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外源性骨矿化蛋白1转染人胎盘源间充质干细胞及其蛋白质组研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
绪论第12-20页
    1 骨移植第12-13页
    2 骨生物学及微环境第13-14页
    3 生物活性因子第14-15页
    4 组织工程技术第15-16页
    5 生物力学第16页
    6 基因疗法第16-17页
    7 本文设计的思路第17-20页
第一章 胎盘源间充质干细胞的培养与鉴定第20-28页
    1.1 实验材料和仪器第20-21页
    1.2 实验方法第21-23页
        1.2.1 hPDMSCs的分离、培养第21-22页
        1.2.2 流式细胞仪检测第22页
        1.2.3 hPDMSCs的成骨诱导分化第22页
        1.2.4 hPDMSCs的成脂诱导分化第22-23页
    1.3 实验结果第23-26页
        1.3.1 细胞生长状况第23-24页
        1.3.2 流式细胞仪鉴定结果第24页
        1.3.3 von Kossa染色鉴定骨结节形成第24-25页
        1.3.4 成脂肪诱导分化结果第25-26页
    1.4 讨论第26-28页
第二章 人LMP-1 基因重组载体的构建及在HPDMSCS的表达第28-62页
    2.1 实验材料和仪器第28-29页
    2.2 实验方法第29-45页
        2.2.1 LMP-1 载体构建第29-33页
        2.2.2 LMP-1 腺病毒包装第33-35页
        2.2.3 腺病毒PDC316-LIM1GFP感染h PDMSCs细胞第35-36页
        2.2.4 RT-qPCR检测LMP-1 基因表达第36-39页
        2.2.5 Western Blot检测LMP-1 蛋白表达第39-42页
        2.2.6 RT-qPCR检测骨钙素和II型胶原基因表达第42-44页
        2.2.7 再次鉴定转染外源性LMP-1 的hPDMSCs的多向分化能力第44-45页
    2.3 实验结果第45-59页
        2.3.1 酶切检验第45页
        2.3.2 测序结果报告单第45-50页
        2.3.3 LMP-1 腺病毒包装第50-52页
        2.3.4 RT-qPCR检测LMP-1 基因水平的表达第52-54页
        2.3.5 Western Blot检测LMP-1 蛋白表达第54-55页
        2.3.6 RT-qPCR检测骨钙素和II型胶原基因表达第55-58页
        2.3.7 转染外源性LMP-1 基因的hPDMSCs的多向分化能力鉴定第58-59页
    2.4 讨论第59-62页
第三章 蛋白质组学分析表达外源性LMP-1 对HPDMSCS分化影响的研究第62-80页
    3.1 实验材料和仪器第62-65页
        3.1.1 实验材料第62页
        3.1.2 实验试剂第62-65页
    3.2 实验方法第65-71页
        3.2.1 第一向等电聚焦第65-67页
        3.2.2 胶条平衡第67页
        3.2.3 第二向SDS-PAGE电泳第67-68页
        3.2.4 胶内消化第68-69页
        3.2.5 质谱分析第69页
        3.2.6 蛋白鉴定第69-70页
        3.2.7 蛋白免疫印迹(Western Blot)第70-71页
    3.3 实验结果第71-76页
        3.3.1 双向电泳及质谱鉴定第71-72页
        3.3.2 差异蛋白的质谱鉴定与分析第72-76页
        3.3.3 差异蛋白Western blot验证第76页
    3.4 讨论第76-80页
第四章 结论第80-82页
参考文献第82-92页
附录第92-94页
作者简介及科研成果第94-96页
致谢第96页

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