| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-20页 |
| 第一章 精子RNA研究进展 | 第11-20页 |
| ·精子细胞形成过程 | 第11-12页 |
| ·精子形成期间的RNA转录、储存和传递 | 第12-13页 |
| ·成熟精子中的mRNA及其功能 | 第13-15页 |
| ·成熟精子中mRNA的研究概况 | 第13-14页 |
| ·成熟精子中mRNA在受精后卵母细胞中的作用 | 第14页 |
| ·成熟精子中mRNA的潜在功能 | 第14-15页 |
| ·成熟精子中干扰RNA及其功能 | 第15-16页 |
| ·成熟精子中无意义RNA的研究 | 第16-17页 |
| ·精子携带的外源RNA及其功能 | 第17-18页 |
| ·精子RNA在胚胎发育过程中的作用 | 第18-20页 |
| 实验部分 | 第20-45页 |
| 第二章 牛成熟精子RNA的提取与鉴定 | 第20-33页 |
| ·材料与试剂 | 第20-22页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·主要试剂及配制 | 第20-21页 |
| ·实验仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·牛附睾和睾丸的采集 | 第22页 |
| ·精子提取与收集 | 第22页 |
| ·精子质量的鉴定 | 第22-23页 |
| ·精子总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·睾丸总RNA的提取 | 第24页 |
| ·总RNA的纯化 | 第24页 |
| ·精子及睾丸总RNA的反转录 | 第24-25页 |
| ·总RNA质量鉴定 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-31页 |
| ·精子纯度分析 | 第26-28页 |
| ·提取RNA的最佳精子浓度的筛选 | 第28-29页 |
| ·不同提取方式对精子RNA质量的影响分析 | 第29-30页 |
| ·不同提取方式对睾丸组织RNA质量的影响分析 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第三章 精子RNA对早期胚胎发育影响的初步研究 | 第33-45页 |
| ·材料与试剂 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33-34页 |
| ·主要试剂及配置 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·供体细胞的准备 | 第35页 |
| ·卵母细胞的收集和体外成熟 | 第35页 |
| ·重构胚的构建 | 第35-36页 |
| ·电融合 | 第36页 |
| ·重构胚的激活和体外培养 | 第36页 |
| ·体外受精及胚胎的培养 | 第36-37页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第37页 |
| ·囊胚凋亡染色 | 第37-38页 |
| ·胚胎cDNA制备 | 第38页 |
| ·定量PCR检测分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-43页 |
| ·向卵母细胞中电融合精子RNA的最佳浓度的筛选 | 第39-40页 |
| ·精子RNA处理对SCNT卵裂率和囊胚率的影响 | 第40-41页 |
| ·精子RNA处理对SCNT囊胚凋亡的影响 | 第41页 |
| ·精子RNA处理对体细胞核移植囊胚发育相关基因表达的影响 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |