| 中文摘要 | 第13-14页 |
| 英文摘要 | 第14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 病原 | 第15-18页 |
| 1.1.1 弓形虫毒株分类 | 第15-16页 |
| 1.1.2 弓形虫的形态特征 | 第16-17页 |
| 1.1.3 弓形虫的生活史 | 第17-18页 |
| 1.2 流行病学 | 第18-19页 |
| 1.2.1 传染源 | 第18页 |
| 1.2.2 传播途径 | 第18页 |
| 1.2.3 流行特点 | 第18-19页 |
| 1.3 弓形虫分泌型蛋白质的研究 | 第19-21页 |
| 1.4 弓形虫感染的检测方法 | 第21-22页 |
| 1.4.1 直接镜检法 | 第21页 |
| 1.4.2 凝集试验检测 | 第21页 |
| 1.4.3 胶体金检测法 | 第21页 |
| 1.4.4 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第21页 |
| 1.4.5 免疫印迹法(Western-blot,WB) | 第21页 |
| 1.4.6 分子生物学检测方法 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第2章 弓形虫分泌型蛋白质的生物信息学分析 | 第23-26页 |
| 2.1 软件 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 检测基因序列的完整性 | 第23页 |
| 2.2.2 筛选具有结构域的蛋白质 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-25页 |
| 2.3.1 刚地弓形虫各虫株蛋白质分类 | 第24页 |
| 2.3.2 ME49虫株含信号肽蛋白质结构预测结果 | 第24页 |
| 2.3.3 ME49虫株基因ID及蛋白质结构域预测结果 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25页 |
| 2.5 小结 | 第25-26页 |
| 第3章 弓形虫目的基因的克隆与原核表达 | 第26-56页 |
| 3.1 材料 | 第26-31页 |
| 3.1.1 Vero细胞和虫株 | 第26页 |
| 3.1.2 菌种和质粒 | 第26页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.4 试剂盒 | 第27页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.6 主要溶液的配制 | 第28-31页 |
| 3.2 方法 | 第31-44页 |
| 3.2.1 Vero细胞的体外培养 | 第31页 |
| 3.2.2 弓形虫的体外培养: | 第31-32页 |
| 3.2.3 提取虫体总RNA | 第32页 |
| 3.2.4 将RNA反转录成cDNA | 第32-33页 |
| 3.2.5 克隆载体的构建 | 第33-37页 |
| 3.2.6 原核表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 3.2.7 重组蛋白质的表达与纯化 | 第40-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-54页 |
| 3.3.1 原核表达载体的构建 | 第44-52页 |
| 3.3.2 重组蛋白质小量诱导表达及鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.3 重组蛋白质的纯化及鉴定 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 第4章 TGME49 223140蛋白质在弓形虫的表达定位 | 第56-63页 |
| 4.1 材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第56页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第56-57页 |
| 4.2 方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 ELISA(酶联免疫吸附试验)法检测单克隆抗体 | 第57页 |
| 4.2.2 单克隆抗体的Westren-Blot(免疫印迹法)鉴定 | 第57-58页 |
| 4.2.3 确定TGME49 223140抗原在虫体上的表达部位 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与分析 | 第59-62页 |
| 4.3.1 单克隆抗体ELISA筛选结果 | 第59-60页 |
| 4.3.2 单克隆抗体的Western-blot鉴定结果 | 第60-61页 |
| 4.3.3 TGME49 223140抗原在虫体上的表达部位 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62页 |
| 4.5 小结 | 第62-63页 |
| 第5章 猪弓形虫ELISA检测方法的建立 | 第63-66页 |
| 5.1 材料 | 第63页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第63页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第63页 |
| 5.1.4 主要试剂的配制 | 第63页 |
| 5.2 方法 | 第63-64页 |
| 5.2.1 ELISA法检测猪血清中弓形虫抗体 | 第63-64页 |
| 5.2.2 确定阴阳性临界值 | 第64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-65页 |
| 5.3.1 确定阴阳性的临界值 | 第64页 |
| 5.3.2 猪血清ELISA检测结果 | 第64-65页 |
| 5.4 讨论 | 第65页 |
| 5.5 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
