导途径 | 第42-45页 |
2.3.1 赤霉素受体GID1 | 第42-43页 |
2.3.2 赤霉素信号通路的关键调控子:DELLA蛋白 | 第43-44页 |
2.3.3 赤霉素信号转导机制 | 第44-45页 |
3. 蛋白MCA的研究进展 | 第45-48页 |
3.1 MCA1与MCA2在拟南芥中的研究 | 第46-47页 |
3.2 OsMCA1在水稻中的研究 | 第47-48页 |
第二章 材料与方法 | 第48-65页 |
1. 实验材料 | 第48页 |
1.1 水稻品种与种植 | 第48页 |
1.2 作图群体的构建 | 第48页 |
1.3 菌株和质粒 | 第48页 |
2. 实验试剂与仪器设备 | 第48-49页 |
2.1 实验试剂 | 第48-49页 |
2.2 仪器设备 | 第49页 |
3. 农艺性状考查 | 第49-50页 |
4. DNA小量提取 | 第50页 |
5. SSR引物多态性筛选与标记分析 | 第50-51页 |
6. 载体构建的常规实验流程 | 第51-52页 |
6.1 PCR产物凝胶回收 | 第51页 |
6.2 T载体连接 | 第51页 |
6.3 细菌转化 | 第51页 |
6.4 挑斑,摇菌 | 第51-52页 |
6.5 质粒提取 | 第52页 |
6.6 酶切检测 | 第52页 |
7. 本研究所用各种载体的构建 | 第52-54页 |
7.1 过量表达载体 | 第52页 |
7.2 遗传互补载体 | 第52-53页 |
7.3 共抑制表达载体 | 第53页 |
7.4 GUS报告基因表达载体 | 第53页 |
7.5 GFP融合表达载体 | 第53-54页 |
7.6 原核表达载体 | 第54页 |
8. 定点突变 | 第54-55页 |
9. 农杆菌介导的水稻遗传转化及转基因植株的阳性鉴定 | 第55-57页 |
9.1 本实验所用的培养基及配方 | 第55页 |
9.2 转化方法 | 第55-57页 |
9.3 转基因植株阳性鉴定 | 第57页 |
10. 亚细胞定位 | 第57-58页 |
11. 组织特异性表达检测 | 第58页 |
12. 组织切片分析 | 第58-59页 |
13. 原核表达 | 第59-60页 |
14. 生物信息学分析 | 第60页 |
14.1 结构域预测 | 第60页 |
14.2 进化树分析 | 第60页 |
15. RNA提取,cDNA合成和定量PCR | 第60-62页 |
15.1 trizol法提取RNA | 第60页 |
15.2 DNaseI处理总RNA,去除基因组DNA | 第60-61页 |
15.3 反转录cDNA | 第61页 |
15.4 实时定量PCR实验 | 第61-62页 |
16. 外源GA效应和GA含量分析 | 第62页 |
17. 本研究所用引物 | 第62-65页 |
第三章 水稻植株形态突变体pad的基因克隆 | 第65-76页 |
1. 前言 | 第65页 |
2. 结果与分析 | 第65-76页 |
2.1 突变体材料pad来源 | 第65页 |
2.2 突变体表型性状分析 | 第65-67页 |
2.3 突变体影响种子充实度 | 第67-68页 |
2.4 组织切片分析 | 第68-69页 |
2.5 突变体pad的遗传分析 | 第69-70页 |
2.6 PAD基因的初步定位 | 第70-71页 |
2.7 PAD基因的精细定位与测序分析 | 第71-72页 |
2.8 候选基因确定及结构分析 | 第72-76页 |
第四章 PAD基因功能研究 | 第76-99页 |
1. 前言 | 第76页 |
2. 结果与分析 | 第76-99页 |
2.1 候选基因的功能互补验证 | 第76-79页 |
2.2 OsMCA1/PAD基因的共抑制表达 | 第79-81页 |
2.3 OsMCA1/PAD组织表达模式分析 | 第81-84页 |
2.3.1 OsMCA1/PAD器官特异性表达模式 | 第81-82页 |
2.3.2 OsMCA1/PAD的组织特异性表达特性 | 第82-84页 |
2.4 OsMCA1/PAD亚细胞定位 | 第84-86页 |
2.5 OsMCA1/PAD蛋白原核表达及纯化 | 第86-88页 |
2.6 OsMCA1/PAD蛋白的系统进化 | 第88-90页 |
2.7 OsMCA1/PAD对GA代谢的调控作用 | 第90-99页 |
2.7.1 外源GA能部分恢复pad突变体的株高 | 第90-92页 |
2.7.2 野生型与突变体的节间GA成分含量的分析 | 第92-93页 |
2.7.3 GA合成和代谢相关基因的表达谱变化 | 第93-97页 |
2.7.4 pad突变体茎节间中参与GA信号转导的基因的表达变化 | 第97-99页 |
第五章 讨论 | 第99-103页 |
1. OsMCA1/PAD编码一个功能保守的膜蛋白 | 第99-100页 |
2. OsMCA1/PAD参与水稻植株的形态建成 | 第100页 |
3. OsMCA1/PAD的点突变可能造成生物学功能的改变 | 第100-101页 |
4. OsMCA1/PAD对GA的代谢途径具有调控作用 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-119页 |
附录 组培培养基配方 | 第119-121页 |
博士在读期间已发表的文章 | 第121-122页 |
致谢 | 第122页 |