| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-16页 |
| 引言 | 第16-20页 |
| 1.研究内容 | 第17页 |
| 2.预期的研究成果 | 第17-18页 |
| 3.技术路线 | 第18-20页 |
| 第一部分 文献研究 | 第20-28页 |
| 第一章 广地龙的研究概况 | 第20-23页 |
| 1 广地龙药用资源的开发利用价值 | 第20-22页 |
| ·古代对地龙资源开发利用的概况 | 第20页 |
| ·近代对地龙资源开发利用的概况 | 第20-22页 |
| 2 广地龙药材质量研究概况及存在的问题 | 第22-23页 |
| 第二章 动物细胞培养研究概况 | 第23-27页 |
| 1 脊椎动物细胞培养研究概况 | 第23页 |
| 2 无脊椎动物细胞培养研究概况 | 第23-24页 |
| ·无脊椎动物细胞培养基 | 第24页 |
| ·无脊椎动物细胞培养温度 | 第24页 |
| ·无脊椎动物细胞培养气相 | 第24页 |
| ·无脊椎动物细胞传代培养 | 第24页 |
| 3 蚯蚓类细胞培养的研究慨况 | 第24-25页 |
| 4 肠上皮细胞培养研究概况 | 第25-27页 |
| ·上皮细胞的基本特征 | 第25页 |
| ·上皮细胞的分离培养 | 第25页 |
| ·上皮细胞的形态观察 | 第25-26页 |
| ·上皮细胞超微结构观察 | 第26页 |
| ·上皮细胞的特征性鉴定 | 第26页 |
| ·上皮细胞系的建立 | 第26页 |
| ·展望 | 第26-27页 |
| 文献综述部分小结 | 第27-28页 |
| 第二部分 实验研究 | 第28-92页 |
| 第三章 参环毛蚓不同解剖部位细胞体外存活的筛选实验 | 第28-38页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·主要制剂 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·试剂配制 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-30页 |
| ·样品的预处理 | 第29-30页 |
| ·不同部位组织分离与处理 | 第30页 |
| ·不同部位细胞形态观察 | 第30页 |
| ·不同部位细胞原代培养 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-31页 |
| ·参环毛蚓不同解剖部位细胞形态特征的比较 | 第30-31页 |
| ·参环毛蚓不同解剖部位细胞原代培养前后的形态比较 | 第31页 |
| 4 小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 图版Ⅰ不同部位结构形态示图 | 第33-35页 |
| 第三章 图版Ⅱ不同部位细胞形态示图 | 第35-38页 |
| 第四章 参环毛蚓IEC培养条件筛选和优化的研究 | 第38-57页 |
| 第一节 参环毛蚓IEC酶解条件的考察 | 第38-44页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要制剂与仪器 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-42页 |
| ·样品的预处理 | 第40页 |
| ·三种消化酶酶解处理 | 第40-41页 |
| ·活性测定的方法 | 第41页 |
| ·数据处理的方法 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-43页 |
| ·离体后即时细胞活力的测定 | 第42页 |
| ·培养后细胞活力的测定 | 第42-43页 |
| 4 小结与讨论 | 第43-44页 |
| 第二节 参环毛蚓IEC血清浓度的考察 | 第44-49页 |
| 1 实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·实验细胞 | 第44页 |
| ·主要制剂与仪器 | 第44-45页 |
| ·试剂配制 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-46页 |
| ·样品的预处理 | 第45页 |
| ·血清浓度考察方法 | 第45-46页 |
| ·数据处理的方法 | 第46页 |
| 3 实验结果 | 第46-47页 |
| 4 小结与讨论 | 第47-49页 |
| 第三节 参环毛蚓IEC培养基的考察 | 第49-53页 |
| 1 实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·主要制剂与仪器 | 第49页 |
| ·试剂配制 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-52页 |
| ·样品的预处理 | 第50-51页 |
| ·培养基添加剂的考察 | 第51页 |
| ·培养基种类的考察 | 第51页 |
| ·数据处理的方法 | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52页 |
