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亚油酸异构酶PAI的表达优化及其固定化研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-26页
   ·概述第14-15页
   ·共轭亚油酸的主要生理功能第15-17页
     ·减少机体脂质的积累及作用机制第15-16页
     ·抗炎症和抗癌功能及其生理机制第16-17页
   ·共轭亚油酸的合成第17-20页
     ·化学法合成CLA第17-18页
     ·CLA生物合成法第18-20页
     ·共轭亚油酸合成研究现状第20页
   ·CLA的检测方法第20-22页
     ·紫外分光光度法第21页
     ·高效液相色谱法第21页
     ·气相色谱检测第21页
     ·气相质谱联用色谱法第21-22页
   ·酶的自诱导发酵第22-23页
   ·固定化酶技术第23-24页
   ·研究意义及主要研究内容第24-26页
     ·研究意义第24页
     ·实验研究内容第24-26页
第二章 亚油酸异构酶PAI基因的异源表达第26-37页
   ·实验材料与方法第26-30页
     ·质粒与菌株第26-27页
     ·培养基及相关溶液第27页
     ·主要实验试剂第27-30页
   ·实验方法第30-33页
     ·亚油酸异构酶PAI基因合成第30页
     ·重组载体转化实验第30页
     ·含有PAI基因重组菌株的诱导表达第30页
     ·重组亚油酸异构酶获取及检测第30-31页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳实验第31页
     ·重组亚油酸异构酶PAI的活性检测第31-32页
     ·脂肪酸的提取及检测分析第32-33页
   ·结果与讨论第33-36页
     ·亚油酸异构酶PAI的SDS-PAGE凝胶电泳检测结果第33-34页
     ·IPTG诱导下菌株的生长及PAI催化LA转化为t-10,c-12CLA的转化率第34页
     ·GC-MS检测结果第34-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 PAI的响应面发酵优化第37-51页
   ·实验材料第37-40页
     ·菌种第37页
     ·培养基第37-39页
     ·主要实验试剂第39-40页
     ·主要实验仪器设备第40页
   ·实验方法与分析第40-41页
     ·含有PAI基因重组菌株的诱导表达第40-41页
     ·亚油酸异构酶PAI发酵的响应面优化设计实验第41页
     ·重组亚油酸异构酶获取及检测第41页
     ·重组亚油酸异构酶PAI的活性检测第41页
     ·脂肪酸的提取及检测分析第41页
     ·主要分析软件第41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·不同实验组菌株收获量(OD600)及亚油酸异构酶PAI转化率检测第41-43页
     ·GC-MS检测结果第43-44页
     ·亚油酸异构酶PAI的响应面优化设计实验第44-50页
   ·本章小结第50-51页
第四章 亚油酸异构酶PAI的固定化第51-59页
   ·实验材料第51-53页
     ·菌种第51页
     ·培养基第51页
     ·主要实验试剂第51-53页
     ·主要实验仪器设备第53页
   ·实验方法第53-56页
     ·亚油酸异构酶PAI的发酵第53页
     ·考马斯亮蓝法(Bradford)测定酶液中蛋白质的浓度第53-54页
     ·亚油酸异构酶PAI固定化酶的制备第54-55页
     ·按照一定梯度制备不同批次的PAI固定化酶第55页
     ·PAI固定化酶的筛选第55页
     ·亚油酸异构酶PAI固定化酶转化率检测第55-56页
   ·实验结果第56-57页
     ·Bradford法检测粗酶液的蛋白含量第56页
     ·PAI固定化酶的筛选结果第56页
     ·PAI固定化酶重复催化次数的检测第56-57页
   ·本章小结第57-59页
第五章 结论与展望第59-60页
   ·结论第59页
   ·展望第59-60页
参考文献第60-69页
作者简历第69页
已发表文章第69页

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