| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 杨树的生物学特征及研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 次生壁 | 第12页 |
| 1.3 木质素 | 第12-17页 |
| 1.3.1 木质素的组成 | 第12-13页 |
| 1.3.2 木质素单体的生物合成 | 第13页 |
| 1.3.3 木质素的应用 | 第13-14页 |
| 1.3.4 木质素代谢途径的调控 | 第14-17页 |
| 1.3.4.1 关键酶基因对木质素生物合成的调控 | 第14-15页 |
| 1.3.4.2 转录因子对木质素生物合成的调控 | 第15-17页 |
| 1.4 MYB转录因子 | 第17-21页 |
| 1.4.1 MYB转录因子的结构 | 第17-18页 |
| 1.4.2 MYB转录因子在木质素合成中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4.3 MYB转录因子进化上的保守性 | 第19-21页 |
| 第2章 引言 | 第21-25页 |
| 2.1 研究目标 | 第21页 |
| 2.2 研究内容 | 第21-23页 |
| 2.2.1 转录因子功能预测 | 第21页 |
| 2.2.2 PtoMYB055基因的扩增 | 第21页 |
| 2.2.3 PtoMYB055转录因子在不同组织中的表达特异性分析 | 第21页 |
| 2.2.4 PtoMYB055转录因子的启动子分析 | 第21-22页 |
| 2.2.5 PtoMYB055转录因子的转录活性分析 | 第22页 |
| 2.2.6 转基因毛白杨的功能分析 | 第22-23页 |
| 2.3 技术路线 | 第23-25页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第25-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 3.1.2 菌种及质粒 | 第25页 |
| 3.2 仪器和设备 | 第25-26页 |
| 3.3 实验试剂 | 第26-28页 |
| 3.3.1 试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| 3.3.2 常用抗生素、激素及培养基的配制 | 第27-28页 |
| 3.4 实验方法 | 第28-41页 |
| 3.4.1 氨基酸序列比对 | 第28页 |
| 3.4.2 进化树分析 | 第28页 |
| 3.4.3 毛白杨不同组织RNA的提取及反转录 | 第28-29页 |
| 3.4.3.1 毛白杨不同组织RNA的提取 | 第28页 |
| 3.4.3.2 RNA的反转录 | 第28-29页 |
| 3.4.4 基因的组织特异性分析 | 第29-30页 |
| 3.4.5 基因的引物设计 | 第30页 |
| 3.4.6 PtoMYB055的PCR扩增及载体构建 | 第30-31页 |
| 3.4.7 CaCl2法制备大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第31页 |
| 3.4.8 连接反应物及重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| 3.4.9 阳性单克隆的扩大培养与质粒提取 | 第31-32页 |
| 3.4.10 植物表达载体的农杆菌转化 | 第32-33页 |
| 3.4.11 毛白杨的遗传转化 | 第33页 |
| 3.4.12 酵母表达载体的构建、感受态细胞的制备 | 第33-35页 |
| 3.4.13 启动子的克隆、载体构建 | 第35-36页 |
| 3.4.14 基因的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 3.4.15 PtoMYB055超表达植株的分子检测 | 第37页 |
| 3.4.16 转基因毛白杨的荧光定量PCR检测 | 第37页 |
| 3.4.17 转基因植株中木质素含量的测定 | 第37页 |
| 3.4.18 石蜡切片 | 第37-38页 |
| 3.4.19 瞬时共侵染 | 第38页 |
| 3.4.20 间苯三酚染色 | 第38页 |
| 3.4.21 GUS组织化学染色 | 第38页 |
| 3.4.22 GUS酶活性的定量分析 | 第38-41页 |
| 第4章 结果与分析 | 第41-55页 |
| 4.1 PtoMYB055与其它物种MYB转录因子的进化比对 | 第41-42页 |
| 4.2 PtoMYB055与其它物种木质素相关基因的氨基酸序列比对 | 第42-43页 |
| 4.3 PtoMYB055基因的组织特异性分析 | 第43-44页 |
| 4.4 PtoMYB055基因的启动子分析 | 第44页 |
| 4.5 PtoMYB055亚细胞定位载体的克隆、构建及分析 | 第44-45页 |
| 4.6 PtoMYB055的转录激活活性 | 第45页 |
| 4.7 PtoMYB055基因的克隆及载体构建 | 第45-46页 |
| 4.8 毛白杨的遗传转化及转基因植株的获得 | 第46-47页 |
| 4.8.1 毛白杨的遗传转化 | 第46-47页 |
| 4.8.2 转基因植株的测定 | 第47页 |
| 4.9 PtoMYB055超表达植株的表达量及表型分析 | 第47-49页 |
| 4.10 PtoMYB055超表达植株茎的形态解剖学观察 | 第49-50页 |
| 4.11 PtoMYB055超表达植株木质素含量的测定 | 第50-51页 |
| 4.12 PtoMYB055超表达植株叶柄及叶脉的形态解剖学观察 | 第51-52页 |
| 4.13 PtoMYB055对次生壁代谢途径功能基因的影响 | 第52-53页 |
| 4.14 PtoMYB055对次生壁代谢途径功能基因的激活作用 | 第53-55页 |
| 第5章 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69页 |
