致谢 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略语及术语表 | 第13-17页 |
引言 | 第17-21页 |
第一部分 SOX4基因干扰对神经胶质瘤干细胞生物学行为的影响 | 第21-39页 |
前言 | 第21-22页 |
1.1 材料与方法 | 第22-30页 |
1.1.1 材料 | 第22-24页 |
1.1.2 实验步骤和方法 | 第24-30页 |
1.2 实验结果 | 第30-36页 |
1.2.1 SOX4 mRNA在不同细胞系中的表达水平 | 第30-31页 |
1.2.2 Puromycin的浓度确定 | 第31-32页 |
1.2.3 细胞免疫化学鉴定肿瘤干细胞标志物 | 第32页 |
1.2.4 SOX4 shRNA基因干扰 | 第32-33页 |
1.2.5 CyQUANT细胞增殖分析 | 第33-34页 |
1.2.6 SOX4基因干扰对SN175细胞的形态影响 | 第34-35页 |
1.2.7 SOX4基因表达被干扰后相关基因表达的变化 | 第35-36页 |
1.3 讨论 | 第36-39页 |
第二部分 SOX4高表达对胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响 | 第39-61页 |
前言 | 第39页 |
2.1 材料与方法 | 第39-50页 |
2.1.1 材料 | 第39-42页 |
2.1.2 方法与步骤 | 第42-50页 |
2.2 实验结果 | 第50-58页 |
2.2.1 瞬时高表达Flag-SOX4-HA的检测 | 第50-51页 |
2.2.2 瞬时高表达SOX4对LN229细胞生物学行为的影响 | 第51-53页 |
2.2.3 SOX4-Flag-HA稳定表达胶质母细胞瘤细胞系的构建 | 第53页 |
2.2.4 SOX4-Flag-HA稳定表达对胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响 | 第53-57页 |
2.2.5 SOX4高表达抑制AKT信号,通过p53促进p21表达抑制细胞增殖 | 第57-58页 |
2.3 讨论 | 第58-61页 |
第三部分 SOX4高表达后LN229细胞基因表达谱的改变 | 第61-78页 |
前言 | 第61页 |
3.1 材料与方法 | 第61-65页 |
3.1.1 材料 | 第61-63页 |
3.1.2 实验方法 | 第63-65页 |
3.2 实验结果 | 第65-76页 |
3.2.1 基因表达差异芯片分析 | 第65-66页 |
3.2.2 芯片结果的Real-time PCR验证 | 第66-67页 |
3.2.3 S0X4 促进 beta-catenin 表达 | 第67-68页 |
3.2.4 芯片结果整合分析 | 第68-76页 |
3.3 讨论 | 第76-78页 |
第四部分 ChIP-seq SOX4蛋白全基因组结合位点的分析 | 第78-103页 |
前言 | 第78页 |
4.1 材料和方法 | 第78-87页 |
4.1.1 材料 | 第78-80页 |
4.1.2 实验方法 | 第80-87页 |
4.2 实验结果 | 第87-100页 |
4.2.1 抗体特异性检验 | 第87页 |
4.2.2 超声打碎基因组DNA | 第87-88页 |
4.2.3 ChIP-seq结果分析和验证 | 第88-89页 |
4.2.4 SOX4结合区域的motif鉴定 | 第89-90页 |
4.2.5 SOX4转录组与基因组的整合分析 | 第90-100页 |
4.3 讨论 | 第100-103页 |
结论 | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-112页 |
综述 | 第112-127页 |
参考文献 | 第121-127页 |
附录 | 第127-128页 |
个人简历 | 第128页 |