| 摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-24页 |
| 1.1 稻田杂草的发生、危害与治理概况 | 第12-15页 |
| 1.1.1 稻田杂草的种类及其危害 | 第12页 |
| 1.1.2 稻田耳叶水苋的发生与危害 | 第12-14页 |
| 1.1.3 稻田杂草的综合治理 | 第14-15页 |
| 1.2 杂草对除草剂的抗性研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 杂草抗药性的发展概况 | 第15-17页 |
| 1.2.2 杂草对除草剂的交互抗性与多抗性 | 第17-19页 |
| 1.2.3 杂草的抗药性机制 | 第19-20页 |
| 1.2.4 抗药性杂草治理 | 第20-21页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR技术与杂草抗药性研究 | 第21-22页 |
| 1.3.1 实时荧光定量PCR的简介 | 第21页 |
| 1.3.2 实时荧光定量PCR技术与杂草抗药性机理研究 | 第21-22页 |
| 1.4 本论文研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 供试材料 | 第24页 |
| 2.2 耳叶水苋对ALS抑制剂的交互抗性测定 | 第24-25页 |
| 2.2.1 供试药剂 | 第24页 |
| 2.2.2 抗性测定 | 第24-25页 |
| 2.2.3 数据处理方法 | 第25页 |
| 2.3 耳叶水苋抗性生物型与敏感生物型ALS基因DNA序列分析 | 第25-33页 |
| 2.3.1 供试耳叶水苋的培养 | 第25页 |
| 2.3.2 菌株与载体 | 第25页 |
| 2.3.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.3.4 常用培养基和溶液配制 | 第26页 |
| 2.3.5 耳叶水苋总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.3.6 耳叶水苋总RNA的检测 | 第27页 |
| 2.3.7 耳叶水苋总RNA的电泳检测 | 第27页 |
| 2.3.8 耳叶水苋c DNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| 2.3.9 常规PCR引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| 2.3.10 耳叶水苋ALS基因中间片段的扩增 | 第29-31页 |
| 2.3.11 RACE法扩增耳叶水苋目的基因cDNA末端 | 第31-33页 |
| 2.3.12 耳叶水苋ALS基因全序列分析 | 第33页 |
| 2.4 耳叶水苋抗性与敏感性生物型ALS基因表达的差异研究 | 第33-37页 |
| 2.4.1 供试药剂及生化试剂 | 第33页 |
| 2.4.2 供试植物 | 第33页 |
| 2.4.3 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.4.4 RNA的提取及反转录 | 第34页 |
| 2.4.5 内参基因与目的基因的引物设计 | 第34-35页 |
| 2.4.6 内参基因与目的基因的常规PCR验证 | 第35页 |
| 2.4.7 内参基因与目的基因的融解曲线分析和引物的扩增效率验证 | 第35-36页 |
| 2.4.8 耳叶水苋不同生物型ALS基因的表达差异分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-47页 |
| 3.1 耳叶水苋对四种ALS抑制剂交互抗性的测定 | 第37-39页 |
| 3.2 耳叶水苋抗性与敏感生物型ALS基因的DNA序列分析 | 第39-44页 |
| 3.2.1 耳叶水苋总RNA的纯度与完整性分析 | 第39-40页 |
| 3.2.2 耳叶水苋ALS基因保守片段的扩增和序列分析 | 第40-41页 |
| 3.2.3 耳叶水苋ALS基因cDNA 5′端RACE法扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.4 耳叶水苋ALS基因cDNA 3′端RACE法扩增 | 第42-43页 |
| 3.2.5 耳叶水苋ALS基因全序列的获得与分析 | 第43-44页 |
| 3.3 耳叶水苋抗性与敏感性生物型ALS基因差异表达 | 第44-47页 |
| 3.3.1 荧光定量PCR中内参基因的克隆与鉴定 | 第44页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR中目的基因与内参基因引物的设计与验证 | 第44-45页 |
| 3.3.3 目的基因与内参基因的融解曲线分析与扩增效率验证 | 第45页 |
| 3.3.4 苄嘧磺隆抗性与敏感耳叶水苋生物型在ALS基因表达的差异分析 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 耳叶水苋不同生物型对4种ALS抑制剂的交互抗性 | 第47页 |
| 4.2 耳叶水苋不同生物型ALS基因的DNA序列分析 | 第47-48页 |
| 4.3 实时荧光定量PCR内参基因的选择 | 第48-49页 |
| 4.4 耳叶水苋对苄嘧磺隆的抗性与ALS酶过量表达的相关性 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