| 4 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 第四章 图版 | 第53-57页 |
| 第五章 参环毛蚓IEC的纯化研究 | 第57-60页 |
| 1 实验材料 | 第57-58页 |
| ·实验细胞 | 第57页 |
| ·主要制剂与仪器 | 第57页 |
| ·试剂配制 | 第57-58页 |
| 2 实验方法 | 第58页 |
| ·参环毛蚓IEC原代纯化方法 | 第58页 |
| ·参环毛蚓IEC传代纯化方法 | 第58页 |
| 3 实验结果 | 第58页 |
| 4 小结与讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 图版 | 第59-60页 |
| 第六章 参环毛蚓IEC生物学特征 | 第60-72页 |
| 第一节 参环毛蚓IEC的增殖与分化 | 第60-64页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·实验细胞 | 第60页 |
| ·主要制剂与仪器 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61页 |
| 3 实验结果 | 第61-63页 |
| 4 小结与讨论 | 第63-64页 |
| 第六章 版图Ⅰ | 第64-65页 |
| 第二节 参环毛蚓IEC的污染与控制 | 第65-67页 |
| 1 实验材料与设备 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-66页 |
| ·细菌污染及判断 | 第65页 |
| ·真菌污染及判断 | 第65-66页 |
| ·支原体污染及判断 | 第66页 |
| 3 实验结果 | 第66-67页 |
| 第六章 版图Ⅱ | 第67-68页 |
| 第三节 参环毛蚓IEC的冷冻与复苏 | 第68-71页 |
| 1 实验材料 | 第68页 |
| ·实验细胞 | 第68页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第68页 |
| ·试剂配制 | 第68页 |
| 2 实验方法 | 第68-69页 |
| ·冻存过程 | 第68-69页 |
| ·复苏过程 | 第69页 |
| ·数据处理的方法 | 第69页 |
| 3 实验结果 | 第69-70页 |
| 4 小结与讨论 | 第70-71页 |
| 第六章 版图Ⅲ | 第71-72页 |
| 第七章 参环毛蚓IEC身份验证 | 第72-92页 |
| 第一节 细胞系种属鉴定 | 第72-78页 |
| 1 实验材料 | 第72页 |
| 2 实验方法 | 第72-74页 |
| ·样品制备 | 第72-73页 |
| ·PCR反应体系 | 第73-74页 |
| ·PCR产物分析 | 第74页 |
| ·测序 | 第74页 |
| 3 实验结果 | 第74-78页 |
| ·CO1基因扩增分析 | 第74页 |
| ·BLAST对比分析 | 第74-75页 |
| ·蛋白质核对分析 | 第75-77页 |
| ·物种聚类分析 | 第77-78页 |
| 第二节 细胞系组织来源鉴定 | 第78-85页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第78-80页 |
| ·实验动物 | 第78页 |
| ·实验细胞 | 第78页 |
| ·实验试剂 | 第78页 |
| ·实验仪器 | 第78-79页 |
| ·试剂的配制 | 第79页 |
| ·连续电泳凝胶的配制 | 第79页 |
| ·不连续电泳凝胶的配制 | 第79-80页 |
| ·同工酶染色剂的配制 | 第80页 |
| 2 实验方法 | 第80-82页 |
| ·样本制备 | 第80-81页 |
| ·凝胶的制备 | 第81页 |
| ·电泳实验步骤 | 第81页 |
| ·电泳结果与记录 | 第81-82页 |
| 3 实验结果 | 第82-84页 |
| ·总蛋白酶解析 | 第82页 |
| ·同工酶谱解析 | 第82-84页 |
| 4 小结与讨论 | 第84-85页 |
| 第七章 版图Ⅰ | 第85-86页 |
| 第三节 细胞系专属性鉴定 | 第86-89页 |
| 1 实验材料 | 第86-87页 |
| ·实验细胞 | 第86页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第86-87页 |
| 2 实验方法 | 第87页 |
| ·形态学检查法 | 第87页 |
| ·电镜观察法 | 第87页 |
| ·AKP染色法 | 第87页 |
| 3 实验结果 | 第87-89页 |
| ·形态学检查 | 第87页 |
| ·扫描电镜超微结构观察 | 第87-88页 |
| ·碱性磷酸酶显示鉴定 | 第88-89页 |
| 第七章 版图Ⅱ | 第89-92页 |
| 全文总结 | 第92-95页 |
| 1.实验总结 | 第92-93页 |
| 2.创新之处 | 第93页 |
| 3.研究展望 | 第93-95页 |
| 附录 | 第95-98页 |
| 在学校期间发表的学术论文及其它学术成果 | 第98-99页 |
| 附件 | 第99-106页 |
| 参考文献 | 第106-111页 |
| 致谢 | 第111页 |