| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-19页 |
| 第一章 组织工程人角膜内皮的研究概述 | 第19-46页 |
| 1 角膜内皮与角膜内皮盲 | 第19-32页 |
| ·角膜内皮细胞的形态特征 | 第20-21页 |
| ·角膜内皮细胞的细胞密度 | 第21-22页 |
| ·角膜内皮细胞的增殖 | 第22-26页 |
| ·角膜内皮细胞与生长因子 | 第26-29页 |
| ·角膜内皮细胞的生理功能 | 第29-31页 |
| ·角膜内皮盲 | 第31-32页 |
| 2 组织工程学技术的研究进展 | 第32-34页 |
| ·组织工程学的定义 | 第32-33页 |
| ·组织工程学的研究重点 | 第33-34页 |
| 3 组织工程角膜内皮种子细胞的研究进展 | 第34-39页 |
| ·角膜内皮细胞的培养方法 | 第35-37页 |
| ·角膜内皮细胞的培养条件 | 第37-39页 |
| 4 组织工程角膜内皮载体支架的研究进展 | 第39-43页 |
| ·异体角膜片 | 第39-40页 |
| ·明胶薄膜 | 第40页 |
| ·胶原凝胶 | 第40页 |
| ·聚羟基乙酸和聚乳酸羟基乙酸 | 第40页 |
| ·水凝胶膜 | 第40-41页 |
| ·角膜基质/后弹力膜 | 第41页 |
| ·角膜基质和脱细胞角膜基质片 | 第41页 |
| ·生物复合膜 | 第41-42页 |
| ·羊膜基底膜 | 第42-43页 |
| 5 组织工程角膜内皮构建的研究进展 | 第43-44页 |
| 6 本文的目的和意义 | 第44-46页 |
| 第二章 组织工程人角膜内皮种子细胞的筛选与扩增 | 第46-64页 |
| 1.材料与用品 | 第47-50页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47-48页 |
| ·实验药品 | 第48页 |
| ·常用溶液的配方 | 第48-50页 |
| 2.方法 | 第50-55页 |
| ·人角膜内皮细胞系的分子鉴定 | 第50-53页 |
| ·细胞标志蛋白的Western blot检测 | 第50-51页 |
| ·细胞连接蛋白的免疫荧光检测 | 第51页 |
| ·细胞功能蛋白的实时荧光定量PCR检测 | 第51-53页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的克隆化与扩增培养 | 第53-54页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞饲养层的制备 | 第53页 |
| ·有限稀释法克隆化细胞 | 第53页 |
| ·染色体分析 | 第53-54页 |
| ·单克隆细胞株的体外扩增培养 | 第54页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的生长状态分析 | 第54-55页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的冻存 | 第54-55页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的复苏 | 第55页 |
| 3.结果 | 第55-60页 |
| ·人角膜内皮细胞系的分子鉴定 | 第55-58页 |
| ·细胞标志蛋白的Western blot检测 | 第55-56页 |
| ·细胞连接蛋白的免疫荧光检测 | 第56页 |
| ·细胞功能蛋白的实时荧光定量PCR检测 | 第56-58页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的克隆化与扩增培养 | 第58-59页 |
| ·小鼠腹腔巨噬细胞饲养层的制备 | 第58页 |
| ·细胞克隆化与扩增培养 | 第58-59页 |
| ·染色体分析 | 第59页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的生长状态分析 | 第59-60页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的冻存与复苏 | 第59-60页 |
| 4.讨论 | 第60-63页 |
| 5.结论 | 第63-64页 |
| 第三章 组织工程人角膜内皮载体支架的制备与修饰 | 第64-75页 |
| 1.材料与用品 | 第65-66页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·实验药品 | 第65-66页 |
| ·常用溶液的配方 | 第66页 |
| 2.方法 | 第66-69页 |
| ·去上皮层羊膜的修饰与制备 | 第67页 |
| ·去上皮层修饰羊膜与人角膜内皮细胞的生物相容性研究 | 第67-68页 |
| ·去上皮层修饰羊膜与人角膜内皮细胞的生物相容性检测 | 第68-69页 |
