| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第10页 |
| 1. 国内外研究现状 | 第10-22页 |
| 1.1 传统重金属污染土壤修复技术 | 第10-11页 |
| 1.2 超富集植物修复重金属污染土壤 | 第11-12页 |
| 1.2.1 超富集植物 | 第11页 |
| 1.2.2 超富集植物普陀山苔草 | 第11-12页 |
| 1.2.3 植物对重金属的胁迫响应机制 | 第12页 |
| 1.3 植物络合素与植物络合素合酶 | 第12-19页 |
| 1.3.1 植物络合素的功能 | 第12-14页 |
| 1.3.2 植物络合素的合成与调控 | 第14-17页 |
| 1.3.3 植物络合素合酶与植物络合素合酶基因 | 第17-18页 |
| 1.3.4 PCS基因的克隆表达及转PCS基因植物研究 | 第18-19页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第19页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第19-22页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.2 苔草的栽培与处理 | 第22-23页 |
| 2.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.4 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.5 培养基 | 第24页 |
| 2.6 方法 | 第24-34页 |
| 2.6.1 普陀山苔草、金叶苔草总RNA的提取与检测 | 第24-25页 |
| 2.6.2 3'和5'RACE-ready cDNA模板的制备 | 第25-26页 |
| 2.6.3 RT-PCR模板的制备 | 第26页 |
| 2.6.4 全长克隆引物设计 | 第26-28页 |
| 2.6.5 PCR反应 | 第28页 |
| 2.6.6 PCR产物回收纯化、TA克隆及测序 | 第28-31页 |
| 2.6.7 普陀山苔草CpPCS基因序列分析 | 第31页 |
| 2.6.8 qRT-PCR引物设计 | 第31页 |
| 2.6.9 qRT-PCR检测基因表达 | 第31-34页 |
| 3. 结果与分析 | 第34-50页 |
| 3.1 普陀山苔草(Carex putuoshan)、金叶苔草(Carex evergold)总RNA的提取 | 第34页 |
| 3.2 普陀山苔草植物络合素合酶基因(CpPCS)的克隆 | 第34-35页 |
| 3.3 普陀山苔草CpPCS基因序列分析 | 第35-42页 |
| 3.3.1 CpPCS基因序列特征 | 第35-38页 |
| 3.3.2 CpPCS蛋白亲水性及跨膜区预测 | 第38-39页 |
| 3.3.3 CpPCS编码蛋白结构预测 | 第39-40页 |
| 3.3.4 系统进化树的构建 | 第40-42页 |
| 3.4 铅锌胁迫下普陀山苔草植物络合素合酶基因应答模式分析 | 第42-50页 |
| 3.4.1 QRT-PCR体系建立 | 第42-44页 |
| 3.4.2 普陀山苔草铅锌胁迫下CpPCS表达量 | 第44-45页 |
| 3.4.3 金叶苔草铅锌胁迫下CePCS表达量 | 第45-46页 |
| 3.4.4 铅胁迫下CpPCS及CePCS表达量 | 第46-47页 |
| 3.4.5 锌胁迫下CpPCS及CePCS表达量 | 第47-48页 |
| 3.4.6 铅锌复合胁迫下CpPCS及CePCS表达量 | 第48-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 普陀山苔草植物络合素合酶基因(CpPCS)克隆及序列功能分析 | 第50-51页 |
| 4.2 铅锌胁迫下普陀山苔草植物络合素合酶基因应答模式分析 | 第51-54页 |
| 5. 结论 | 第54-56页 |
| 6. 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
