致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
1 综述 | 第11-16页 |
·颅骨的发育 | 第11-12页 |
·参与颅骨发育的信号通路 | 第12-14页 |
·参与颅骨发育的转录因子 | 第14-15页 |
·Sufu与Hh通路的关系及相关研究 | 第15-16页 |
2 实验内容与设计 | 第16-18页 |
·实验目的与意义 | 第16-17页 |
·实验内容 | 第17页 |
·实验流程图 | 第17-18页 |
3 实验材料与方法 | 第18-32页 |
·实验动物饲养与基因型鉴定 | 第18-19页 |
·实验小鼠的来源、构建 | 第18页 |
·基因型鉴定 | 第18-19页 |
·实验材料的处理 | 第19-23页 |
·石蜡切片材料处理 | 第19页 |
·总RNA的提取和cDNA的制备 | 第19-20页 |
·探针的制备 | 第20-23页 |
·Western blot样品的蛋白提取 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-32页 |
·苏木精、伊红染色法(简称H·E染色) | 第23-24页 |
·骨骼染色 | 第24-25页 |
·冰冻切片X-gal染色 | 第25-26页 |
·石蜡切片原位杂交 | 第26-28页 |
·von Kossa染色(矿化结节染色法) | 第28-29页 |
·Brdu和Tunel染色 | 第29-31页 |
·免疫荧光 | 第31-32页 |
·Western Blotting | 第32页 |
4 实验结果及分析 | 第32-42页 |
·基因型鉴定及表型分析 | 第32-34页 |
·基因型鉴定 | 第33页 |
·表型分析 | 第33-34页 |
·Sufu基因在颅骨发育中的表达模式 | 第34-35页 |
·条件性敲除Sufu后神经嵴细胞的迁移和分布情况 | 第35-36页 |
·在神经嵴细胞中敲除Sufu基因不会影响细胞凋亡 | 第36-37页 |
·在神经嵴细胞中敲除Sufu基因减少了额骨原基的细胞增殖 | 第37-38页 |
·Sufu敲除造成额骨原基成骨分化Marker的表达受到明显抑制 | 第38-39页 |
·Sufu敲除引起不同信号通路发生变化 | 第39-40页 |
·Sufu敲除引起Runx2上游相关骨形成基因表达降低 | 第40-41页 |
·Sufu敲除引起Gli存在状态发生变化 | 第41页 |
·在神经嵴来源的细胞中敲除Sufu引起的额骨形成异常可以被同时敲除Gli2所恢复 | 第41-42页 |
5 总结与讨论 | 第42-44页 |
·实验总结 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |