| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 TGF-β信号通路及信号调控 | 第12-18页 |
| 1.1.1 TGF-β超家族 | 第12-13页 |
| 1.1.2 TGF-β信号通路 | 第13-15页 |
| 1.1.3 TGF-β信号通路的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.4 TGF-β信号通路的调控 | 第16-18页 |
| 1.2 蛋白激酶 | 第18-19页 |
| 1.3 DYRK蛋白激酶 | 第19-22页 |
| 1.3.1 DYRK蛋白激酶的结构 | 第19-21页 |
| 1.3.2 DYRK蛋白激酶的功能 | 第21-22页 |
| 1.4 泛素化修饰及功能调控 | 第22-23页 |
| 1.5 EDVP复合物 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-44页 |
| 2.1 材料 | 第25-29页 |
| 2.1.1 细胞系与菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 主要的抗体 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 常规溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.2 实验仪器 | 第29-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-44页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第31-32页 |
| 2.3.2 细胞转染 | 第32-33页 |
| 2.3.3 Western blot技术 | 第33-34页 |
| 2.3.4 荧光素酶报告基因检测 | 第34页 |
| 2.3.5 免疫共沉淀技术(Co-IP) | 第34-35页 |
| 2.3.6 体外激酶反应 | 第35-36页 |
| 2.3.7 γ-S体外激酶反应 | 第36-37页 |
| 2.3.8 siRNA技术 | 第37-38页 |
| 2.3.9 DNA Pull-Down | 第38-39页 |
| 2.3.10 质粒构建 | 第39-41页 |
| 2.3.11 大肠杆菌转化 | 第41页 |
| 2.3.12 定点突变技术 | 第41-42页 |
| 2.3.13 Real-Time PCR技术 | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-69页 |
| 3.1 DYRK蛋白激酶负调控TGF-β信号通路 | 第44-49页 |
| 3.1.1 DYRK蛋白激酶比较显著地抑制TGF-β信号通路 | 第44-45页 |
| 3.1.2 DYRK蛋白激酶抑制TGF-β信号通路依赖于它们的激酶活性 | 第45-47页 |
| 3.1.3 敲低DYRK蛋白激酶将增强TGF-β信号通路 | 第47-49页 |
| 3.2 DYRK蛋白激酶与Smad3相互作用形成复合体 | 第49-51页 |
| 3.3 DYRK蛋白激酶直接磷酸化修饰Smad3 | 第51-57页 |
| 3.3.1 DYRK蛋白激酶在细胞内或体外磷酸化修饰Smad3的多个位点 | 第51-53页 |
| 3.3.2 DYRK蛋白激酶磷酸化修饰Smad3的Thr132和Thr179残基 | 第53-55页 |
| 3.3.3 DYRK蛋白激酶在细胞内和体外均促进Smad3的C端SXS位点的磷酸化 | 第55-57页 |
| 3.4. DYRK蛋白激酶介导的修饰阻断Smad3与启动子结合 | 第57-61页 |
| 3.4.1 DYRK蛋白激酶促进Smad3：Smad4复合物的形成 | 第57-59页 |
| 3.4.2 核质分离实验表明DYRK2促进Smad3的入核 | 第59-60页 |
| 3.4.3 DYRK2减弱Smad3与转录共激活子p300的结合 | 第60-61页 |
| 3.4.4 DYRK2减弱Smad3结合DNA的能力 | 第61页 |
| 3.5. DYRK蛋白激酶诱导Smad3招募EDVP复合物阻断其活性与功能 | 第61-69页 |
| 3.5.1 VPRBP和DDB1与Smad3具有相互作用 | 第62-63页 |
| 3.5.2 敲低EDVP复合体成分上调TGF-β信号通过增强Smad3的稳定性 | 第63-65页 |
| 3.5.3 过表达EDVP复合体成员蛋白抑制TGF-β信号通路通过促进Smad3的降解 | 第65-67页 |
| 3.5.4 EDVP复合物可能泛素化修饰Smad3的Lys333残基 | 第67-69页 |
| 4 结论与讨论 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 作者简介和科研成果 | 第79页 |
