摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
1 贵州地方山羊产业发展概况 | 第10-11页 |
·贵州地方山羊产业发展现状 | 第10页 |
·贵州地方山羊产业存在问题 | 第10-11页 |
·贵州地方山羊产业发展展望 | 第11页 |
2 贵州地方山羊主要品种及特征 | 第11-13页 |
3 山羊高繁殖力性能的分子遗传基础 | 第13页 |
4 下丘脑-垂体-性腺轴的生殖调控机理 | 第13-14页 |
5 高繁殖力性状候选基因多态性检测的研究进展 | 第14-20页 |
·FSHR基因的研究进展 | 第14-18页 |
·GnRHR基因的研究进展 | 第18-19页 |
·FSHβ基因的研究进展 | 第19-20页 |
·GnRH基因的研究进展 | 第20页 |
6 DNA标记技术研究概述 | 第20-21页 |
·SNP技术 | 第21页 |
·PCR-SSCP技术 | 第21页 |
7 实时荧光定量PCR技术研究概述 | 第21-22页 |
8 论文研究目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 繁殖相关基因多态性对山羊产羔数的影响 | 第23-47页 |
1 材料和方法 | 第23-24页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·试验主要试剂及溶液配制 | 第24页 |
2 试验方法 | 第24-31页 |
·山羊基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度 | 第25页 |
·DNA池的构建 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-27页 |
·PCR反应 | 第27-28页 |
·PCR-SSCP分析 | 第28-29页 |
·数据统计和分析 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
·基因组DNA提取结果 | 第31页 |
·扩增产物检测 | 第31-34页 |
·FSHβ、GnRH基因的遗传变异分析 | 第34页 |
·FSHR基因的遗传变异分析 | 第34-41页 |
·GnRHR基因的遗传变异分析 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
·FSHR基因的多态性及其与繁殖性状的关联分析 | 第43-45页 |
·GnRHR基因的多态性及其与繁殖性状的关联分析 | 第45-47页 |
第三章 FSHR和GnRHR基因在贵州地方山羊性腺轴组织的表达研究 | 第47-67页 |
1 实验材料 | 第47-48页 |
·试验山羊与样品采集 | 第47页 |
·主要仪器和设备 | 第47-48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
2 试验方法 | 第48-52页 |
·组织总RNA的提取 | 第48页 |
·总RNA的检测 | 第48-49页 |
·cDNA第一链的合成 | 第49页 |
·表达引物设计 | 第49-50页 |
·Real-time PCR反应的优化 | 第50-51页 |
·标准曲线的建立 | 第51页 |
·样品的检测 | 第51页 |
·数据的处理及分析 | 第51-52页 |
3 结果与分析 | 第52-62页 |
·山羊组织总RNA的纯度和完整性检测 | 第52页 |
·扩增产物特异性结果 | 第52-53页 |
·Real-time PCR的标准曲线结果 | 第53-54页 |
·Real-time PCR的扩增曲线和溶解曲线 | 第54-56页 |
·山羊FSHR基因在性腺轴的表达水平 | 第56-59页 |
·山羊GnRHR基因在性腺轴的表达水平 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-67页 |
·Real-time PCR检测方法的建立 | 第62-63页 |
·FSHR mRNA表达研究 | 第63-65页 |
·GnRHR m RNA表达研究 | 第65-67页 |
第四章 黔北麻羊GnRHR基因CDS区克隆与生物信息学分析 | 第67-77页 |
1 材料和方法 | 第67-70页 |
·试验山羊与样品采集 | 第67页 |
·试验试剂和仪器 | 第67页 |
·引物设计与合成 | 第67-68页 |
·PCR扩增与检测 | 第68页 |
·克隆与测序 | 第68-69页 |
·序列生物信息学分析 | 第69-70页 |
2 实验结果 | 第70-75页 |
·PCR产物扩增结果 | 第70-71页 |
·GnRHR的CDS区序列及RNA二级结构预测 | 第71页 |
·GnRHR蛋白二级结构和三级结构预测 | 第71-72页 |
·GnRHR预测蛋白质的分析 | 第72-74页 |
·GnRHR基因同源性分析 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
第五章 结论与展望 | 第77-78页 |
1 研究结论 | 第77页 |
2 工作展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
附录 | 第88-96页 |