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猪O型口蹄疫病毒VP1截短蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-24页
    1.1 口蹄疫的危害第10页
    1.2 口蹄疫分布情况第10-13页
        1.2.1 口蹄疫在全球的流行第10-12页
        1.2.2 中国口蹄疫流行现状第12-13页
    1.3 口蹄疫病原特征第13-16页
        1.3.1 口蹄疫病毒基因组结构第13-14页
        1.3.2 结构蛋白及其功能第14-15页
        1.3.3 抗原变异性第15页
        1.3.4 口蹄疫病毒抗原表位第15-16页
        1.3.5 免疫应答第16页
    1.4 口蹄疫疫苗研究进展第16-19页
        1.4.1 灭活疫苗第16-17页
        1.4.2 弱毒疫苗第17页
        1.4.3 新型疫苗第17页
        1.4.4 合成肽疫苗第17-18页
        1.4.5 核酸疫苗第18-19页
        1.4.6 可饲疫苗第19页
    1.5 诊断技术研究进展第19-24页
        1.5.1 临床诊断第19-20页
        1.5.2 实验室诊断第20-23页
        1.5.3 分子生物学诊断方法第23-24页
第二章 FMDV重组VP1截短蛋白的克隆表达及纯化第24-34页
    2.1 材料第24页
        2.1.1 菌株、质粒第24页
        2.1.2 主要试剂及酶第24页
        2.1.3 主要血清第24页
    2.2 方法第24-30页
        2.2.1 引物的设计与合成第24-25页
        2.2.2 目的基因PCR扩增第25页
        2.2.3 PCR产物与表达载体的双酶切第25-26页
        2.2.4 目的基因与表达载体的连接第26页
        2.2.5 目的基因的转化及阳性转化子鉴定第26-27页
        2.2.6 重组蛋白表达性质的鉴定第27-28页
        2.2.7 重组蛋白表达条件的优化第28页
        2.2.8 重组蛋白的纯化第28-30页
    2.3 结果第30-32页
        2.3.1 目的基因PCR扩增第30页
        2.3.2 阳性转化子的鉴定及测序结果第30-31页
        2.3.3 重组VP1截短蛋白131-213氨基酸基因片段的表达及鉴定第31-32页
    2.4 讨论第32-33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 FMDV重组VP1截短蛋白间接ELISA方法的初步建立第34-46页
    3.1 材料第34-35页
        3.1.1 主要试剂第34页
        3.1.2 血清背景第34-35页
    3.2 方法第35-38页
        3.2.1 蛋白浓度的测定第35页
        3.2.2 抗原最佳包被浓度的确定第35页
        3.2.3 最佳血清稀释度的确定第35页
        3.2.4 最佳酶标二抗工作浓度的确定第35-36页
        3.2.5 临界值的的确定第36页
        3.2.6 特异性实验第36页
        3.2.7 敏感性实验第36页
        3.2.8 重复性试验第36页
        3.2.9 稳定性试验第36-37页
        3.2.10 对比试验第37-38页
    3.3 结果第38-43页
        3.3.1 抗原最佳包被浓度及血清稀释倍数第38-39页
        3.3.2 最佳酶标二抗工作浓度的确定第39页
        3.3.3 临界值的确定第39-40页
        3.3.4 特异性试验及敏感性试验第40-41页
        3.3.5 重复性试验第41页
        3.3.6 稳定性试验第41-42页
        3.3.7 对比试验第42-43页
    3.4 讨论第43-45页
    3.5 小结第45-46页
参考文献第46-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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