| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 传染性法氏囊病与传染性法氏囊病病毒 | 第9-10页 |
| 1.1.1 传染性法氏囊病 | 第9页 |
| 1.1.2 传染性法氏囊病病毒 | 第9-10页 |
| 1.2 传染性法氏囊病病毒的结构与功能 | 第10-12页 |
| 1.2.1 结构蛋白 | 第10-11页 |
| 1.2.2 非结构蛋白 | 第11-12页 |
| 1.2.3 RNPs复合体 | 第12页 |
| 1.3 IBDV与宿主细胞相互作用的研究进展 | 第12页 |
| 1.3.1 IBDV病毒蛋白VP1与宿主细胞相互作用的研究进展 | 第12页 |
| 1.3.2 IBDV病毒蛋白VP3与宿主细胞相互作用的研究进展 | 第12页 |
| 1.4 VDAC1的分子生物学 | 第12-15页 |
| 1.4.1 VDAC1的结构 | 第12-13页 |
| 1.4.2 VDAC1的功能 | 第13-14页 |
| 1.4.3 VDAC1与病毒的关系 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 细胞，细胞培养材料及试剂 | 第16页 |
| 2.1.2 病毒 | 第16页 |
| 2.1.3 质粒构建所需材料 | 第16页 |
| 2.1.4 荧光定量所需材料 | 第16页 |
| 2.1.5 免疫共沉淀和蛋白免疫印迹所需试剂及抗体 | 第16-17页 |
| 2.1.6 激光共聚焦所需试剂及抗体 | 第17页 |
| 2.1.7 转染及RNAi相关试剂 | 第17页 |
| 2.1.8 凋亡及Caspase活性检测所需试剂 | 第17页 |
| 2.1.9 双荧光素酶报告基因 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第17-18页 |
| 2.2.2 病毒感染 | 第18页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹 | 第18页 |
| 2.2.4 荧光定量 | 第18-20页 |
| 2.2.5 siRNA筛选与质粒转染 | 第20-21页 |
| 2.2.6 病毒效价滴定 | 第21页 |
| 2.2.7 流式细胞术 | 第21-22页 |
| 2.2.8 Caspase-9, Caspase-3 活性检测 | 第22页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀实验鉴定互作蛋白 | 第22页 |
| 2.2.10 激光共聚焦检测蛋白的共定位 | 第22-23页 |
| 2.2.11 VDAC1与VP3相互作用必需区域的鉴定 | 第23页 |
| 2.2.12 RNA对互作蛋白相互作用的影响 | 第23页 |
| 2.2.13 双荧光素酶报告基因 | 第23页 |
| 2.2.14 灰度值分析 | 第23页 |
| 2.2.15 数据统计分析 | 第23-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-41页 |
| 3.1 IBDV感染上调表达VDAC1 | 第24-26页 |
| 3.1.1 IBDV感染DF-1 细胞促进VDAC1 mRNA表达 | 第24页 |
| 3.1.2 IBDV感染DF-1 细胞促进VDAC1蛋白表达 | 第24-25页 |
| 3.1.3 IBDV感染HEK293T细胞促进VDAC1蛋白表达 | 第25-26页 |
| 3.2 下调表达VDAC1抑制IBDV病毒复制 | 第26-29页 |
| 3.2.1 下调表达VDAC1降低病毒滴度 | 第26-27页 |
| 3.2.2 下调表达VDAC1抑制病毒A，B节段蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 3.2.3 下调表达VDAC1抑制病毒RNA量 | 第28-29页 |
| 3.3 下调表达VDAC1抑制IBDV诱导的细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 3.3.1 流式分析下调表达VDAC1抑制IBDV诱导的细胞凋亡 | 第29页 |
| 3.3.2 下调表达VDAC1抑制Caspase-9，Caspase-3 活性 | 第29-30页 |
| 3.4 与VDAC1相互作用的病毒蛋白的筛选与鉴定 | 第30-36页 |
| 3.4.1 VDAC1与病毒蛋白VP5不存在相互作用 | 第30-31页 |
| 3.4.2 VDAC1与病毒蛋白VP1存在相互作用 | 第31页 |
| 3.4.3 VDAC1与病毒蛋白VP1共定位于细胞质中 | 第31-32页 |
| 3.4.4 VDAC1与病毒蛋白VP3存在相互作用 | 第32-33页 |
| 3.4.5 VDAC1与病毒蛋白VP3共定位于细胞质中 | 第33页 |
| 3.4.6 VP3与VDAC1相互作用区域鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4.7 VDAC1与VP1的相互作用需要RNA参与 | 第34-35页 |
| 3.4.8 VDAC1与VP3的相互作用需要RNA参与 | 第35-36页 |
| 3.5 VDAC1促进IBDV聚合酶活性 | 第36-39页 |
| 3.5.1 过表达VDAC1促进IBDV聚合酶活性 | 第36-37页 |
| 3.5.2 下调表达VDAC1抑制IBDV聚合酶活性 | 第37-39页 |
| 3.6 下调表达VDAC1抑制IBDV RNPs的稳定性 | 第39-41页 |
| 3.6.1 下调表达VDAC1抑制VP1-VP3相互作用 | 第39-41页 |
| 4 讨论与分析 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
