符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-22页 |
1.1 应激颗粒研究进展 | 第13-19页 |
1.1.1 应激颗粒概述 | 第13-14页 |
1.1.2 应激颗粒发生过程 | 第14-15页 |
1.1.3 应激颗粒的信号转导调控 | 第15-17页 |
1.1.4 应激颗粒与病毒感染研究进展 | 第17-19页 |
1.1.4.1 NDV 对 SG 的影响 | 第18页 |
1.1.4.2 病毒通过感染抑制SG的形成 | 第18-19页 |
1.1.4.3 SG的抗病毒反应 | 第19页 |
1.2 RNA结合蛋白TIA-1 和G3BP1研究进展 | 第19-21页 |
1.2.1 TIA-1 研究进展 | 第19-20页 |
1.2.2 G3BP1研究进展 | 第20-21页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22-25页 |
2.1.1 病毒 | 第22页 |
2.1.2 细胞系 | 第22页 |
2.1.3 鸡胚成纤维细胞(CEF) | 第22页 |
2.1.4 抗体 | 第22页 |
2.1.5 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.6 相关试剂的配制 | 第23-24页 |
2.1.7 主要仪器 | 第24-25页 |
2.2 方法 | 第25-33页 |
2.2.1 GFP标签鸡TIA-1,PRD,RRM,和G3BP1,A,B,C,D及Flag标签鸡TIA-1,PRD,RRM质粒构建 | 第25-27页 |
2.2.2 外源表达鸡TIA-1 观察SG的免疫荧光检测 | 第27页 |
2.2.3 外源表达鸡TIA-1 的免疫荧光检测 | 第27-28页 |
2.2.4 CHX的药物处理 | 第28页 |
2.2.5 內源性TIA-1 的免疫荧光检测 | 第28-29页 |
2.2.6 NDV诱导G3BP1的免疫荧光检测 | 第29-30页 |
2.2.7 外源表达G3BP1的免疫荧光检测 | 第30页 |
2.2.8 外源表达 G3BP1 的 RAN 结合结构域的免疫荧光检测 | 第30-31页 |
2.2.9 Westen-blot方法 | 第31-32页 |
2.2.10 G3BP1和TIA-1 的同源性对比方法 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-46页 |
3.1 GFP-TIA-1,PRD,RRM和Flag-TIA-1,PRD,RRM以及GFP-G3BP1,A,B,C,D重组质粒的构建 | 第33页 |
3.2 G3BP1和TIA-1 的同源性对比 | 第33-35页 |
3.3 Hela细胞和DF-1 细胞外源表达TIA-1 诱导SG的产生 | 第35-36页 |
3.4 HeLa细胞外源表达鸡TIA-1 与内源性SG标志物共定位 | 第36-37页 |
3.5 ctGFP-cPRD诱导有别于SG的大颗粒,且在CHX处理下不解聚 | 第37-39页 |
3.6 GFP标签影响PRD的定位 | 第39-40页 |
3.7 内源性TIA-1 在应激处理下聚集至鸡细胞质SG中 | 第40-41页 |
3.8 鸡的组织中SG的形成 | 第41-42页 |
3.9 NDV诱导G3BP1在细胞中聚集形成SG | 第42-43页 |
3.10 外源表达G3BP1促进SGs的形成 | 第43页 |
3.11 G3BP1的RNA结合结构域介导SGs的招募 | 第43-44页 |
3.12 G3BP1促进NDV的复制 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 外源表达TIA-1 能够诱导SG的产生 | 第46页 |
4.2 外源表达TIA-1 能够诱导SG的产生并与内源性的SG的标记物共定位 | 第46页 |
4.3 ct GFP-cPRD诱导有别于SG的大颗粒,且在CHX处理下不降解,GFP标签影响PRD的定位 | 第46-47页 |
4.4 NDV诱导G3BP1在细胞中聚集形成SG | 第47-48页 |
4.5 G3BP1的RNA结合结构域介导SGs的招募 | 第48页 |
4.6 G3BP1促进NDV的复制 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第61页 |