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Sufu在神经嵴细胞来源的颅骨发育中的功能研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-11页
1 综述第11-16页
   ·颅骨的发育第11-12页
   ·参与颅骨发育的信号通路第12-14页
   ·参与颅骨发育的转录因子第14-15页
   ·Sufu与Hh通路的关系及相关研究第15-16页
2 实验内容与设计第16-18页
   ·实验目的与意义第16-17页
   ·实验内容第17页
   ·实验流程图第17-18页
3 实验材料与方法第18-32页
   ·实验动物饲养与基因型鉴定第18-19页
     ·实验小鼠的来源、构建第18页
     ·基因型鉴定第18-19页
   ·实验材料的处理第19-23页
     ·石蜡切片材料处理第19页
     ·总RNA的提取和cDNA的制备第19-20页
     ·探针的制备第20-23页
     ·Western blot样品的蛋白提取第23页
   ·实验方法第23-32页
     ·苏木精、伊红染色法(简称H·E染色)第23-24页
     ·骨骼染色第24-25页
     ·冰冻切片X-gal染色第25-26页
     ·石蜡切片原位杂交第26-28页
     ·von Kossa染色(矿化结节染色法)第28-29页
     ·Brdu和Tunel染色第29-31页
     ·免疫荧光第31-32页
     ·Western Blotting第32页
4 实验结果及分析第32-42页
   ·基因型鉴定及表型分析第32-34页
     ·基因型鉴定第33页
     ·表型分析第33-34页
   ·Sufu基因在颅骨发育中的表达模式第34-35页
   ·条件性敲除Sufu后神经嵴细胞的迁移和分布情况第35-36页
   ·在神经嵴细胞中敲除Sufu基因不会影响细胞凋亡第36-37页
   ·在神经嵴细胞中敲除Sufu基因减少了额骨原基的细胞增殖第37-38页
   ·Sufu敲除造成额骨原基成骨分化Marker的表达受到明显抑制第38-39页
   ·Sufu敲除引起不同信号通路发生变化第39-40页
   ·Sufu敲除引起Runx2上游相关骨形成基因表达降低第40-41页
   ·Sufu敲除引起Gli存在状态发生变化第41页
   ·在神经嵴来源的细胞中敲除Sufu引起的额骨形成异常可以被同时敲除Gli2所恢复第41-42页
5 总结与讨论第42-44页
   ·实验总结第42-43页
   ·讨论第43-44页
参考文献第44-49页

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