| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 绪论 | 第10-17页 |
| 1.引言 | 第17-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-48页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.2 抗体 | 第20页 |
| 2.1.3 常用相关试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.4 自配试剂配方 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-48页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.2.2 Dab2过表达载体的构建 | 第24-30页 |
| 2.2.3 Dab2 shRNA载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.4 病毒包装 | 第31-33页 |
| 2.2.5 病毒感染目的细胞 | 第33-34页 |
| 2.2.6 病毒感染目的细胞后的功能学研究 | 第34-36页 |
| 2.2.6.1 流式细胞分析 | 第34-35页 |
| 2.2.6.2 划痕实验 | 第35页 |
| 2.2.6.3 Transwell细胞侵袭实验 | 第35-36页 |
| 2.2.7 收集细胞抽RNA及Real-time PCR检测 | 第36-39页 |
| 2.2.8 miRNA的抽提及Real-time PCR检测 | 第39-41页 |
| 2.2.9 蛋白质的抽提及western blot分析 | 第41-44页 |
| 2.2.10 ab2 DNA的启动子区域甲基化分析 | 第44-48页 |
| 3 结果 | 第48-63页 |
| 3.1 PC3与LNCAP细胞的Dab2表达水平差异显著 | 第48页 |
| 3.2 PC3细胞的侵袭能力显著强于LNCAP细胞 | 第48-49页 |
| 3.3 Dab2表达水平的敲低显著影响PC3细胞的迁移和侵袭能力 | 第49-56页 |
| 3.3.1 PC3与PC3-Dab2-shRNA细胞Dab2的表达量分析 | 第49-50页 |
| 3.3.2 PC3与PC3-Dab2-shRNA细胞的迁移和侵袭能力分析 | 第50-51页 |
| 3.3.3 PC3细胞与PC3-Dab2-shRNA细胞内迁移相关基因检测 | 第51-53页 |
| 3.3.4 PC3与PC3-Dab2-shRNA细胞周期、增值、凋亡分析 | 第53-56页 |
| 3.4 Migr1-Dab2转染后LNCAP细胞的侵袭能力显著提高 | 第56-58页 |
| 3.4.1 LNCAP细胞与LNCAP-migr1-Dab2细胞Dab2表达量的分析 | 第56-57页 |
| 3.4.2 LNCAP细胞与LNCAP-migr1-Dab2细胞侵袭能力分析 | 第57-58页 |
| 3.5 miR-145能靶向调控Dab2的表达并影响前列腺癌细胞的迁移和侵袭能 | 第58-60页 |
| 3.5.1 miR-145与Dab2基因的直接相互作用分析 | 第58页 |
| 3.5.2 miR-145导入PC3细胞后Dab2基因的表达分析 | 第58-59页 |
| 3.5.3 PC3细胞导入miR-145后细胞划痕实验 | 第59-60页 |
| 3.5.4 PC3细胞导入miR-145后Transwell实验 | 第60页 |
| 3.6 LNCAP与PC3细胞中Dab2基因CpG岛甲基化分析 | 第60-63页 |
| 3.6.1 LNCAP细胞加入 5-AZA处理后Dab2基因的检测 | 第61页 |
| 3.6.2 PC3细胞与LNCAP细胞中Dab2基因启动子甲基化分析 | 第61-63页 |
| 4.结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
