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油菜和拟南芥中几个硫代葡萄糖苷合成及调控基因的功能分析

摘要第8-11页
Abstract第11-13页
缩略词表第14-16页
文献综述第16-43页
    1 硫苷的综述第17-31页
        1.1 硫苷的结构和分类第17-18页
        1.2 硫苷的合成代谢第18-26页
            1.2.1 R侧链的延伸第19-22页
            1.2.2 核心结构的合成第22-23页
            1.2.3 R侧链的修饰第23-26页
        1.3 硫苷的转运第26页
        1.4 硫苷的降解代谢第26-27页
        1.5 硫苷的生物学功能与人类的健康及其危害性第27-31页
            1.5.1 植物体内硫元素的平衡第27-29页
            1.5.2 参与植物的防御机制第29页
            1.5.3 赋予植物不同的风味第29页
            1.5.4 硫苷与人类的健康第29-30页
            1.5.5 抗营养作用第30-31页
    2 硫苷代谢网络调控的研究进展第31-39页
        2.1 MYB家族转录因子第31-36页
        2.2 MYC家族转录因子第36-38页
        2.3 其它转录因子第38页
        2.4 植物激素对硫苷的影响第38-39页
    3 硫苷防御功能的研究进展第39-42页
        3.1 硫苷的抗病性第40-41页
        3.2 硫苷的抗虫性第41-42页
    4 本研究目的与意义的概述第42-43页
第一章 拟南芥中两个保守的调控因子MYB115和MYB118调控新进化的苯甲酰氧基硫苷代谢途径相关基因的表达第43-98页
    引言第43-46页
    1 本研究的目的和意义第46-47页
    2 材料和方法第47-71页
        2.1 实验材料第47-51页
            2.1.1 植物材料第47页
            2.1.2 载体和菌株第47-48页
            2.1.3 酶类第48页
            2.1.4 生化试剂与耗材第48页
            2.1.5 引物合成与测序分析第48页
            2.1.6 软件与数据分析第48-49页
            2.1.7 实验仪器第49页
            2.1.8 主要试剂的配置第49-51页
        2.2 实验方法第51-71页
            2.2.1 拟南芥的生长条件第51页
            2.2.2 拟南芥插入突变体引物的筛选第51-53页
            2.2.3 植物总DNA提取(CTAB法)第53-54页
            2.2.4 植物组织总RNA提取的提取及反转录c DNA第54-58页
            2.2.5 酵母单杂交分析第58-66页
            2.2.6 q RT-PCR表达检测第66-68页
            2.2.7 构建遗传互补实验的载体第68-70页
            2.2.8 硫苷的检测分析第70-71页
    3 结果与分析第71-93页
        3.1 共表达分析发现MYB115和MYB118调控BZ-GLS代谢途径第71-73页
        3.2 酵母单杂和基因表达检测(q RT-PCR)验证MYB115和MYB118调控硫苷代谢第73-79页
        3.3 MYB115和MYB118调控种子中的多种硫苷含量第79-81页
        3.4 MYB115和MYB118同时也影响叶片和花器官的硫苷含量第81-84页
        3.5 互补实验确认了MYB115和MYB118的单突变体表型第84-86页
        3.6 双突变体表明MYB115和MYB118在调控硫苷合成时存在互作第86-89页
        3.7 MYB115和MYB118对于硫苷合成的侧链修饰途径中的相关基因表现出不同的互作效应第89-93页
    4 讨论第93-97页
        4.1 拟南芥中两个保守的转录因子MYB115和MYB118可以调控新进化的基因AOP3和BZO1所合成的BZ-GLS的代谢第93-95页
        4.2 MYB115和MYB118调控硫苷合成途径的所有3个阶段第95页
        4.3 MYB115和MYB118的遗传互作第95-96页
        4.4 MYB115和MYB118不仅影响种子硫苷合成,同时也影响其它组织的硫苷代谢第96-97页
    5 本章小结第97-98页
第二章 过表达甘蓝型油菜中三个硫苷合成基因对菌核病和灰霉病的抗性的研究第98-131页
    引言第98-99页
    1 本研究的目的和意义第99页
    2 材料和方法第99-114页
        2.1 实验材料第99-101页
            2.1.1 植物材料第99页
            2.1.2 核盘菌和灰霉菌菌种第99-100页
            2.1.3 载体和菌株第100页
            2.1.4 酶类第100页
            2.1.5 生化试剂与耗材第100页
            2.1.6 引物合成与测序分析第100页
            2.1.7 软件与数据分析第100-101页
            2.1.8 实验仪器第101页
            2.1.9 主要试剂的配置第101页
        2.2 实验方法第101-114页
            2.2.1 甘蓝型油菜的生长条件第101-102页
            2.2.2 甘蓝型油菜基因Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1的克隆与表达载体的构建第102-104页
            2.2.3 甘蓝型油菜的遗传转化第104-105页
            2.2.4 转基因植株的PCR鉴定第105-106页
            2.2.5 转基因植株的Southern分析第106-110页
            2.2.6 转基因植株的表达分析(RT-PCR和q RT-PCR)第110-111页
            2.2.7 油菜叶片接种核盘菌和灰霉菌第111页
            2.2.8 油菜叶片硫苷的检测与分析第111-114页
    3 结果与分析第114-126页
        3.1 克隆甘蓝型油菜Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1基因第114-116页
        3.2 Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1分别参与了核盘菌或灰霉菌侵染油菜时的响应第116-118页
        3.3 在甘蓝型油菜中过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1第118-120页
        3.4 过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1对油菜叶片硫苷含量的影响第120-123页
        3.5 过表达Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1植株对核盘菌和灰霉菌的抗性分析第123-126页
    4 讨论第126-129页
        4.1 Bn MAM1,Bn CYP83A1和Bn UGT74B1在甘蓝型油菜硫苷合成途径中的功能和作用第126-127页
        4.2 脂肪族和吲哚族硫苷的抗病性第127-128页
        4.3 转基因对植株不同组织和器官硫苷合成和积累的影响第128-129页
        4.4 此研究对抗病育种的启发第129页
    5 本章小结第129-131页
参考文献第131-147页
附录第147-154页
    附录1 本研究中所涉及到的硫苷的名称、缩写和化学结构式第147-150页
    附录2 拟南芥中与AOP3、BZO1和SCPL17共表达的转录因子第150-153页
    附录3 作者简介和在读期间发表的论文第153-154页
致谢第154-156页

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