符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-21页 |
1.1 玫瑰花色育种的发展现状 | 第12-14页 |
1.1.1 玫瑰品种的概况 | 第12-13页 |
1.1.2 玫瑰花色育种的相关研究 | 第13-14页 |
1.2 花青素苷生物合成途径及相关基因的研究 | 第14-21页 |
1.2.1 花青素苷生物合成途径的研究 | 第14-16页 |
1.2.2 花青素苷生物合成途径中相关结构基因的研究 | 第16-21页 |
1.2.2.1 查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS) | 第16-17页 |
1.2.2.2 查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI) | 第17-18页 |
1.2.2.3 黄烷酮 3-羟化酶(Flavonoid 3-hydroxylase,F3H) | 第18-19页 |
1.2.2.4 二氢黄酮醇还原酶(Dihydroflavonol 4-reductas,DFR) | 第19-20页 |
1.2.2.5 花青素合成酶(Anthocyanidin synthase,ANS) | 第20-21页 |
1.3 本研究目的及意义 | 第21页 |
2.材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 玫瑰花青素苷合成相关基因的克隆 | 第21-27页 |
2.1.1 试验材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第21-22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第22页 |
2.1.5 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.6 试验方法 | 第23-27页 |
2.1.6.1 总RNA提取 | 第23页 |
2.1.6.2 总RNA质量检测 | 第23-24页 |
2.1.6.3 反转录合成cDNA第一链 | 第24页 |
2.1.6.4 引物设计 | 第24-25页 |
2.1.6.5 PCR反应体系和扩增条件 | 第25页 |
2.1.6.6 PCR产物的检测 | 第25页 |
2.1.6.7 目的片段的回收、连接和转化 | 第25-27页 |
2.1.6.8 生物信息学分析 | 第27页 |
2.2 玫瑰花青素苷合成相关基因的表达分析 | 第27-30页 |
2.2.1 试验材料 | 第28页 |
2.2.2 主要试剂 | 第28页 |
2.2.3 主要仪器 | 第28-29页 |
2.2.4 试验方法 | 第29-30页 |
2.2.4.1 总RNA提取以及纯度与完整性的鉴定 | 第29页 |
2.2.4.2 cDNA的合成 | 第29页 |
2.2.4.3 引物设计 | 第29-30页 |
2.2.4.4 实时荧光定量RT-PCR | 第30页 |
2.3 玫瑰花青素苷含量的测定 | 第30-31页 |
2.3.1 试验材料 | 第30页 |
2.3.2 主要试剂 | 第30-31页 |
2.3.3 主要仪器 | 第31页 |
2.3.4 试验方法 | 第31页 |
3.结果与分析 | 第31-56页 |
3.1 玫瑰花青素苷合成相关基因的克隆 | 第31-49页 |
3.1.1 玫瑰花总RNA质量检测 | 第31页 |
3.1.2 玫瑰RrCHS、RrCHI、RrF3H、RrDFR和RrANS基因的克隆 | 第31-32页 |
3.1.3 玫瑰RrCHS、RrCHI、RrF3H和RrDFR的生物信息学分析 | 第32-49页 |
3.1.3.1 RrCHS的序列与生物信息学分析 | 第32-36页 |
3.1.3.2 RrCHI的序列与生物信息学分析 | 第36-40页 |
3.1.3.3 RrF3H的序列与生物信息学分析 | 第40-44页 |
3.1.3.4 RrDFR的序列与生物信息学分析 | 第44-49页 |
3.2 玫瑰花青素苷合成相关基因的表达分析 | 第49-55页 |
3.2.1 玫瑰花青素苷合成途径关键结构基因的时间表达模式分析 | 第49-53页 |
3.2.1.1 RrCHS基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析 | 第49-50页 |
3.2.1.2 RrCHI基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析 | 第50页 |
3.2.1.3 RrF3H基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析 | 第50-51页 |
3.2.1.4 RrDFR基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析 | 第51-52页 |
3.2.1.5 RrANS基因在3个玫瑰品种5个开花时期的表达分析 | 第52-53页 |
3.2.2 玫瑰花青素苷合成途径关键结构基因的空间表达模式分析 | 第53-55页 |
3.2.2.1 RrCHS基因的器官特异性表达分析 | 第53页 |
3.2.2.2 RrCHI基因的器官特异性表达分析 | 第53-54页 |
3.2.2.3 RrF3H基因的器官特异性表达分析 | 第54页 |
3.2.2.4 RrDFR基因的器官特异性表达分析 | 第54-55页 |
3.2.2.5 RrANS基因的器官特异性表达分析 | 第55页 |
3.3 玫瑰花青素苷含量的测定 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-62页 |
4.1 玫瑰花青素苷合成途径中结构基因的克隆与序列分析 | 第56-57页 |
4.2 玫瑰开花过程中花青素合成结构基因表达特性分析 | 第57-60页 |
4.2.1 玫瑰开花过程中RrCHS基因表达特性分析 | 第57-58页 |
4.2.2 玫瑰开花过程中RrCHI基因表达特性分析 | 第58-59页 |
4.2.3 玫瑰开花过程中RrDFR基因表达特性分析 | 第59页 |
4.2.4 玫瑰开花过程中RrF3H和RrANS基因表达特性分析 | 第59-60页 |
4.3 玫瑰开花过程中花青素合成结构基因表达与花青苷积累及花色的关系 | 第60-61页 |
4.4 玫瑰不同组织部位花青素合成结构基因表达特性分析 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
创新点 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75页 |