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大菱鲆养殖环境细菌多样性分析及水产病原菌基因芯片检测体系的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-29页
   ·鱼类肠道菌群结构与环境微生态分析第13-15页
     ·鱼类肠道微生物的组成第13-14页
     ·鱼类肠道微生物与环境第14-15页
   ·大菱鲆养殖常见细菌性病原菌第15-19页
     ·弧菌属病原第15-17页
     ·迟缓爱德华氏菌第17-18页
     ·其他细菌性病原第18-19页
   ·常见海水病原菌的毒力因子第19-24页
     ·细菌表面成分第19-20页
     ·多型分泌系统第20-21页
     ·胞外分泌细胞毒素第21-23页
     ·毒力调控基因第23页
     ·胞外蛋白酶第23-24页
     ·铁吸收系统第24页
   ·病原菌检测技术的研究进展第24-27页
     ·基于核酸扩增的检测技术第25-26页
     ·免疫检测技术第26页
     ·基因探针技术第26-27页
   ·本论文研究目的及研究内容第27-29页
第二章 养殖大菱鲆腹水病病原菌分离鉴定第29-42页
   ·前言第29页
   ·材料和方法第29-32页
     ·病原菌的分离和培养第29-30页
     ·病原菌致病性的初步判断第30页
     ·DNA提取和分子鉴定第30-31页
     ·人工感染实验第31页
     ·药物敏感性实验第31-32页
   ·结果第32-40页
     ·患腹水病大菱鲆幼鱼的病变特征第32页
     ·病原菌的分离和鉴定第32-33页
     ·初步感染实验结果第33-35页
     ·分离株分子鉴定及系统发育树构建第35-37页
     ·人工感染实验及半致死浓度的确定第37-39页
     ·抗药性测试第39-40页
   ·讨论第40页
   ·小结第40-42页
第三章 海水养殖环境中细菌多样性分析及潜在病原弧菌探究第42-62页
   ·前言第42-43页
   ·材料与方法第43-47页
     ·养殖环境样本的采集第43页
     ·养殖环境细菌 16S rRNA基因宏基因组测序第43-44页
     ·环境分离株的分子鉴定及毒力相关基因检测第44-47页
     ·生理生化活性检测第47页
     ·人工感染实验第47页
   ·结果第47-58页
     ·养殖环境细菌 16S rRNA基因宏基因组测序结果第47-51页
     ·养殖环境细菌分离情况第51-54页
     ·初步感染实验结果第54-55页
     ·潜在病原菌的毒力相关基因携带情况第55-58页
   ·讨论第58-60页
   ·小结第60-62页
第四章 基于多重PCR技术的水产病原菌寡核苷酸芯片检测体系的优化第62-78页
   ·前言第62-63页
   ·材料和方法第63-68页
     ·菌株信息第63页
     ·引物及探针设计第63-64页
     ·多重PCR扩增和标记第64页
     ·基因芯片的制备第64-65页
     ·芯片的杂交及检测第65页
     ·芯片杂交条件探究第65-66页
     ·芯片经济性优化第66页
     ·不同芯片点样液的效果探究第66-68页
     ·优化后的芯片特异性和灵敏性检测第68页
     ·统计分析第68页
   ·结果第68-75页
     ·杂交时长对芯片检测的影响第68-69页
     ·杂交温度对芯片检测的影响第69-70页
     ·芯片经济性优化第70-72页
     ·不同点样液的杂交效果第72-74页
     ·优化后的芯片特异性检验第74页
     ·优化后的芯片灵敏度检测第74-75页
   ·讨论第75-77页
   ·小结第77-78页
第五章 水产病原微生物寡核苷酸检测芯片体系的建立与评价第78-91页
   ·前言第78页
   ·材料和方法第78-85页
     ·实验材料第78-79页
     ·引物及探针设计第79-83页
     ·基因芯片的制备第83页
     ·全基因组DNA的提取第83-84页
     ·PCR扩增与荧光标记第84页
     ·芯片杂交及检测第84页
     ·检测患病大菱鲆中病原微生物的不同方法的评价第84-85页
   ·结果第85-88页
     ·基因扩增电泳检测结果第85页
     ·基因芯片检测结果第85-86页
     ·患病大菱鲆病原微生物检测结果第86-88页
   ·讨论第88-89页
   ·小结第89-91页
第六章 总结与展望第91-93页
   ·总结第91-92页
   ·展望第92-93页
参考文献第93-102页
攻读硕士学位期间撰写的论文第102-103页
致谢第103页

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