| ·光镜观察检测 | 第68页 |
| ·冰冻切片检测 | 第68页 |
| ·茜素红染色检测 | 第68-69页 |
| 3.结果 | 第69-72页 |
| ·去上皮层羊膜的修饰与制备 | 第69页 |
| ·去上皮层修饰羊膜与人角膜内皮细胞的生物相容性检测 | 第69-72页 |
| ·光镜观察检测 | 第69-70页 |
| ·细胞密度计数检测 | 第70-71页 |
| ·冰冻切片检测 | 第71页 |
| ·茜素红染色检测 | 第71-72页 |
| 4.讨论 | 第72-74页 |
| 5.结论 | 第74-75页 |
| 第四章 组织工程人角膜内皮的体外重建及其检测 | 第75-87页 |
| 1.材料与用品 | 第75-76页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·实验仪器 | 第75-76页 |
| ·实验药品 | 第76页 |
| 2.方法 | 第76-79页 |
| ·TE-HCE的体外重建 | 第77-78页 |
| ·去上皮层羊膜的修饰与制备 | 第77页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的扩增与培养 | 第77页 |
| ·TE-HCE的生物相容性研究 | 第77-78页 |
| ·TE-HCE的的生物相容性检测 | 第78-79页 |
| ·光镜观察检测 | 第78页 |
| ·冰冻切片检测 | 第78页 |
| ·茜素红染色检测 | 第78页 |
| ·免疫荧光检测 | 第78-79页 |
| ·扫描电镜观察 | 第79页 |
| ·透射电镜观察 | 第79页 |
| 3. 结果 | 第79-84页 |
| ·TE-HCE的光镜观察检测 | 第80页 |
| ·TE-HCE的细胞密度计数检测 | 第80-81页 |
| ·TE-HCE的冰冻切片检测 | 第81页 |
| ·TE-HCE的茜素红染色检测 | 第81-82页 |
| ·TE-HCE的免疫荧光检测 | 第82-83页 |
| ·TE-HCE的扫描电镜观察 | 第83页 |
| ·TE-HCE的透射电镜观察 | 第83-84页 |
| 4.讨论 | 第84-86页 |
| 5.结论 | 第86-87页 |
| 第五章 组织工程人角膜内皮在新西兰兔角膜内皮移植中的作用研究 | 第87-106页 |
| 1.材料与用品 | 第88-89页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·实验仪器 | 第88页 |
| ·实验药品 | 第88-89页 |
| ·常用溶液的配方 | 第89页 |
| 2.方法 | 第89-94页 |
| ·TE-HCE的体外重建 | 第89-90页 |
| ·去上皮层羊膜的修饰与制备 | 第89-90页 |
| ·人角膜内皮种子细胞的DiI标记 | 第90页 |
| ·TE-HCE的体外重建 | 第90页 |
| ·TE-HCE的新西兰兔后板层角膜内皮移植 | 第90-92页 |
| ·TE-HCE的新西兰兔后板层角膜内皮移植手术 | 第90-91页 |
| ·术后动物护理与观察 | 第91页 |
| ·TE-HCE的移植效果检测 | 第91-92页 |
| ·TE-HCE的角膜内皮创伤的新西兰兔后板层角膜内皮移植 | 第92-94页 |
| ·新西兰兔角膜内皮的创伤模型制作 | 第92-93页 |
| ·TE-HCE的角膜内皮创伤新西兰兔后板层角膜内皮移植手术 | 第93页 |
| ·术后动物护理与观察 | 第93-94页 |
| ·TE-HCE的移植效果检测 | 第94页 |
| 3. 结果 | 第94-102页 |
| ·TE-HCE的体外重建 | 第94-95页 |
| ·TE-HCE的新西兰兔后板层角膜内皮移植 | 第95-100页 |
| ·裂隙灯显微镜观察与照相 | 第95-97页 |
| ·移植兔右眼角膜内皮的DiI标记荧光检测 | 第97-98页 |
| ·移植兔右眼角膜内皮的茜素红染色 | 第98页 |
| ·移植兔右眼角膜内皮的冰冻切片染色 | 第98-99页 |
| ·移植兔右眼角膜内皮的扫描电镜观察 | 第99页 |
| ·移植兔右眼角膜的透射电镜观察 | 第99-100页 |
| ·TE-HCE的角膜内皮创伤新西兰兔后板层角膜内皮移植 | 第100-102页 |
| ·新西兰兔角膜内皮的创伤模型制作 | 第100-101页 |
| ·TE-HCE的角膜内皮创伤新西兰兔后板层角膜内皮移植 | 第101-102页 |
| 4.讨论 | 第102-104页 |
| 5.结论 | 第104-106页 |
| 全文总结 | 第106-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 个人简历 | 第121页 |
| 博士期间发表论文及专利情况 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
