| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 丹参及其次生代谢研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 丹参 | 第11页 |
| 1.1.2 丹参的主要次生代谢物 | 第11页 |
| 1.1.3 丹酚酸B的生源合成途径及其调控 | 第11-14页 |
| 1.2 诱导子对植物次生代谢的作用 | 第14-15页 |
| 1.2.1 诱导子的定义与分类 | 第14页 |
| 1.2.2 诱导子在植物次生代谢中的作用 | 第14-15页 |
| 1.3 水杨酸对植物次生代谢的调控作用 | 第15-16页 |
| 1.3.1 水杨酸 | 第15页 |
| 1.3.2 水杨酸对植物次生代谢的调控作用及其机制 | 第15-16页 |
| 1.4 钙信号在植物信号转导中的重要作用 | 第16-17页 |
| 1.4.1 钙信号 | 第16页 |
| 1.4.2 钙信号的产生与终止 | 第16-17页 |
| 1.4.3 钙信号在植物次生代谢中的作用及其机制 | 第17页 |
| 1.5 含有C2结构域的蛋白 | 第17-19页 |
| 1.6 选题目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 丹参C2-SRC2-like基因的克隆及生物信息学分析 | 第21-33页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第21页 |
| 2.1.2 丹参悬浮细胞培养 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 总RNA质量检测 | 第22页 |
| 2.2.3 cDNA的克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.4 丹参C2-SRC2-like基因ORF序列的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.5 生物信息学分析所用软件 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 丹参C2-SRC2-like基因全长序列的获得 | 第25-26页 |
| 2.3.2 丹参C2-SRC2-like基因的生物信息学分析 | 第26-30页 |
| 2.3.3 丹参C2-SRC2-like蛋白的功能预测 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-33页 |
| 第三章 丹参C2-SRC2-like及相关基因的诱导表达分析 | 第33-41页 |
| 3.1 材料 | 第33页 |
| 3.1.1 材料来源 | 第33页 |
| 3.1.2 丹参悬浮细胞的培养 | 第33页 |
| 3.1.3 试剂 | 第33页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 诱导剂的制备 | 第33页 |
| 3.2.2 丹参悬浮细胞的诱导处理 | 第33页 |
| 3.2.3 丹参C2-SRC2-like及相关基因表达量的检测 | 第33-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 丹参Annexin36604对SA的响应 | 第35页 |
| 3.3.2 丹参Annexin9159对过量钙的响应 | 第35-36页 |
| 3.3.3 丹参Annexin19069对过量钙的响应 | 第36页 |
| 3.3.4 丹参C2-SRC2-like对SA的响应 | 第36-37页 |
| 3.3.5 丹参C2-SRC2-like对过量钙的响应 | 第37页 |
| 3.3.6 丹参C2-SRC2-like对钙饥饿的响应 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-39页 |
| 3.5 小结 | 第39-41页 |
| 第四章 丹参C2-SRC2-like基因过表达和反义载体的构建 | 第41-49页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 4.1.2 菌株与质粒 | 第41页 |
| 4.1.3 生化试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 4.2 方法 | 第41-45页 |
| 4.2.1 植物总RNA的提取及质量检测 | 第41页 |
| 4.2.2 反转录 | 第41页 |
| 4.2.3 过表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 4.2.4 反义表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-46页 |
| 4.3.1 植物过表达载体的构建 | 第45页 |
| 4.3.2 植物反义载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-47页 |
| 4.5 小结 | 第47-49页 |
| 第五章 植株转化及转基因植株初步鉴定 | 第49-59页 |
| 5.1 材料 | 第49页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 5.1.2 菌株与质粒 | 第49页 |
| 5.1.3 生化试剂 | 第49页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第49页 |
| 5.2 方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 引物设计 | 第49-50页 |
| 5.2.2 农杆菌GV3101感受态的制备 | 第50页 |
| 5.2.3 重组质粒转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第50-51页 |
| 5.2.4 单克隆的菌液PCR检测 | 第51页 |
| 5.2.5 叶盘法转染丹参无菌苗 | 第51页 |
| 5.2.6 转基因植株初步鉴定 | 第51页 |
| 5.2.6.1 过表达植株的初步鉴定 | 第51页 |
| 5.2.6.2 反义植株的初步鉴定 | 第51页 |
| 5.3 结果与分析 | 第51-56页 |
| 5.3.1 重组质粒转化农杆菌GV3101感受态 | 第51-53页 |
| 5.3.2 转基因植株初步鉴定 | 第53-56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-57页 |
| 5.5 小结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
