| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 昆虫系统性免疫应答 | 第12-15页 |
| 1.1.1 体液免疫应答 | 第12-13页 |
| 1.1.2 细胞免疫应答 | 第13-14页 |
| 1.1.3 黑化反应 | 第14-15页 |
| 1.2 昆虫局部性免疫应答 | 第15-17页 |
| 1.2.1 抗菌肽的产生 | 第15-16页 |
| 1.2.2 活性氧的产生 | 第16-17页 |
| 1.3 家蚕分子免疫研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4 噬菌体展示技术研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4.1 噬菌体展示技术的建立和原理 | 第20页 |
| 1.4.2 噬菌体展示技术的分类 | 第20-21页 |
| 1.5 翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）的研究进展 | 第21-26页 |
| 1.5.1 TCTP的发现、命名以及分布与调控 | 第21-22页 |
| 1.5.2 TCTP的结构 | 第22-23页 |
| 1.5.3 TCTP的功能 | 第23-26页 |
| 第二章 引言 | 第26-30页 |
| 2.1 研究背景目的及意义 | 第26页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第26-28页 |
| 2.3 实验技术路线 | 第28-30页 |
| 第三章 家蚕中肠cDNA T7噬菌体展示文库的构建和免疫相关基因的淘选 | 第30-44页 |
| 3.1 材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 实验昆虫 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 家蚕中肠cDNA T7噬菌体展示文库的构建 | 第32-35页 |
| 3.2.2 家蚕中肠cDNA T7噬菌体展示文库的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.3 噬菌体展示文库的淘选 | 第36-37页 |
| 3.2.4 插入片段的克隆和序列分析 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.3.1 家蚕幼虫中肠cDNA T7噬菌体展示文库的构建 | 第37-38页 |
| 3.3.2 家蚕中肠cDNA T7噬菌体展示文库的淘选 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-44页 |
| 第四章 BmTCTP重组蛋白质的原核表达纯化和组织定位 | 第44-54页 |
| 4.1 材料和方法 | 第44-47页 |
| 4.1.1 材料 | 第44页 |
| 4.1.2 试剂耗材 | 第44-45页 |
| 4.1.3 仪器 | 第45页 |
| 4.1.4 主要溶液的配制 | 第45-47页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第47-50页 |
| 4.2.1 BmTCTP重组蛋白的原核表达和纯化 | 第47-48页 |
| 4.2.2 家蚕肠道TCTP的表达和分泌 | 第48-50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-53页 |
| 4.3.1 BmTCTP蛋白的原核表达和纯化 | 第50-51页 |
| 4.3.2 家蚕肠道TCTP的表达和分泌 | 第51-52页 |
| 4.3.3 家蚕感染微生物后肠道可溶性BmTCTP蛋白的变化 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 细胞水平上鉴定BmTCTP的免疫功能 | 第54-70页 |
| 5.1 实验材料和试剂耗材 | 第54-56页 |
| 5.1.1 材料 | 第54页 |
| 5.1.2 主要试剂耗材 | 第54-55页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第55页 |
| 5.1.4 主要试剂配制 | 第55-56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-61页 |
| 5.2.1 BmTCTP与病原微生物以及相关分子模式的结合 | 第56-57页 |
| 5.2.2 FITC标记细菌及吞噬实验 | 第57-58页 |
| 5.2.3 用于细胞实验的BmTCTP蛋白内毒素的去除 | 第58页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第58-59页 |
| 5.2.5 细胞水平上瞬时干涉ERK | 第59-61页 |
| 5.2.6 Westernblotting | 第61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-68页 |
| 5.3.1 BmTCTP促进家蚕血细胞对微生物的吞噬 | 第61-64页 |
| 5.3.2 BmTCTP对家蚕体液免疫的调节 | 第64-68页 |
| 5.4 讨论 | 第68-70页 |
| 第六章 个体水平上验证BmTCTP的免疫功能 | 第70-84页 |
| 6.1 材料 | 第70-72页 |
| 6.1.1 昆虫材料 | 第70页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第70-71页 |
| 6.1.3 主要溶液的配制 | 第71-72页 |
| 6.2 方法 | 第72-76页 |
| 6.2.1 转基因载体的构建和转基因家蚕的形成 | 第72-74页 |
| 6.2.2 转基因家蚕的分子检测 | 第74-75页 |
| 6.2.3 转基因家蚕的微生物感染、存活率检测以及肠道样品的准备 | 第75-76页 |
| 6.3 结果与分析 | 第76-82页 |
| 6.3.1 转基因干涉载体的构建和阳性个体的筛选 | 第76-79页 |
| 6.3.2 转基因干涉效率的分子检测 | 第79-80页 |
| 6.3.3 转基因家蚕肠道免疫的下降 | 第80-81页 |
| 6.3.4 转基因家蚕肠道ERK磷酸化的动态变化 | 第81-82页 |
| 6.4 讨论 | 第82-84页 |
| 第七章 综合与结论 | 第84-88页 |
| 7.1 家蚕中肠cDNA T7噬菌体展示文库的构建以及免疫相关基因的淘选 | 第84页 |
| 7.2 家蚕肠道BmTCTP的原核表达纯化以及组织定位 | 第84-85页 |
| 7.3 细胞水平上鉴定BmTCTP的免疫功能 | 第85页 |
| 7.4 个体水平上验证BmTCTP的免疫功能 | 第85页 |
| 7.5 全文总结BmTCTP诱导家蚕抗菌肽产生的模型 | 第85-88页 |
| 论文创新点 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-102页 |
| 发表论文及参与课题 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
