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柑橘受黄龙病菌侵染后基因差异表达分析及抗病基因同源序列克隆

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
本文缩写词第9-10页
第一部分 文献综述第10-17页
 1 柑橘黄龙病研究进展第10-12页
   ·柑橘黄龙病的分布及危害第10页
   ·柑橘黄龙病的病原第10页
   ·柑橘黄龙病致病机理第10-11页
   ·柑橘黄龙病的传播及防治第11页
   ·柑橘黄龙病最新研究动向第11-12页
 2 基因芯片研究进展第12-13页
   ·基因芯片的概念及原理第12页
   ·基因芯片技术的应用第12-13页
     ·DNA 测序第12页
     ·基因表达分析第12-13页
     ·疾病的诊断第13页
     ·药物研究第13页
   ·基因差异表达在揭示植物病害发生机制中的作用第13页
 3 植物抗病基因研究进展第13-15页
   ·抗病基因的克隆方法第13-14页
   ·植物抗病基因的结构和功能第14页
   ·抗病基因作用机理第14页
   ·植物防卫反应基因及防卫反应第14-15页
   ·RGAs 研究方法及意义第15页
 4 项目的立题背景及研究意义第15-17页
   ·本论文课题来源第15页
   ·项目的立题背景及研究意义第15-16页
   ·本论文研究的主要内容第16页
   ·本论文的研究路线第16-17页
第二部分 柑橘黄龙病毒源的筛选第17-23页
 1 材料及方法第17-20页
   ·样本采集第17页
   ·主要仪器设备及耗材第17页
   ·主要试剂及配方第17-18页
   ·柑橘黄龙病毒源树获得第18-20页
     ·病树体内黄龙病菌的检测第18-19页
     ·病树体内植原体的检测第19页
     ·病树体内衰退病毒的检测第19-20页
 2 结果与分析第20-22页
   ·柑橘黄龙病毒源树获得第20-22页
     ·病树体内黄龙病菌的检测第20-21页
     ·病树体内植原体的检测第21-22页
     ·病树体内衰退病毒的检测第22页
 3 结论与讨论第22-23页
第三部分 不同柑橘品种对黄龙病菌侵染的室内抗性鉴定第23-26页
 1 材料与方法第23页
   ·供试嫁接毒源材料第23页
   ·供试柑橘品种第23页
   ·各柑橘品种接种 CLas 处理第23页
 2 结果与分析第23-24页
   ·用柑橘黄龙病毒源嫁接各柑橘品种第23-24页
 3 结论与讨论第24-26页
第四部分 基因差异表达分析第26-45页
 1 材料与方法第26-30页
   ·实验仪器第26页
   ·实验试剂第26页
   ·实验处理第26页
   ·样品采集第26页
   ·植物总 RNA 提取第26-27页
   ·总 RNA 纯化第27页
   ·RNA 合成双链 cDNA第27-28页
     ·反转录合成第一链 cDNA第27-28页
     ·反转录合成第二链 cDNA第28页
   ·生物素标记 cRNA 合成第28-29页
     ·体外转录合成标记 cRNA第28页
     ·aRNA 纯化第28-29页
   ·杂交、洗涤、染色、扫描芯片第29-30页
     ·片断化第29页
     ·杂交第29-30页
     ·洗涤、染色和扫描第30页
   ·数据分析第30页
     ·原始数据处理第30页
     ·差异基因筛选第30页
     ·基因功能分类注释第30页
 2 结果与分析第30-36页
   ·RNA 质检第30-31页
   ·基因芯片探针的比较分析第31-33页
   ·差异基因表达 GO 分类与分析第33-36页
     ·糖类有关差异基因表达第33-34页
     ·光合作用和叶绿素基因的差异表达第34-35页
     ·病程相关基因差异表达第35页
     ·半胱氨酸蛋白酶和 GDSL 脂肪酶相关基因的表达第35-36页
     ·其他相关基因差异表达第36页
 3 结论与讨论第36-45页
第五部分 抗病基因同源序列克隆第45-56页
 1 材料及方法第45-50页
   ·供试材料第45页
   ·培养基第45页
   ·主要仪器设备及耗材第45页
   ·主要试剂及配方第45-46页
   ·RGA 的 PCR 扩增第46页
     ·植物总 DNA 提取第46页
     ·引物设计与合成第46页
     ·PCR 扩增第46页
   ·PCR 产物回收及纯化第46-47页
   ·目的片段的克隆第47-48页
     ·超级感受态细胞制备第47-48页
     ·目的片段连接第48页
     ·蓝白斑筛选第48页
   ·重组质粒鉴定第48页
   ·质粒 DNA 的提取第48-49页
   ·质粒 DNA 酶切第49-50页
 2 结果与分析第50-54页
   ·NBS-LRR 类 R 基因同源序列的扩增第50页
   ·R 基因同源序列的割胶回收第50页
   ·阳性克隆子的鉴定第50-51页
   ·质粒 DNA 的抽提及 PCR 扩增第51页
   ·酶切片段及系统发育树分析第51-54页
 3 结论与讨论第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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