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玫瑰花青素苷合成相关基因的克隆及表达分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-21页
    1.1 玫瑰花色育种的发展现状第12-14页
        1.1.1 玫瑰品种的概况第12-13页
        1.1.2 玫瑰花色育种的相关研究第13-14页
    1.2 花青素苷生物合成途径及相关基因的研究第14-21页
        1.2.1 花青素苷生物合成途径的研究第14-16页
        1.2.2 花青素苷生物合成途径中相关结构基因的研究第16-21页
            1.2.2.1 查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS)第16-17页
            1.2.2.2 查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)第17-18页
            1.2.2.3 黄烷酮 3-羟化酶(Flavonoid 3-hydroxylase,F3H)第18-19页
            1.2.2.4 二氢黄酮醇还原酶(Dihydroflavonol 4-reductas,DFR)第19-20页
            1.2.2.5 花青素合成酶(Anthocyanidin synthase,ANS)第20-21页
    1.3 本研究目的及意义第21页
2.材料与方法第21-31页
    2.1 玫瑰花青素苷合成相关基因的克隆第21-27页
        2.1.1 试验材料第21页
        2.1.2 菌株和质粒第21-22页
        2.1.3 主要试剂第22页
        2.1.4 主要试剂配制第22页
        2.1.5 主要仪器第22-23页
        2.1.6 试验方法第23-27页
            2.1.6.1 总RNA提取第23页
            2.1.6.2 总RNA质量检测第23-24页
            2.1.6.3 反转录合成cDNA第一链第24页
            2.1.6.4 引物设计第24-25页
            2.1.6.5 PCR反应体系和扩增条件第25页
            2.1.6.6 PCR产物的检测第25页
            2.1.6.7 目的片段的回收、连接和转化第25-27页
            2.1.6.8 生物信息学分析第27页
    2.2 玫瑰花青素苷合成相关基因的表达分析第27-30页
        2.2.1 试验材料第28页
        2.2.2 主要试剂第28页
        2.2.3 主要仪器第28-29页
        2.2.4 试验方法第29-30页
            2.2.4.1 总RNA提取以及纯度与完整性的鉴定第29页
            2.2.4.2 cDNA的合成第29页
            2.2.4.3 引物设计第29-30页
            2.2.4.4 实时荧光定量RT-PCR第30页
    2.3 玫瑰花青素苷含量的测定第30-31页
        2.3.1 试验材料第30页
        2.3.2 主要试剂第30-31页
        2.3.3 主要仪器第31页
        2.3.4 试验方法第31页
3.结果与分析第31-56页
    3.1 玫瑰花青素苷合成相关基因的克隆第31-49页
        3.1.1 玫瑰花总RNA质量检测第31页
        3.1.2 玫瑰RrCHS、RrCHI、RrF3H、RrDFR和RrANS基因的克隆第31-32页
        3.1.3 玫瑰RrCHS、RrCHI、RrF3H和RrDFR的生物信息学分析第32-49页
            3.1.3.1 RrCHS的序列与生物信息学分析第32-36页
            3.1.3.2 RrCHI的序列与生物信息学分析第36-40页
            3.1.3.3 RrF3H的序列与生物信息学分析第40-44页
            3.1.3.4 RrDFR的序列与生物信息学分析第44-49页
    3.2 玫瑰花青素苷合成相关基因的表达分析第49-55页
        3.2.1 玫瑰花青素苷合成途径关键结构基因的时间表达模式分析第49-53页
            3.2.1.1 RrCHS基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析第49-50页
            3.2.1.2 RrCHI基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析第50页
            3.2.1.3 RrF3H基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析第50-51页
            3.2.1.4 RrDFR基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析第51-52页
            3.2.1.5 RrANS基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析第52-53页
        3.2.2 玫瑰花青素苷合成途径关键结构基因的空间表达模式分析第53-55页
            3.2.2.1 RrCHS基因的器官特异性表达分析第53页
            3.2.2.2 RrCHI基因的器官特异性表达分析第53-54页
            3.2.2.3 RrF3H基因的器官特异性表达分析第54页
            3.2.2.4 RrDFR基因的器官特异性表达分析第54-55页
            3.2.2.5 RrANS基因的器官特异性表达分析第55页
    3.3 玫瑰花青素苷含量的测定第55-56页
4 讨论第56-62页
    4.1 玫瑰花青素苷合成途径中结构基因的克隆与序列分析第56-57页
    4.2 玫瑰开花过程中花青素合成结构基因表达特性分析第57-60页
        4.2.1 玫瑰开花过程中RrCHS基因表达特性分析第57-58页
        4.2.2 玫瑰开花过程中RrCHI基因表达特性分析第58-59页
        4.2.3 玫瑰开花过程中RrDFR基因表达特性分析第59页
        4.2.4 玫瑰开花过程中RrF3H和RrANS基因表达特性分析第59-60页
    4.3 玫瑰开花过程中花青素合成结构基因表达与花青苷积累及花色的关系第60-61页
    4.4 玫瑰不同组织部位花青素合成结构基因表达特性分析第61-62页
5 结论第62-63页
创新点第63-64页
参考文献第64-74页
致谢第74-75页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第75页

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