| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 技术路线 | 第12-13页 |
| 主要符号对照表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一部分 细粒棘球蚴人体内蛋白质表达谱初步分析 | 第16-25页 |
| 1.1 材料 | 第16-17页 |
| 1.1.1 实验标本 | 第16页 |
| 1.1.2 试剂及配制方法 | 第16-17页 |
| 1.2 方法 | 第17-21页 |
| 1.2.1 原头节总蛋白的制备 | 第17-18页 |
| 1.2.2 囊壁总蛋白的制备 | 第18页 |
| 1.2.3 囊液总蛋白的制备 | 第18页 |
| 1.2.4 制胶 | 第18-19页 |
| 1.2.5 蛋白样品准备 | 第19-20页 |
| 1.2.6 Western-blot | 第20-21页 |
| 1.3 结果 | 第21-23页 |
| 1.3.1 样本质量 | 第21页 |
| 1.3.2 样本浓度 | 第21-22页 |
| 1.3.3 SDS-PAGE、Western-blot结果 | 第22-23页 |
| 1.4 讨论 | 第23-25页 |
| 第二部分 细粒棘球蚴原头节及囊壁蛋白质筛选 | 第25-39页 |
| 2.1 材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验标本 | 第25页 |
| 2.1.2 二维电泳主要试剂及配制方法 | 第25-27页 |
| 2.1.3 主要仪器及材料 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 蛋白样品的制备 | 第28页 |
| 2.2.2 蛋白样品的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.3 蛋白浓度测定 | 第29页 |
| 2.2.4 IPG干胶条再水化与等电聚焦电泳（IEF） | 第29-30页 |
| 2.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 2.2.6 质谱分析 | 第31-32页 |
| 2.3 结果 | 第32-35页 |
| 2.3.1 二维电泳结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 质谱分析结果 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-39页 |
| 第三部分 烯醇酶与转酮醇酶生物信息学分析 | 第39-57页 |
| 3.1 序列获取 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 理化性质预测 | 第39页 |
| 3.2.2 亲水性、柔性区域、抗原性指数、表面可及性 | 第39页 |
| 3.2.3 亚细胞定位 | 第39页 |
| 3.2.4 B、T细胞表位预测 | 第39页 |
| 3.2.5 跨膜区、三级结构预测 | 第39-40页 |
| 3.2.6 同源性分析 | 第40页 |
| 3.3 烯醇酶生物信息学分析结果 | 第40-46页 |
| 3.3.1 烯醇酶序列基本信息 | 第40-41页 |
| 3.3.2 理化性质 | 第41页 |
| 3.3.3 信号肽 | 第41-42页 |
| 3.3.4 亲水性、柔性区域、抗原性指数及表面可及性分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 亚细胞定位 | 第43页 |
| 3.3.6 B细胞表位 | 第43页 |
| 3.3.7 T细胞表位 | 第43-44页 |
| 3.3.8 二级结构 | 第44页 |
| 3.3.9 跨膜区 | 第44页 |
| 3.3.10 三级结构 | 第44-45页 |
| 3.3.11 多序列比对 | 第45-46页 |
| 3.4 转酮醇酶生物信息学分析结果 | 第46-54页 |
| 3.4.1 转酮醇酶序列基本信息 | 第46-48页 |
| 3.4.2 理化性质 | 第48页 |
| 3.4.3 疏水性分析 | 第48页 |
| 3.4.4 信号肽分析 | 第48-49页 |
| 3.4.5 亲水性、柔性区域、抗原性指数及表面可及性预测 | 第49-50页 |
| 3.4.6 亚细胞定位 | 第50页 |
| 3.4.7 B细胞线性表位预测 | 第50页 |
| 3.4.8 T细胞表位 | 第50-51页 |
| 3.4.9 二级结构 | 第51页 |
| 3.4.10 跨膜区预测 | 第51-52页 |
| 3.4.11 三级结构 | 第52页 |
| 3.4.12 多序列比对 | 第52-54页 |
| 3.5 讨论 | 第54-57页 |
| 第四部分 烯醇酶、转酮醇酶基因克隆表达及免疫学分析 | 第57-71页 |
| 4.1 材料 | 第57-59页 |
| 4.1.1 实验标本 | 第57页 |
| 4.1.2 主要试剂及材料 | 第57页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第58-59页 |
| 4.2 方法 | 第59-64页 |
| 4.2.1 目的基因引物设计 | 第59页 |
| 4.2.2 RNA提取 | 第59页 |
| 4.2.3 cDNA第一条链合成及目的基因扩增 | 第59-60页 |
| 4.2.4 目的基因鉴定及纯化 | 第60页 |
| 4.2.5 原核克隆载体构建及鉴定 | 第60-61页 |
| 4.2.6 原核表达载体构建及鉴定 | 第61-62页 |
| 4.2.7 小试培养选择最佳诱导条件 | 第62页 |
| 4.2.8 大量诱导表达 | 第62页 |
| 4.2.9 蛋白纯化 | 第62-63页 |
| 4.2.10 纯化蛋白鉴定 | 第63页 |
| 4.2.11 酶联免疫吸附试验 | 第63-64页 |
| 4.3 结果 | 第64-69页 |
| 4.3.1 原头节总RNA提取结果 | 第64页 |
| 4.3.2 EgEn、EgTK基因PCR结果 | 第64-65页 |
| 4.3.3 克隆质粒PCR产物测序 | 第65页 |
| 4.3.4 表达载体双酶切 | 第65-66页 |
| 4.3.5 EgEn、EgTK蛋白诱导表达SDS-PAGE结果 | 第66页 |
| 4.3.6 EgEn、EgTK蛋白纯化SDS-PAGE结果 | 第66-67页 |
| 4.3.7 纯化蛋白浓度测定 | 第67-68页 |
| 4.3.8 纯化蛋白Western Blot分析结果 | 第68页 |
| 4.3.9 酶联免疫吸附试验结果 | 第68-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79-80页 |
| 细粒棘球绦虫抗原基因的克隆与表达研究现状 | 第80-87页 |
| 综述参考文献 | 第85-87页 |
