| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| ·昆虫病原线虫的研究现状 | 第15-16页 |
| ·昆虫病原线虫的分类 | 第15页 |
| ·昆虫病原线虫的生活史 | 第15页 |
| ·昆虫病原线虫的生态学特性 | 第15-16页 |
| ·昆虫病原线虫防治害虫的研究现状 | 第16页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌的研究现状 | 第16-18页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌的简介 | 第16页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌的生活史及致病过程 | 第16-17页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌的型态变化 | 第17-18页 |
| ·共生菌的菌株特征 | 第18页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌的主要杀虫抑菌活性物质 | 第18-20页 |
| ·影响共生菌杀虫抑菌物质产生的因素 | 第20页 |
| ·昆虫病原线虫、共生菌及寄主昆虫之间相互作用的调控 | 第20-22页 |
| ·共生菌隐藏天然产物的挖掘及代谢调控 | 第22-24页 |
| ·通过对调节子的遗传操作来诱导或提高次生代谢产物的产生 | 第23页 |
| ·通过基因异源表达诱导隐藏天然产物的产生 | 第23页 |
| ·启动子交换可促进沉默基因和隐藏生物合成基因簇的表达 | 第23页 |
| ·培养条件的改变可影响微生物次生代谢产物的产生 | 第23-24页 |
| ·双组分信号转导系统的作用机理 | 第24-26页 |
| ·双组分信号转导系统简介 | 第24-25页 |
| ·EnvZ-OmpR双组分信号转导系统 | 第25-26页 |
| ·嗜线虫致病杆菌的基因敲除技术 | 第26-27页 |
| ·研究目的与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 envZ/ompR基因缺失突变菌株的构建 | 第29-38页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·供试菌株及质粒 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-34页 |
| ·菌体活化培养 | 第30页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·envZ / ompR基因上下游同源片段扩增 | 第31-32页 |
| ·目的基因上下游片段的融合 | 第32页 |
| ·重组自杀载体的构建 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的转化及阳性克隆的鉴定和测序 | 第33-34页 |
| ·YL001与含自杀质粒的大肠杆菌接合转移 | 第34页 |
| ·二次交换及突变株筛选 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·YL001基因组的提取 | 第34-35页 |
| ·envZ/ompR基因上下游片段的扩增与融合 | 第35页 |
| ·融合片段与pMD19 T载体连接并转入E. coli DH5α进行酶切和测序验证 | 第35-36页 |
| ·omp R 与 env Z 融合片段与 p K18 自杀载体的重组构建 | 第36页 |
| ·接合与第一轮重组 | 第36-37页 |
| ·第二轮重组与突变株鉴定 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 ΔenvZ突变株与野生株代谢产物抑菌活性研究 | 第38-43页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·供试病原真菌 | 第38页 |
| ·供试病原细菌 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·仪器 | 第38-39页 |
| ·研究方法 | 第39-40页 |
| ·菌株活化 | 第39页 |
| ·ΔenvZ突变菌株与YL001胞外代谢物的制备 | 第39页 |
| ·ΔenvZ突变菌株与YL001胞外代谢物抑菌活性测定 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| ·ΔenvZ与野生株YL001胞外代谢物对3种病原细菌的抑制作用 | 第40页 |
| ·ΔenvZ与野生株YL001胞外代谢物对3种植物病原真菌的抑制作用 | 第40-41页 |
| ·ΔenvZ与野生株YL001对番茄灰霉病的防治效果（活体组织法） | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 突变株与野生株代谢差异分析 | 第43-54页 |
| ·试验材料 | 第43-44页 |
| ·供试菌株 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突变株的生长代谢差异分析 | 第44-45页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突变株在不同渗透压条件下的生长代谢差异分析 | 第45页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突变株相关基因的表达差异分析 | 第45-47页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突菌株代谢谱差异分析 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株不同培养时间生长代谢差异分析 | 第48-50页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株不同培养时间的生长曲线 | 第48页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株培养过程中营养物质的消耗变化 | 第48-49页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株培养过程中pH的变化动态 | 第49页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株不同培养时间发酵液的抑菌活性 | 第49-50页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突变株在不同渗透压条件下代谢差异分析 | 第50-51页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株在不同渗透压条件下的生长量变化 | 第50页 |
| ·野生菌株与 ΔenvZ突变菌株在不同渗透压条件下对3种病原细菌的抑菌作用 | 第50-51页 |
| ·野生株YL001与 ΔenvZ突变株主要基因表达差异分析 | 第51-52页 |
| ·野生株YL001与突变株 ΔenvZ发酵液甲醇提取物主要抑菌物质相对含量 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第五章 恒定pH对Xenorhabdus nematophila YL001抑菌活性及抑菌物质合成相关基因表达的影响 | 第54-60页 |
| ·试验材料 | 第54页 |
| ·供试菌株 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·不同恒定pH条件下YL001菌株胞外代谢产物的制备 | 第54-55页 |
| ·YL001菌株发酵液及胞外代谢产物对病原菌的抑制作用 | 第55页 |
| ·不同恒定pH条件下YL001菌株胞外代谢产物差异分析 | 第55页 |
| ·不同恒定pH条件下YL001菌株抑菌物质及转录调节子基因表达差异分析 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·不同恒定pH条件下YL001菌株发酵液及胞外代谢产物提取物的抑菌活性 | 第56-57页 |
| ·不同恒定 p H 条件下 YL001 菌株发酵液甲醇提取物中主要抑菌物质的相对含量 | 第57-58页 |
| ·不同恒定pH条件下YL001菌株主要抑菌物质生物合成基因及相关转录调节子的转录与表达 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第六章 讨论 | 第60-64页 |
| ·利用接合转移的方法构建基因缺失菌株 | 第60页 |
| ·envZ基因突变提高X. nematophila的抑菌活性 | 第60-61页 |
| ·envZ基因缺失对相关基因表达的影响 | 第61页 |
| ·envZ基因缺失对相关活性物质产生的影响 | 第61-62页 |
| ·pH对相关活性物质产生的影响 | 第62-64页 |
| 第七章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
