| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-35页 |
| 1.1 植原体研究 | 第16-30页 |
| 1.1.1 植原体及其发现 | 第16页 |
| 1.1.2 植原体病害及其症状 | 第16-18页 |
| 1.1.3 植原体病害的传播 | 第18页 |
| 1.1.4 植原体检测 | 第18-21页 |
| 1.1.5 植原体系统发育地位及植原体的分类 | 第21-24页 |
| 1.1.6 植原体基因组 | 第24-26页 |
| 1.1.7 植原体分泌蛋白及其在植原体致病中的作用 | 第26-29页 |
| 1.1.8 植原体对寄主植物的影响 | 第29-30页 |
| 1.2 小麦蓝矮病研究 | 第30-34页 |
| 1.2.1 小麦蓝矮病及其症状 | 第30-31页 |
| 1.2.2 小麦蓝矮病的危害 | 第31页 |
| 1.2.3 小麦蓝矮病病原 | 第31-32页 |
| 1.2.4 小麦蓝矮病传播介体及传播特性 | 第32页 |
| 1.2.5 小麦蓝矮植原体的寄主范围 | 第32-33页 |
| 1.2.6 小麦蓝矮植原体致病机理 | 第33页 |
| 1.2.7 小麦蓝矮病的防治 | 第33-34页 |
| 1.3 本实验研究目的和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 WBD质粒克隆及其拷贝数分析 | 第35-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 材料 | 第35-36页 |
| 2.1.2 试剂与耗材 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-42页 |
| 2.2.1 田间小麦样品的检测 | 第36-39页 |
| 2.2.2 WBD的传播和繁殖 | 第39页 |
| 2.2.3 WBD质粒片段的克隆 | 第39页 |
| 2.2.4 序列拼接与分析 | 第39-40页 |
| 2.2.5 Southern杂交 | 第40-42页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第42页 |
| 2.3 结果 | 第42-52页 |
| 2.3.1 WBD小麦植株采集 | 第42-45页 |
| 2.3.2 WBD由感病小麦传播到长春花 | 第45-46页 |
| 2.3.3 WBD质粒片段的扩增 | 第46-47页 |
| 2.3.4 WBD质粒的分子特征 | 第47-48页 |
| 2.3.5 WBD质粒的Southern blot验证 | 第48-49页 |
| 2.3.6 WBD质粒的系统发育地位 | 第49页 |
| 2.3.7 WBD质粒的拷贝数特征 | 第49-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 WBD染色体的分离纯化 | 第54-65页 |
| 3.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 3.1.1 材料 | 第54页 |
| 3.1.2 试剂与耗材 | 第54-55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 3.2.1 WBD染色体的提取 | 第55页 |
| 3.2.2 WBD染色体DNA的纯化与回收 | 第55页 |
| 3.2.3 WBD染色体DNA的PCR和Southern blot检验 | 第55-56页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR分析植原体纯化效果 | 第56页 |
| 3.2.5 电洗脱液的浓缩 | 第56页 |
| 3.2.6 基因组扩增（WGA） | 第56页 |
| 3.2.7 全基因组扩增产物中植原体DNA含量的测定 | 第56-58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-63页 |
| 3.3.1 植原体提取及染色体DNA的分离 | 第58页 |
| 3.3.2 WBD染色体DNA的PCR检验 | 第58-59页 |
| 3.3.3 WBD染色体DNA的Southern blot检验 | 第59页 |
| 3.3.4 WBD染色体DNA的浓缩与扩增 | 第59-60页 |
| 3.3.5 全基因组扩增 | 第60页 |
| 3.3.6 植原体染色体DNA纯化效果 | 第60-61页 |
| 3.3.7 全基因组扩增产物的检测 | 第61-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 WBD基因组序列测定及分析 | 第65-90页 |
| 4.1 实验方法 | 第65-66页 |
| 4.1.1 基因组文库的构建及测序 | 第65页 |
| 4.1.2 序列拼接 | 第65页 |
