| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 小麦赤霉病的危害 | 第9页 |
| 1.2 小麦抗赤霉性鉴定 | 第9-10页 |
| 1.3 禾谷镰孢菌的生物学特征 | 第10-11页 |
| 1.4 禾谷镰孢菌基因组学研究进展 | 第11-13页 |
| 1.5 转座子研究进展 | 第13-15页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 转基因菌株鉴定小麦抗赤霉性 | 第16-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 菌株、小麦品种 | 第16页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第16页 |
| 2.2 方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 制备孢子悬浮液 | 第16页 |
| 2.2.2 田间接种 | 第16-17页 |
| 2.2.3 调查鉴定 | 第17页 |
| 2.2.4 小麦品种抗感鉴定方法 | 第17页 |
| 2.3 结果 | 第17-18页 |
| 2.4 讨论 | 第18-21页 |
| 2.4.1 赤霉病鉴定方法 | 第18-20页 |
| 2.4.2 转gfp菌株与非转基因菌株鉴定的差异 | 第20页 |
| 2.4.3 抗病品种的选育 | 第20-21页 |
| 第三章 突变体菌株致病性测定和致病相关基因的确定 | 第21-35页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 3.1.1 菌株和小麦品种 | 第21页 |
| 3.1.2 主要培养基、试剂 | 第21-22页 |
| 3.2 方法 | 第22-25页 |
| 3.2.1 诱导突变体的产生及突变体致病性测定 | 第22-23页 |
| 3.2.2 突变体菌落和孢子形态的观察 | 第23页 |
| 3.2.3 扩增转座子的侧翼序列 | 第23-25页 |
| 3.3 结果 | 第25-32页 |
| 3.3.1 突变体的致病性测定 | 第25-26页 |
| 3.3.2 菌株菌落和孢子形态的观察 | 第26-27页 |
| 3.3.3 TAIL-PCR扩增结果 | 第27页 |
| 3.3.4 TAIL-PCR扩增条带测序结果 | 第27-28页 |
| 3.3.5 转座子侧翼序列与禾谷镰孢菌基因组序列比对 | 第28-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-35页 |
| 3.4.1 转座子标签系统的应用 | 第32-33页 |
| 3.4.2 转座子插入位点分析 | 第33-35页 |
| 第四章 敲除载体的构建 | 第35-41页 |
| 4.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 4.1.1 菌株 | 第35页 |
| 4.1.2 主要酶、试剂、载体 | 第35-36页 |
| 4.2 方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 PH-1基因组的提取 | 第36页 |
| 4.2.2 质粒pkh-ko的制备 | 第36-37页 |
| 4.2.3 FGSG_05735基因旁侧两同源片段的定向克隆 | 第37-38页 |
| 4.2.4 基因上下游同源序列与载体的连接 | 第38-39页 |
| 4.2.5 敲除载体线性化 | 第39页 |
| 4.3 结果 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 基因敲除及检测 | 第41-46页 |
| 5.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 5.1.1 实验菌株 | 第41页 |
| 5.1.2 主要试剂和培养基 | 第41-42页 |
| 5.2 方法 | 第42-44页 |
| 5.2.1 PH-1菌株原生质体的制备和真菌转化 | 第42-43页 |
| 5.2.2 快速提取转化子DNA | 第43页 |
| 5.2.3 转化子基因型鉴定 | 第43-44页 |
| 5.3 结果 | 第44-45页 |
| 5.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第六章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |