摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
本文缩写词 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-17页 |
1 柑橘黄龙病研究进展 | 第10-12页 |
·柑橘黄龙病的分布及危害 | 第10页 |
·柑橘黄龙病的病原 | 第10页 |
·柑橘黄龙病致病机理 | 第10-11页 |
·柑橘黄龙病的传播及防治 | 第11页 |
·柑橘黄龙病最新研究动向 | 第11-12页 |
2 基因芯片研究进展 | 第12-13页 |
·基因芯片的概念及原理 | 第12页 |
·基因芯片技术的应用 | 第12-13页 |
·DNA 测序 | 第12页 |
·基因表达分析 | 第12-13页 |
·疾病的诊断 | 第13页 |
·药物研究 | 第13页 |
·基因差异表达在揭示植物病害发生机制中的作用 | 第13页 |
3 植物抗病基因研究进展 | 第13-15页 |
·抗病基因的克隆方法 | 第13-14页 |
·植物抗病基因的结构和功能 | 第14页 |
·抗病基因作用机理 | 第14页 |
·植物防卫反应基因及防卫反应 | 第14-15页 |
·RGAs 研究方法及意义 | 第15页 |
4 项目的立题背景及研究意义 | 第15-17页 |
·本论文课题来源 | 第15页 |
·项目的立题背景及研究意义 | 第15-16页 |
·本论文研究的主要内容 | 第16页 |
·本论文的研究路线 | 第16-17页 |
第二部分 柑橘黄龙病毒源的筛选 | 第17-23页 |
1 材料及方法 | 第17-20页 |
·样本采集 | 第17页 |
·主要仪器设备及耗材 | 第17页 |
·主要试剂及配方 | 第17-18页 |
·柑橘黄龙病毒源树获得 | 第18-20页 |
·病树体内黄龙病菌的检测 | 第18-19页 |
·病树体内植原体的检测 | 第19页 |
·病树体内衰退病毒的检测 | 第19-20页 |
2 结果与分析 | 第20-22页 |
·柑橘黄龙病毒源树获得 | 第20-22页 |
·病树体内黄龙病菌的检测 | 第20-21页 |
·病树体内植原体的检测 | 第21-22页 |
·病树体内衰退病毒的检测 | 第22页 |
3 结论与讨论 | 第22-23页 |
第三部分 不同柑橘品种对黄龙病菌侵染的室内抗性鉴定 | 第23-26页 |
1 材料与方法 | 第23页 |
·供试嫁接毒源材料 | 第23页 |
·供试柑橘品种 | 第23页 |
·各柑橘品种接种 CLas 处理 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-24页 |
·用柑橘黄龙病毒源嫁接各柑橘品种 | 第23-24页 |
3 结论与讨论 | 第24-26页 |
第四部分 基因差异表达分析 | 第26-45页 |
1 材料与方法 | 第26-30页 |
·实验仪器 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26页 |
·实验处理 | 第26页 |
·样品采集 | 第26页 |
·植物总 RNA 提取 | 第26-27页 |
·总 RNA 纯化 | 第27页 |
·RNA 合成双链 cDNA | 第27-28页 |
·反转录合成第一链 cDNA | 第27-28页 |
·反转录合成第二链 cDNA | 第28页 |
·生物素标记 cRNA 合成 | 第28-29页 |
·体外转录合成标记 cRNA | 第28页 |
·aRNA 纯化 | 第28-29页 |
·杂交、洗涤、染色、扫描芯片 | 第29-30页 |
·片断化 | 第29页 |
·杂交 | 第29-30页 |
·洗涤、染色和扫描 | 第30页 |
·数据分析 | 第30页 |
·原始数据处理 | 第30页 |
·差异基因筛选 | 第30页 |
·基因功能分类注释 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-36页 |
·RNA 质检 | 第30-31页 |
·基因芯片探针的比较分析 | 第31-33页 |
·差异基因表达 GO 分类与分析 | 第33-36页 |
·糖类有关差异基因表达 | 第33-34页 |
·光合作用和叶绿素基因的差异表达 | 第34-35页 |
·病程相关基因差异表达 | 第35页 |
·半胱氨酸蛋白酶和 GDSL 脂肪酶相关基因的表达 | 第35-36页 |
·其他相关基因差异表达 | 第36页 |
3 结论与讨论 | 第36-45页 |
第五部分 抗病基因同源序列克隆 | 第45-56页 |
1 材料及方法 | 第45-50页 |
·供试材料 | 第45页 |
·培养基 | 第45页 |
·主要仪器设备及耗材 | 第45页 |
·主要试剂及配方 | 第45-46页 |
·RGA 的 PCR 扩增 | 第46页 |
·植物总 DNA 提取 | 第46页 |
·引物设计与合成 | 第46页 |
·PCR 扩增 | 第46页 |
·PCR 产物回收及纯化 | 第46-47页 |
·目的片段的克隆 | 第47-48页 |
·超级感受态细胞制备 | 第47-48页 |
·目的片段连接 | 第48页 |
·蓝白斑筛选 | 第48页 |
·重组质粒鉴定 | 第48页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第48-49页 |
·质粒 DNA 酶切 | 第49-50页 |
2 结果与分析 | 第50-54页 |
·NBS-LRR 类 R 基因同源序列的扩增 | 第50页 |
·R 基因同源序列的割胶回收 | 第50页 |
·阳性克隆子的鉴定 | 第50-51页 |
·质粒 DNA 的抽提及 PCR 扩增 | 第51页 |
·酶切片段及系统发育树分析 | 第51-54页 |
3 结论与讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |