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miR-141对肝癌细胞Huh7迁移和对HCV复制能力影响的机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
1 绪言第11-18页
 第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移能力的影响第11-14页
 第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响第14-18页
2 实验研究第18-56页
   ·实验材料第18-20页
   ·实验装置第20-22页
   ·实验方法第22-43页
  第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移的影响第22-34页
     ·细胞培养第22页
     ·TRIzol 法提取细胞 RNA第22-23页
     ·PCR(Polymerase Chain Reaction)第23-25页
     ·建立稳定高表达 miR-141 的 Huh7-miR-141-LV第25-26页
     ·miR-141 inhibitor 抑制细胞内 miR-141 的表达量第26-27页
     ·Transwell Assay第27-28页
     ·qRT-PCR 检测 TGF-β信号通路中相关分子 mRNA 的表达水平第28-30页
     ·Western Blot第30-34页
  第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响第34-43页
     ·病毒制备第34-37页
     ·qRT-PCR 检测 miR-141 对 JFH1 复制能力的影响第37页
     ·PCR 检测细胞内 TLR/IRF 信号通路中相关分子 mRNA 表达水平第37-39页
     ·Western Blot第39页
     ·提取 IFN-β Luciferase 质粒第39-41页
     ·双荧光素酶报告基因检测 JFH1 感染细胞后,IFN-β Luc 的活性第41-43页
   ·实验结果第43-56页
  第一部分 miR-141 对肝癌细胞 Huh7 迁移的影响第43-51页
     ·qRT-PCR 检测 miR-141 在正常组织和肝癌细胞中的表达量第43-44页
     ·用慢病毒载体感染 Huh7,建立稳定高表达 miR-141 的 Huh7-miR-141-LV 和其阴性对照组 Huh7-NC-LV第44-45页
     ·Transwell Assay第45-47页
     ·TGF-β信号通路中相关基因的表达量第47-50页
     ·基质金属蛋白酶 MMP2、MMP9 的表达情况第50-51页
  第二部分 miR-141 对 HCV 复制能力的影响第51-56页
     ·JFH1 在 miR-141 高表达前后的细胞中的复制时间曲线第51-52页
     ·TLR 信号通路中 TLR3、TLR4、TLR7、TLR9 的表达情况第52-53页
     ·检测 IRF3、IRF7 的表达量第53-55页
     ·双荧光素酶报道基因检测 Huh7 高表达 miR-141 前后 IFN-β启动子对 JFH1 感染的应答第55-56页
3. 讨论第56-61页
参考文献第61-66页
综述第66-76页
 参考文献第72-76页
致谢第76页

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