| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-11页 |
| Abstract | 第11-16页 |
| 前言 | 第16-25页 |
| 1 国内外研究现状 | 第17-18页 |
| 2 研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 3 立题依据 | 第20-21页 |
| 4 学术价值和应用前景 | 第21页 |
| 5 拟解决的科学问题 | 第21-22页 |
| 6 指导思想 | 第22-23页 |
| 7 研究思路 | 第23页 |
| 8 研究方法 | 第23-25页 |
| 第一章 骆驼源单域抗体库的构建 | 第25-46页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-33页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·培养基及相关溶液的配置 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·骆驼血液cDNA文库的构建 | 第27-28页 |
| ·骆驼源VHH单域抗体的实体库构建 | 第28-31页 |
| ·骆驼单域抗体的虚拟库的构建 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-43页 |
| ·骆驼血液cDNA文库的构建 | 第33页 |
| ·骆驼血液样品的采取和淋巴细胞分离 | 第33页 |
| ·骆驼外周血淋巴细胞中总mRNA的提取及cDNA第一条链的合成 | 第33页 |
| ·骆驼源VHH单域抗体的实体库构建 | 第33-37页 |
| ·骆驼单域抗体VHH基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·pMD18-T-VHH重组质粒构建及DH5a-p MD18-T-VHH单克隆菌株的获得 | 第34-35页 |
| ·DH5a-pMD18-T-VHH单克隆菌株的测序及测序结果分析 | 第35-37页 |
| ·骆驼源VHH单域抗体的虚拟库构建 | 第37-43页 |
| ·VHH抗体三维结构的初步获取 | 第37-40页 |
| ·VHH抗体三维结构的优化 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·骆驼源单域抗体基因库的构建 | 第43-44页 |
| ·骆驼源单域抗体虚拟库的构建 | 第44-46页 |
| 第二章 雌二醇骆驼源单域抗体的虚拟筛选 | 第46-53页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·VHH抗体与雌二醇小分子的分子对接分析 | 第46-47页 |
| ·VHH抗体与雌二醇小分子的结合模式分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·VHH与雌二醇小分子的分子对接分析 | 第47-49页 |
| ·雌二醇特异性VHH与雌二醇小分子的结合模式分析 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·VHH抗体与雌二醇小分子的对接分析 | 第51-52页 |
| ·VHH抗体与雌二醇小分子的相互作用分析 | 第52-53页 |
| 第三章 雌二醇VHH抗体的性质鉴定 | 第53-69页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料与方法 | 第53-61页 |
| ·材料 | 第53-55页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·主要溶液的配置 | 第54-55页 |
| ·质粒与菌株 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-61页 |
| ·雌二醇VHH抗体表达质粒的构建 | 第55-59页 |
| ·雌二醇VHH抗体的性质鉴定 | 第59-61页 |
| ·利用SPR测定雌二醇模拟抗体的亲和力 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·pET32a-VHH阳性克隆的验证 | 第61-62页 |
| ·pET32a-VHH阳性克隆的表达 | 第62-63页 |
| ·雌二醇VHH抗体的纯化 | 第63-64页 |
| ·雌二醇VHH抗体的结合活性检测 | 第64页 |
| ·雌二醇VHH抗体竞争活性的检测 | 第64-66页 |
| ·雌二醇VHH抗体的亲和力分析 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·VHH抗体的表达 | 第67页 |
| ·VHH抗体的纯化 | 第67-68页 |
| ·VHH抗体的活性鉴定 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-72页 |
| 1 基于骆驼源单域抗体的实体抗体库构建 | 第69页 |
| 2 建立了虚拟抗体库 | 第69-70页 |
| 3 以雌二醇代表靶标的特异抗体的快速虚拟筛选及验证 | 第70页 |
| 4 展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 在读期间发表文章情况 | 第77-78页 |
| 发表文章 | 第77-78页 |
| 个人简历 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
