| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1.1 荧光原位杂交技术 | 第10-17页 |
| 1.1.1 荧光原位杂交技术的发展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 荧光原位杂交技术的原理 | 第11页 |
| 1.1.3 核酸探针的种类 | 第11-12页 |
| 1.1.3.1 DNA探针 | 第12页 |
| 1.1.3.2 cDNA探针 | 第12页 |
| 1.1.3.3 RNA探针 | 第12页 |
| 1.1.3.4 寡核苷酸探针 | 第12页 |
| 1.1.4 探针标记方法的发展 | 第12-15页 |
| 1.1.4.1 探针的放射性标记 | 第13页 |
| 1.1.4.2 探针的非放射性标记 | 第13页 |
| 1.1.4.3 缺口平移法(nick translation) | 第13-14页 |
| 1.1.4.4 随机引物法(randomprimerlabeling) | 第14-15页 |
| 1.1.4.5 PCR扩增 | 第15页 |
| 1.1.5 寡核苷酸探针制备的新方法 | 第15-17页 |
| 1.2 荧光原位杂交技术的应用 | 第17-20页 |
| 1.2.1 亲缘关系的鉴定及多倍体的起源研究 | 第17页 |
| 1.2.2 染色体物理图谱的构建 | 第17-18页 |
| 1.2.3 分裂时期染色体行为观察 | 第18-19页 |
| 1.2.4 染色体异常的鉴定 | 第19页 |
| 1.2.5 转基因植物外源基因的检测 | 第19-20页 |
| 1.3 染色体涂染(chromosome paiting) | 第20-24页 |
| 1.3.1 人类和动物染色体涂染 | 第20-21页 |
| 1.3.2 植物染色体涂染 | 第21-24页 |
| 1.3.2.1 酵母人工染色体(Yeast artificial chromosome) | 第22页 |
| 1.3.2.2 细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC) | 第22-23页 |
| 1.3.2.3 基于单拷贝基因的染色体涂染(Single-copy gene-based chromosomepainting,ScgCP) | 第23页 |
| 1.3.2.4 基于寡核苷酸的染色体涂染(Oligonucleotides-based chromosomepainting, Oligopainting) | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 供试水稻材料 | 第26页 |
| 2.1.2 实验探针 | 第26页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 实验主要仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-37页 |
| 2.2.1 水稻染色体标本的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.1.1 根尖染色体的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.1.2 粗线期染色体的制备 | 第27页 |
| 2.2.2 探针的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2.1 质粒DNA的抽提 | 第27页 |
| 2.2.2.2 DNA克隆的标记 | 第27-28页 |
| 2.2.3 寡核苷酸文库的建立 | 第28页 |
| 2.2.4 单链寡核苷酸探针的制备 | 第28-35页 |
| 2.2.4.1 乳化PCR | 第29-31页 |
| 2.2.4.2 体外转录 | 第31-32页 |
| 2.2.4.3 反转录方法 | 第32-34页 |
| 2.2.4.4 酶法去除剩余的RNA | 第34-35页 |
| 2.2.5 原位杂交 | 第35页 |
| 2.2.6 FISH信号的检测 | 第35-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-45页 |
| 3.1. 寡核苷酸文库的建立 | 第37页 |
| 3.2. 寡核苷酸探针在有丝分裂细胞及减数分裂细胞中的定位 | 第37-38页 |
| 3.3. 运用oligopainting进行水稻易位系的鉴定 | 第38-40页 |
| 3.4. oligopainting在水稻非整倍体材料鉴定中的应用 | 第40-42页 |
| 3.5. oligopainting在稻属亲缘关系鉴定中的应用 | 第42-45页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 小结 | 第45-46页 |
| 4.2 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