| 4.1.3 WBD植原体序列的筛选 | 第65页 |
| 4.1.4 WBD植原体序列再拼接 | 第65-66页 |
| 4.1.5 基因组注释 | 第66页 |
| 4.1.6 比较基因组分析 | 第66页 |
| 4.2 结果 | 第66-89页 |
| 4.2.1 测序文库的构建及序列测定 | 第66-67页 |
| 4.2.2 测序序列的拼接 | 第67-71页 |
| 4.2.3 WBD基因组草图基本特征 | 第71-73页 |
| 4.2.4 比较基因组分析 | 第73-89页 |
| 4.3 讨论 | 第89-90页 |
| 第五章 诱导植物产生植原体病害症状的分泌蛋白筛选 | 第90-105页 |
| 5.1 实验材料 | 第90页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第90页 |
| 5.1.2 载体与菌种 | 第90页 |
| 5.1.3 试剂 | 第90页 |
| 5.2 方法 | 第90-97页 |
| 5.2.1 载体构建 | 第90-95页 |
| 5.2.2 农杆菌GV3101 点击感受态制备 | 第95页 |
| 5.2.3 pGR107 重组质粒转化农杆菌GV3101 | 第95页 |
| 5.2.4 农杆菌注射烟草 | 第95-96页 |
| 5.2.5 RNA提取 | 第96页 |
| 5.2.6 DNA的去除及反转录 | 第96-97页 |
| 5.2.7 实时荧光定量定量PCR | 第97页 |
| 5.2.8 亚细胞定位 | 第97页 |
| 5.3 结果 | 第97-104页 |
| 5.3.1 WBD分泌蛋白和植原体致病因子的比较 | 第97-98页 |
| 5.3.2 分泌蛋白基因的克隆 | 第98-99页 |
| 5.3.3 分泌蛋白基因-pGR107 重组质粒的构建 | 第99-100页 |
| 5.3.4 重组质粒转化农杆菌GV3101 | 第100-101页 |
| 5.3.5 SWP1 能够诱导植物的增殖 | 第101页 |
| 5.3.6 SWP1 核定位信号不是SWP1 的定位和功能所必需的 | 第101-103页 |
| 5.3.7 SWP1 在长春花中的表达特性 | 第103-104页 |
| 5.4 讨论 | 第104-105页 |
| 第六章 激发或抑制寄主过敏性反应的分泌蛋白筛选 | 第105-120页 |
| 6.1 实验材料 | 第105-106页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第105-106页 |
| 6.1.2 菌种与载体 | 第106页 |
| 6.2 方法 | 第106-108页 |
| 6.2.1 分泌蛋白在农杆菌中的表达 | 第106页 |
| 6.2.2 台盼蓝染色 | 第106页 |
| 6.2.3 基因沉默抑制子鉴定 | 第106页 |
| 6.2.4 二氨基联苯胺（DAB）染色 | 第106页 |
| 6.2.5 苯胺蓝染色 | 第106-107页 |
| 6.2.6 定量分析 | 第107页 |
| 6.2.7 亚细胞定位 | 第107-108页 |
| 6.2.8 抑制SWP11 诱导的寄主过敏性坏死反应的分泌蛋白筛选 | 第108页 |
| 6.2.9 抑制Bax和INF1 诱导的寄主过敏性坏死反应的分泌蛋白筛选 | 第108页 |
| 6.3 结果 | 第108-118页 |
| 6.3.1 SWP11 能够激发本氏烟的过敏性坏死反应 | 第108-109页 |
| 6.3.2 SWP11 不是一个基因沉默抑制子 | 第109-110页 |
| 6.3.3 SWP11 诱导植物过氧化氢的产生和胼胝质的积累 | 第110-111页 |
| 6.3.4 SWP11 诱导过敏性坏死和寄主防御反应相关的基因的表达 | 第111-112页 |
| 6.3.5 SWP11 的亚细胞定位 | 第112-114页 |
| 6.3.6 SWP11 N端序列为引起植物过敏性坏死的功能区 | 第114-115页 |
| 6.3.7 SWP11 的在寄主植物植原体中的表达规律 | 第115-116页 |
| 6.3.8 其他植原体中存在与SWP11 相似的蛋白 | 第116页 |
| 6.3.9 抑制SWP11 激发的过敏性坏死反应的分泌蛋白筛选 | 第116-117页 |
| 6.3.10 抑制其他激发子介导的过敏性坏死反应的分泌蛋白筛选 | 第117-118页 |
| 6.4 讨论 | 第118-120页 |
| 第七章 全文结论及创新点 | 第120-123页 |
| 7.1 全文结论 | 第120-121页 |
| 7.2 创新点 | 第121-122页 |
| 7.3 展望 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-138页 |
| 附录 | 第138-163页 |
| 缩略词 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164-165页 |
| 作者简介 | 第165页 |
