| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·小麦条锈菌 | 第10-12页 |
| ·小麦条锈病的危害及分布 | 第10页 |
| ·小麦条锈菌的生物学特征 | 第10-11页 |
| ·小麦条锈菌的研究现状 | 第11-12页 |
| ·顶端生长 | 第12-15页 |
| ·顶端生长的过程 | 第12-14页 |
| ·Spk 区 | 第14-15页 |
| ·细胞骨架 | 第15-17页 |
| ·肌动蛋白及微丝 | 第15-16页 |
| ·微管与动力蛋白 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的意义、研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
| ·目的及意义 | 第17页 |
| ·研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 小麦条锈菌 PsDLC8 的克隆、表达及功能分析 | 第19-36页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·试剂盒、工具酶、载体、菌株及其他试剂 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-26页 |
| ·材料的培养和处理 | 第20页 |
| ·小麦条锈菌 DLC8 基因 EST 序列的查找 | 第20页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·RACE 克隆 PsDLC8 全长 | 第21页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第21-22页 |
| ·pMD 18-T-PsDLC8 的构建 | 第22页 |
| ·质粒的提取及鉴定 | 第22页 |
| ·小麦条锈菌 PsDLC8 序列分析 | 第22页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第22页 |
| ·融合表达质粒 pET41a-PsDLC8 的构建 | 第22-23页 |
| ·融合表达质粒 pET41a-PsDLC8 的诱导表达及 SDS-PAGE | 第23页 |
| ·融合蛋白亲和层析纯化及 western blot 分析 | 第23-24页 |
| ·目的蛋白的酶切纯化及抗体制备 | 第24页 |
| ·构巢曲霉△nudG 突变体互补实验 | 第24-26页 |
| ·Real time PCR 分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-35页 |
| ·小麦条锈菌 PsDLC8 全长 cDNA | 第26-27页 |
| ·序列相似性及进化树分析 | 第27-28页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第28-29页 |
| ·pET41a-PsDLC8 表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·pET41a-PsDLC8 原核表达、融合蛋白的纯化及 western blot 分析 | 第30-31页 |
| ·构巢曲霉突变体恢复试验 | 第31-34页 |
| ·Real time PCR 分析 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 小麦条锈菌 PsACT1 的克隆及功能分析 | 第36-46页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第36页 |
| ·小麦条锈菌种及小麦品种 | 第36页 |
| ·试剂盒、工具酶、载体、菌株及其他试剂 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-38页 |
| ·培养和处理 | 第36页 |
| ·小麦条锈菌 ACT1 基因的 EST 序列的查找 | 第36页 |
| ·感受态的制备 | 第36-37页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第37页 |
| ·RACE 克隆 PsACT1 全长 | 第37页 |
| ·pMD 18-T-PsACT1 的构建 | 第37页 |
| ·质粒的提取及鉴定 | 第37页 |
| ·小麦条锈菌 PsACT1 序列分析 | 第37页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第37页 |
| ·Real time PCR 分析 | 第37页 |
| ·在芽管形成过程中 F-actin 的定位 | 第37页 |
| ·细胞松弛素 B 对夏孢子萌发的影响 | 第37-38页 |
| ·细胞松弛素 B 对囊泡转运的影响 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-45页 |
| ·小麦条锈菌 PsACT1 全长 cDNA | 第38-39页 |
| ·序列相似性及同源性分析 | 第39-40页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
| ·PsACT1 的多序列比对分析 | 第41-42页 |
| ·Real time PCR 分析 | 第42页 |
| ·在芽管形成过程中 F-actin 的定位 | 第42-43页 |
| ·细胞松弛素 B 对芽管形成的影响 | 第43-44页 |
| ·细胞松弛素 B 对囊泡转运的影响 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第46-49页 |
| ·小麦条锈菌动力蛋白轻链基因 PsDLC8 | 第46-47页 |
| ·小麦条锈菌肌动蛋白基因 PsACT1 | 第47-48页 |
| ·研究展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |