| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 麻疯树核糖体失活蛋白CURCIN国内外研究现状 | 第11-12页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin概述 | 第11页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin理化性质 | 第11页 |
| ·麻疯树核糖体结构 | 第11-12页 |
| 2 麻疯树核糖体失活蛋白CURCIN基因克隆与表达 | 第12-13页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin基因克隆 | 第12页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin基因家族 | 第12页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin表达 | 第12-13页 |
| 3 麻疯树核糖体失活蛋白CURCIN的药理活性 | 第13-15页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin毒性 | 第13页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin的抗肿瘤活性 | 第13-14页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin的抗病毒活性 | 第14页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin的抗菌活性 | 第14页 |
| ·麻疯树核糖体失活蛋白curcin的生物防治作用 | 第14-15页 |
| 4 展望 | 第15页 |
| 5 课题思路 | 第15-16页 |
| 6 技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆及表达 | 第17-35页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-27页 |
| ·麻疯树总DNA的提取 | 第18页 |
| ·引物的设计、扩增与克隆 | 第18-21页 |
| ·重组子的构建和序列分析 | 第21-23页 |
| ·CURCIN-T-载体 连接 | 第21-23页 |
| ·目的基因测序 | 第23页 |
| ·PET-22b-curcin重组质粒构建 | 第23-26页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-35页 |
| ·麻疯树基因组总DNA的获取 | 第27-28页 |
| ·基因的设计、扩增与克隆 | 第28-31页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中表达 | 第31-35页 |
| 第三章 重组蛋白表达条件的优化,包涵体蛋白纯化复性及体外活性检测 | 第35-55页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第35-38页 |
| 2 实验方法 | 第38-44页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第38-39页 |
| ·菌体发酵培养与包涵体纯化复性 | 第39-43页 |
| ·重组蛋白CURCIN体外抗肿瘤活性检测 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-55页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第44-45页 |
| ·菌体发酵培养与包涵体纯化复性 | 第45-49页 |
| ·重组蛋白体外抗肿瘤活性的检测 | 第49-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-61页 |
| 1 麻疯树基因组总DNA及其PET-22B-CURCIN的重组质粒的获取 | 第55页 |
| 2 重组蛋白的表达 | 第55-56页 |
| 3 重组蛋白的表达条件的优化 | 第56页 |
| 4 关于包涵体的制备 | 第56页 |
| 5 菌体的破碎 | 第56-57页 |
| 6 包涵体的洗涤与溶解 | 第57-58页 |
| 7 关于目的蛋白的纯化 | 第58-59页 |
| 8 重组蛋白的复性 | 第59-60页 |
| 9 重组蛋白的体外抗肿瘤活性的测定 | 第60-61页 |
| 第五章 结论和展望 | 第61-63页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 附录 | 第68-73页 |
| 附录一:各种试剂和培养基的配制 | 第68-71页 |
| 附录二:目的基因的碱基序列 | 第71-72页 |
| 附录三:目的基因CURCIN的测列 | 第72-73页 |
| 攻硕期间发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
