摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
1 绪言 | 第11-18页 |
第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移能力的影响 | 第11-14页 |
第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响 | 第14-18页 |
2 实验研究 | 第18-56页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·实验装置 | 第20-22页 |
·实验方法 | 第22-43页 |
第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移的影响 | 第22-34页 |
·细胞培养 | 第22页 |
·TRIzol 法提取细胞 RNA | 第22-23页 |
·PCR(Polymerase Chain Reaction) | 第23-25页 |
·建立稳定高表达 miR-141 的 Huh7-miR-141-LV | 第25-26页 |
·miR-141 inhibitor 抑制细胞内 miR-141 的表达量 | 第26-27页 |
·Transwell Assay | 第27-28页 |
·qRT-PCR 检测 TGF-β信号通路中相关分子 mRNA 的表达水平 | 第28-30页 |
·Western Blot | 第30-34页 |
第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响 | 第34-43页 |
·病毒制备 | 第34-37页 |
·qRT-PCR 检测 miR-141 对 JFH1 复制能力的影响 | 第37页 |
·PCR 检测细胞内 TLR/IRF 信号通路中相关分子 mRNA 表达水平 | 第37-39页 |
·Western Blot | 第39页 |
·提取 IFN-β Luciferase 质粒 | 第39-41页 |
·双荧光素酶报告基因检测 JFH1 感染细胞后,IFN-β Luc 的活性 | 第41-43页 |
·实验结果 | 第43-56页 |
第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移的影响 | 第43-51页 |
·qRT-PCR 检测 miR-141 在正常组织和肝癌细胞中的表达量 | 第43-44页 |
·用慢病毒载体感染 Huh7,建立稳定高表达 miR-141 的 Huh7-miR-141-LV 和其阴性对照组 Huh7-NC-LV | 第44-45页 |
·Transwell Assay | 第45-47页 |
·TGF-β信号通路中相关基因的表达量 | 第47-50页 |
·基质金属蛋白酶 MMP2、MMP9 的表达情况 | 第50-51页 |
第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响 | 第51-56页 |
·JFH1 在 miR-141 高表达前后的细胞中的复制时间曲线 | 第51-52页 |
·TLR 信号通路中 TLR3、TLR4、TLR7、TLR9 的表达情况 | 第52-53页 |
·检测 IRF3、IRF7 的表达量 | 第53-55页 |
·双荧光素酶报道基因检测 Huh7 高表达 miR-141 前后 IFN-β启动子对 JFH1 感染的应答 | 第55-56页 |
3. 讨论 | 第56-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
综述 | 第66-76页 |
参考文献 | 第72-76页 |
致谢 | 第76页 |