摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-14页 |
实验材料与方法 | 第14-35页 |
一、实验器材设备与耗材 | 第14-15页 |
(一)常用仪器设备 | 第14页 |
(二)常用耗材 | 第14-15页 |
二、实验试剂及其制备 | 第15-21页 |
(一)细胞培养用主要试剂及其制备 | 第15-16页 |
(二)分子生物学实验主要试剂及其制备 | 第16-20页 |
(三)免疫实验主要试剂及制备 | 第20-21页 |
三、实验方法 | 第21-35页 |
(一)四环素诱导型双因子表达载体的构建与提取 | 第21-26页 |
(二)四环素控制的iHepSC诱导体系的建立 | 第26-28页 |
(三)iHepSCs-Dox细胞生物学特性鉴定 | 第28-31页 |
(四)iHepSCs-Dox的生长特性检测 | 第31-32页 |
(五)Tet表达检测 | 第32-33页 |
(六)DNA甲基化及羟甲基化水平检测 | 第33-35页 |
实验结果 | 第35-50页 |
一、四环素诱导型慢病毒载体的构建与鉴定 | 第35-36页 |
二、四环素诱导型载体表达检测及最适Doxycycline诱导浓度的确定 | 第36-39页 |
三、TetO-Hnf1β-EGFP与TetO-Foxa3-mCherry可对MEF细胞进行有效重编程,获得iHepSCs-Dox细胞 | 第39-45页 |
四、Tet参与MEF细胞转分化为iHepSCs的过程 | 第45-50页 |
讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
综述 提高细胞重编程效率和安全性的策略 | 第55-66页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录:慢病毒载体图谱 | 第66-69页 |
攻读学位期间发表论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |