| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 英文缩略词表 | 第4-7页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第一章 实验材料 | 第9-11页 |
| 1.1 细胞株 | 第9页 |
| 1.2 主要试剂耗材 | 第9-10页 |
| 1.3 主要仪器 | 第10-11页 |
| 第二章 实验方法 | 第11-18页 |
| 2.1 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系体外培养 | 第11页 |
| 2.2 CCK-8 筛选合适isatin浓度 | 第11页 |
| 2.2.1 接种细胞 | 第11页 |
| 2.2.2 细胞加药 | 第11页 |
| 2.2.3 CCK-8 处理 | 第11页 |
| 2.2.4 测定吸光度 | 第11页 |
| 2.3 Transwell测定细胞迁移能力 | 第11-12页 |
| 2.3.1 接种细胞 | 第11页 |
| 2.3.2 细胞加药 | 第11-12页 |
| 2.3.3 细胞计数 | 第12页 |
| 2.3.4 Transwell测定细胞迁移 | 第12页 |
| 2.3.5 染色固定计数 | 第12页 |
| 2.4 Real-time PCR检测MMP9m RNA相对表达量 | 第12-14页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第12页 |
| 2.4.2 RNA完整性检测 | 第12-13页 |
| 2.4.3 cDNA合成 | 第13页 |
| 2.4.4 Real-time PCR检测mRNA相对表达 | 第13-14页 |
| 2.5 Western Blotting检测相关蛋白的磷酸化水平和相对表达量 | 第14-17页 |
| 2.5.1 试剂配制 | 第14-15页 |
| 2.5.2 总蛋白的提取 | 第15页 |
| 2.5.3 BCA法测总蛋白浓度 | 第15页 |
| 2.5.4 制备聚丙烯酰胺凝胶 | 第15-16页 |
| 2.5.5 SDS-PAGE电泳 | 第16页 |
| 2.5.6 湿法转膜 | 第16页 |
| 2.5.7 封闭 | 第16-17页 |
| 2.5.8 孵育抗体 | 第17页 |
| 2.5.9 显影 | 第17页 |
| 2.5.10 PVDF膜再生 | 第17页 |
| 2.6 统计分析 | 第17-18页 |
| 第三章 实验结果 | 第18-25页 |
| 3.1 CCK-8 筛选合适isatin浓度 | 第18-19页 |
| 3.2 Isatin对SH-SY5Y细胞迁移的影响 | 第19-20页 |
| 3.3 Isatin对SH-SY5Y细胞MMP9mRNA相对表达量的影响 | 第20-21页 |
| 3.4 Isatin对相关蛋白磷酸化水平的影响 | 第21-23页 |
| 3.4.1 Isatin作用后各实验组磷酸化水平变化 | 第21-22页 |
| 3.4.2 阳性对照组磷酸化水平变化 | 第22-23页 |
| 3.5 Isatin对MMP9蛋白表达的影响 | 第23-25页 |
| 3.5.1 Isatin作用后MMP9蛋白表达变化 | 第23页 |
| 3.5.2 阳性对照组MMP9蛋白表达水平变化 | 第23-25页 |
| 第四章 讨论 | 第25-27页 |
| 结论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 综述 | 第32-47页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
