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可解离的人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白的初步研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
符号说明第11-12页
第一章 前言第12-24页
    1 糖尿病的概述第12-14页
        1.1 糖尿病的分类第12-13页
        1.2 糖尿病的发病机制第13页
        1.3 糖尿病的治疗策略第13-14页
    2 GLP-1简介第14-20页
        2.1 GLP-1的合成、分泌和降解第14-15页
        2.2 GLP-1的生物学作用第15-17页
        2.3 GLP-1类药物的研究进展第17-20页
    3 可解离的人血清白蛋白融合技术第20-22页
        3.1 人血清白蛋白技术第20-21页
        3.2 可解离的人血清白蛋白融合技术第21-22页
    4 研究意义第22页
    5 研究内容第22-24页
第二章 人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白载体的构建与表达第24-56页
    1 实验材料第24-28页
        1.1 菌种及质粒第24-25页
        1.2 主要生化和分子生物学试剂第25页
        1.3 主要培养基及缓冲液配制第25-27页
        1.4 主要仪器第27-28页
    2 实验方法第28-49页
        2.1 各种人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白基因的克隆第28-36页
        2.2 基因片段连接pEASY-Blunt载体第36-38页
        2.3 各种人胰高血糖素样肽-1和人血清白蛋白融合蛋白表达载体的构建第38-44页
        2.4 各种表达载体电转化毕赤酵母菌株以及目的基因的诱导表达第44-47页
        2.5 各种毕赤酵母重组菌的摇瓶培养第47页
        2.6 目的蛋白的分离纯化第47-48页
        2.7 Lorry法测定蛋白浓度第48-49页
    3 实验结果第49-53页
        3.1 各种融合蛋白基因的克隆第49页
        3.2 各种融合蛋白表达载体的构建与鉴定第49-50页
        3.3 转化子的菌液PCR鉴定第50-51页
        3.4 各种融合蛋白的诱导表达第51-52页
        3.5 融合的蛋白的分离纯化第52-53页
    4 讨论第53-56页
第三章 融合蛋白的体外评价第56-64页
    1 实验材料第57-58页
        1.1 细胞株第57页
        1.2 主要试剂第57页
        1.3 实验仪器第57-58页
    2 实验方法第58-59页
        2.1 融合蛋白的体外解离实验第58页
        2.2 细胞培养第58页
        2.3 融合蛋白体外生物学活性的测定第58-59页
        2.4 胰岛素含量的测定第59页
    3 实验结果第59-62页
        3.1 融合蛋白体外解离实验第59-61页
        3.2 融合蛋白体外生物学活性的测定第61-62页
    4 讨论第62-64页
第四章 融合蛋白的体内评价第64-70页
    1 实验材料第64-65页
        1.1 实验动物第64页
        1.2 主要试剂第64页
        1.3 主要仪器第64-65页
    2 实验方法第65-66页
        2.1 血浆药物浓度—时间曲线的测定第65-66页
        2.2 口服葡萄糖耐受实验(OGTT)第66页
        2.3 长效降糖活性的检测第66页
    3 实验结果第66-68页
        3.1 血浆药物浓度—时间曲线的测定第66-67页
        3.2 口服葡萄糖耐受实验第67-68页
        3.3 长效降糖活性的检测第68页
    4 讨论第68-70页
第五章 结论与展望第70-72页
    1 主要结论第70页
    2 存在的问题及展望第70-72页
参考文献第72-80页
致谢第80-82页
攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议第82页

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