摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
缩略词表 | 第14-16页 |
文献综述 | 第16-43页 |
1 硫苷的综述 | 第17-31页 |
1.1 硫苷的结构和分类 | 第17-18页 |
1.2 硫苷的合成代谢 | 第18-26页 |
1.2.1 R侧链的延伸 | 第19-22页 |
1.2.2 核心结构的合成 | 第22-23页 |
1.2.3 R侧链的修饰 | 第23-26页 |
1.3 硫苷的转运 | 第26页 |
1.4 硫苷的降解代谢 | 第26-27页 |
1.5 硫苷的生物学功能与人类的健康及其危害性 | 第27-31页 |
1.5.1 植物体内硫元素的平衡 | 第27-29页 |
1.5.2 参与植物的防御机制 | 第29页 |
1.5.3 赋予植物不同的风味 | 第29页 |
1.5.4 硫苷与人类的健康 | 第29-30页 |
1.5.5 抗营养作用 | 第30-31页 |
2 硫苷代谢网络调控的研究进展 | 第31-39页 |
2.1 MYB家族转录因子 | 第31-36页 |
2.2 MYC家族转录因子 | 第36-38页 |
2.3 其它转录因子 | 第38页 |
2.4 植物激素对硫苷的影响 | 第38-39页 |
3 硫苷防御功能的研究进展 | 第39-42页 |
3.1 硫苷的抗病性 | 第40-41页 |
3.2 硫苷的抗虫性 | 第41-42页 |
4 本研究目的与意义的概述 | 第42-43页 |
第一章 拟南芥中两个保守的调控因子MYB115和MYB118调控新进化的苯甲酰氧基硫苷代谢途径相关基因的表达 | 第43-98页 |
引言 | 第43-46页 |
1 本研究的目的和意义 | 第46-47页 |
2 材料和方法 | 第47-71页 |
2.1 实验材料 | 第47-51页 |
2.1.1 植物材料 | 第47页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第47-48页 |
2.1.3 酶类 | 第48页 |
2.1.4 生化试剂与耗材 | 第48页 |
2.1.5 引物合成与测序分析 | 第48页 |
2.1.6 软件与数据分析 | 第48-49页 |
2.1.7 实验仪器 | 第49页 |
2.1.8 主要试剂的配置 | 第49-51页 |
2.2 实验方法 | 第51-71页 |
2.2.1 拟南芥的生长条件 | 第51页 |
2.2.2 拟南芥插入突变体引物的筛选 | 第51-53页 |
2.2.3 植物总DNA提取(CTAB法) | 第53-54页 |
2.2.4 植物组织总RNA提取的提取及反转录c DNA | 第54-58页 |
2.2.5 酵母单杂交分析 | 第58-66页 |
2.2.6 q RT-PCR表达检测 | 第66-68页 |
2.2.7 构建遗传互补实验的载体 | 第68-70页 |
2.2.8 硫苷的检测分析 | 第70-71页 |
3 结果与分析 | 第71-93页 |
3.1 共表达分析发现MYB115和MYB118调控BZ-GLS代谢途径 | 第71-73页 |
3.2 酵母单杂和基因表达检测(q RT-PCR)验证MYB115和MYB118调控硫苷代谢 | 第73-79页 |
3.3 MYB115和MYB118调控种子中的多种硫苷含量 | 第79-81页 |
3.4 MYB115和MYB118同时也影响叶片和花器官的硫苷含量 | 第81-84页 |
3.5 互补实验确认了MYB115和MYB118的单突变体表型 | 第84-86页 |
3.6 双突变体表明MYB115和MYB118在调控硫苷合成时存在互作 | 第86-89页 |
3.7 MYB115和MYB118对于硫苷合成的侧链修饰途径中的相关基因表现出不同的互作效应 | 第89-93页 |
4 讨论 | 第93-97页 |
4.1 拟南芥中两个保守的转录因子MYB115和MYB118可以调控新进化的基因AOP3和BZO1所合成的BZ-GLS的代谢 | 第93-95页 |
4.2 MYB115和MYB118调控硫苷合成途径的所有3个阶段 | 第95页 |
4.3 MYB115和MYB118的遗传互作 | 第95-96页 |
4.4 MYB115和MYB118不仅影响种子硫苷合成,同时也影响其它组织的硫苷代谢 | 第96-97页 |
5 本章小结 | 第97-98页 |
第二章 过表达甘蓝型油菜中三个硫苷合成基因对菌核病和灰霉病的抗性的研究 | 第98-131页 |
引言 | 第98-99页 |
1 本研究的目的和意义 | 第99页 |
2 材料和方法 | 第99-114页 |
2.1 实验材料 | 第99-101页 |
2.1.1 植物材料 | 第99页 |
2.1.2 核盘菌和灰霉菌菌种 | 第99-100页 |
2.1.3 载体和菌株 | 第100页 |
2.1.4 酶类 | 第100页 |
2.1.5 生化试剂与耗材 | 第100页 |
2.1.6 引物合成与测序分析 | 第100页 |
2.1.7 软件与数据分析 | 第100-101页 |
2.1.8 实验仪器 | 第101页 |
2.1.9 主要试剂的配置 | 第101页 |
2.2 实验方法 | 第101-114页 |
2.2.1 甘蓝型油菜的生长条件 | 第101-102页 |
2.2.2 甘蓝型油菜基因Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1的克隆与表达载体的构建 | 第102-104页 |
2.2.3 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第104-105页 |
2.2.4 转基因植株的PCR鉴定 | 第105-106页 |
2.2.5 转基因植株的Southern分析 | 第106-110页 |
2.2.6 转基因植株的表达分析(RT-PCR和q RT-PCR) | 第110-111页 |
2.2.7 油菜叶片接种核盘菌和灰霉菌 | 第111页 |
2.2.8 油菜叶片硫苷的检测与分析 | 第111-114页 |
3 结果与分析 | 第114-126页 |
3.1 克隆甘蓝型油菜Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1基因 | 第114-116页 |
3.2 Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1分别参与了核盘菌或灰霉菌侵染油菜时的响应 | 第116-118页 |
3.3 在甘蓝型油菜中过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1 | 第118-120页 |
3.4 过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1对油菜叶片硫苷含量的影响 | 第120-123页 |
3.5 过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1植株对核盘菌和灰霉菌的抗性分析 | 第123-126页 |
4 讨论 | 第126-129页 |
4.1 Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1在甘蓝型油菜硫苷合成途径中的功能和作用 | 第126-127页 |
4.2 脂肪族和吲哚族硫苷的抗病性 | 第127-128页 |
4.3 转基因对植株不同组织和器官硫苷合成和积累的影响 | 第128-129页 |
4.4 此研究对抗病育种的启发 | 第129页 |
5 本章小结 | 第129-131页 |
参考文献 | 第131-147页 |
附录 | 第147-154页 |
附录1 本研究中所涉及到的硫苷的名称、缩写和化学结构式 | 第147-150页 |
附录2 拟南芥中与AOP3、BZO1和SCPL17共表达的转录因子 | 第150-153页 |
附录3 作者简介和在读期间发表的论文 | 第153-154页 |
致谢 | 第154-156页 |