摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 口蹄疫的危害 | 第10页 |
1.2 口蹄疫分布情况 | 第10-13页 |
1.2.1 口蹄疫在全球的流行 | 第10-12页 |
1.2.2 中国口蹄疫流行现状 | 第12-13页 |
1.3 口蹄疫病原特征 | 第13-16页 |
1.3.1 口蹄疫病毒基因组结构 | 第13-14页 |
1.3.2 结构蛋白及其功能 | 第14-15页 |
1.3.3 抗原变异性 | 第15页 |
1.3.4 口蹄疫病毒抗原表位 | 第15-16页 |
1.3.5 免疫应答 | 第16页 |
1.4 口蹄疫疫苗研究进展 | 第16-19页 |
1.4.1 灭活疫苗 | 第16-17页 |
1.4.2 弱毒疫苗 | 第17页 |
1.4.3 新型疫苗 | 第17页 |
1.4.4 合成肽疫苗 | 第17-18页 |
1.4.5 核酸疫苗 | 第18-19页 |
1.4.6 可饲疫苗 | 第19页 |
1.5 诊断技术研究进展 | 第19-24页 |
1.5.1 临床诊断 | 第19-20页 |
1.5.2 实验室诊断 | 第20-23页 |
1.5.3 分子生物学诊断方法 | 第23-24页 |
第二章 FMDV重组VP1截短蛋白的克隆表达及纯化 | 第24-34页 |
2.1 材料 | 第24页 |
2.1.1 菌株、质粒 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂及酶 | 第24页 |
2.1.3 主要血清 | 第24页 |
2.2 方法 | 第24-30页 |
2.2.1 引物的设计与合成 | 第24-25页 |
2.2.2 目的基因PCR扩增 | 第25页 |
2.2.3 PCR产物与表达载体的双酶切 | 第25-26页 |
2.2.4 目的基因与表达载体的连接 | 第26页 |
2.2.5 目的基因的转化及阳性转化子鉴定 | 第26-27页 |
2.2.6 重组蛋白表达性质的鉴定 | 第27-28页 |
2.2.7 重组蛋白表达条件的优化 | 第28页 |
2.2.8 重组蛋白的纯化 | 第28-30页 |
2.3 结果 | 第30-32页 |
2.3.1 目的基因PCR扩增 | 第30页 |
2.3.2 阳性转化子的鉴定及测序结果 | 第30-31页 |
2.3.3 重组VP1截短蛋白131-213氨基酸基因片段的表达及鉴定 | 第31-32页 |
2.4 讨论 | 第32-33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 FMDV重组VP1截短蛋白间接ELISA方法的初步建立 | 第34-46页 |
3.1 材料 | 第34-35页 |
3.1.1 主要试剂 | 第34页 |
3.1.2 血清背景 | 第34-35页 |
3.2 方法 | 第35-38页 |
3.2.1 蛋白浓度的测定 | 第35页 |
3.2.2 抗原最佳包被浓度的确定 | 第35页 |
3.2.3 最佳血清稀释度的确定 | 第35页 |
3.2.4 最佳酶标二抗工作浓度的确定 | 第35-36页 |
3.2.5 临界值的的确定 | 第36页 |
3.2.6 特异性实验 | 第36页 |
3.2.7 敏感性实验 | 第36页 |
3.2.8 重复性试验 | 第36页 |
3.2.9 稳定性试验 | 第36-37页 |
3.2.10 对比试验 | 第37-38页 |
3.3 结果 | 第38-43页 |
3.3.1 抗原最佳包被浓度及血清稀释倍数 | 第38-39页 |
3.3.2 最佳酶标二抗工作浓度的确定 | 第39页 |
3.3.3 临界值的确定 | 第39-40页 |
3.3.4 特异性试验及敏感性试验 | 第40-41页 |
3.3.5 重复性试验 | 第41页 |
3.3.6 稳定性试验 | 第41-42页 |
3.3.7 对比试验 | 第42-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
3.5 小结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |