| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| ·杨树遗传转化的方法 | 第11-12页 |
| ·杨树转基因技术育种概况 | 第12-13页 |
| ·转基因植物中的标记基因的研究概况 | 第13-17页 |
| ·传统的选择标记基因的研究 | 第14页 |
| ·生物安全性标记基因的研究 | 第14-17页 |
| ·丝氨酸消旋酶的研究进展 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-21页 |
| ·本课题的研究意义 | 第19页 |
| ·本研究的内容、目标 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第19页 |
| ·研究目标 | 第19-20页 |
| ·本研究采用的技术路线 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·PCR反应的引物 | 第21-23页 |
| ·主要仪器设备和试剂 | 第23-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第23-25页 |
| ·MS培养基的配置 | 第23-24页 |
| ·细菌培养用的YEP、LB培养基的配制 | 第24页 |
| ·抗生素储液的配制 | 第24页 |
| ·植物基因组DNA及总RNA提取试剂 | 第24-25页 |
| ·实验场所 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·pBI1301-ZmSR基因的鉴定 | 第25-26页 |
| ·酶切验证重组质粒pBI1301-ZmSR | 第25页 |
| ·对重组质粒pBI1301-ZmSR进行测序鉴定 | 第25-26页 |
| ·pBI1301-ZmSR转化农杆菌 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞制备 | 第26页 |
| ·液氮冻融法转化LBA4404 | 第26页 |
| ·农杆菌LBA4404质粒的提取及PCR鉴定 | 第26-27页 |
| ·南抗杨叶片和不定芽生根对D-丝氨酸浓度的确定 | 第27页 |
| ·目的基因转化南抗杨 | 第27-29页 |
| ·受体材料的预培养 | 第27页 |
| ·正负对照的设置 | 第27-28页 |
| ·工程菌制备 | 第28页 |
| ·侵染与共培养 | 第28页 |
| ·菌的清洗 | 第28页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选与分化 | 第28页 |
| ·生根选择培养 | 第28页 |
| ·炼苗和移栽 | 第28-29页 |
| ·农杆菌侵染后南抗杨组织瞬时表达检测 | 第29页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第29-31页 |
| ·转化植株的DNA提取 | 第29页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第29-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-40页 |
| ·重组质粒pBI1301-ZmSR的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·重组质粒pBI1301-ZmSR的测序分析 | 第31-33页 |
| ·农杆菌pBI1301-ZmSR的酶切验证 | 第33页 |
| ·农杆菌pBI1301-ZmSR的PCR验证 | 第33页 |
| ·南抗杨叶片和不定芽生根对D-丝氨酸浓度的确定 | 第33-35页 |
| ·南抗杨叶片对D-丝氨酸的浓度的确定 | 第33-34页 |
| ·南抗杨生根的的D-丝氨酸的敏感性试验 | 第34-35页 |
| ·pBI121-GUS和pBI1301-ZmSR转化南抗杨的对比试验 | 第35-38页 |
| ·pBI121-GUS和pBI1301-ZmSR转化南抗杨叶片的对比试验 | 第35-37页 |
| ·pBI121-GUS和pBI1301-ZmSR转化南抗杨愈伤组织的对比试验 | 第37-38页 |
| ·南抗杨GUS瞬时表达检测 | 第38页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第38-39页 |
| ·转基因植株的表型性状的观察 | 第39页 |
| ·后续试验安排 | 第39-40页 |
| 5 结论与讨论 | 第40-43页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·南抗杨遗传转化的研究 | 第40-41页 |
| ·南抗杨转基因的研究 | 第41-43页 |
| 附录A:中英文缩写与注释 | 第43-44页 |
| 附录B | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简介 | 第53页 |
| 成果清单 | 第53页 |