中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
1 糖尿病的概述 | 第12-14页 |
1.1 糖尿病的分类 | 第12-13页 |
1.2 糖尿病的发病机制 | 第13页 |
1.3 糖尿病的治疗策略 | 第13-14页 |
2 GLP-1简介 | 第14-20页 |
2.1 GLP-1的合成、分泌和降解 | 第14-15页 |
2.2 GLP-1的生物学作用 | 第15-17页 |
2.3 GLP-1类药物的研究进展 | 第17-20页 |
3 可解离的人血清白蛋白融合技术 | 第20-22页 |
3.1 人血清白蛋白技术 | 第20-21页 |
3.2 可解离的人血清白蛋白融合技术 | 第21-22页 |
4 研究意义 | 第22页 |
5 研究内容 | 第22-24页 |
第二章 人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白载体的构建与表达 | 第24-56页 |
1 实验材料 | 第24-28页 |
1.1 菌种及质粒 | 第24-25页 |
1.2 主要生化和分子生物学试剂 | 第25页 |
1.3 主要培养基及缓冲液配制 | 第25-27页 |
1.4 主要仪器 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-49页 |
2.1 各种人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白基因的克隆 | 第28-36页 |
2.2 基因片段连接pEASY-Blunt载体 | 第36-38页 |
2.3 各种人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白表达载体的构建 | 第38-44页 |
2.4 各种表达载体电转化毕赤酵母菌株以及目的基因的诱导表达 | 第44-47页 |
2.5 各种毕赤酵母重组菌的摇瓶培养 | 第47页 |
2.6 目的蛋白的分离纯化 | 第47-48页 |
2.7 Lorry法测定蛋白浓度 | 第48-49页 |
3 实验结果 | 第49-53页 |
3.1 各种融合蛋白基因的克隆 | 第49页 |
3.2 各种融合蛋白表达载体的构建与鉴定 | 第49-50页 |
3.3 转化子的菌液PCR鉴定 | 第50-51页 |
3.4 各种融合蛋白的诱导表达 | 第51-52页 |
3.5 融合的蛋白的分离纯化 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
第三章 融合蛋白的体外评价 | 第56-64页 |
1 实验材料 | 第57-58页 |
1.1 细胞株 | 第57页 |
1.2 主要试剂 | 第57页 |
1.3 实验仪器 | 第57-58页 |
2 实验方法 | 第58-59页 |
2.1 融合蛋白的体外解离实验 | 第58页 |
2.2 细胞培养 | 第58页 |
2.3 融合蛋白体外生物学活性的测定 | 第58-59页 |
2.4 胰岛素含量的测定 | 第59页 |
3 实验结果 | 第59-62页 |
3.1 融合蛋白体外解离实验 | 第59-61页 |
3.2 融合蛋白体外生物学活性的测定 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
第四章 融合蛋白的体内评价 | 第64-70页 |
1 实验材料 | 第64-65页 |
1.1 实验动物 | 第64页 |
1.2 主要试剂 | 第64页 |
1.3 主要仪器 | 第64-65页 |
2 实验方法 | 第65-66页 |
2.1 血浆药物浓度—时间曲线的测定 | 第65-66页 |
2.2 口服葡萄糖耐受实验(OGTT) | 第66页 |
2.3 长效降糖活性的检测 | 第66页 |
3 实验结果 | 第66-68页 |
3.1 血浆药物浓度—时间曲线的测定 | 第66-67页 |
3.2 口服葡萄糖耐受实验 | 第67-68页 |
3.3 长效降糖活性的检测 | 第68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
第五章 结论与展望 | 第70-72页 |
1 主要结论 | 第70页 |
2 存在的问题及展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-82页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议 | 第82页 |