| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-10页 |
| 第二章 理论研究 | 第10-15页 |
| 1. 祖国传统医学对于“肾主骨”理论的认识及相关研究 | 第10-11页 |
| ·传统医学对“肾主骨”理论的认识 | 第10页 |
| ·骨质疏松与“肾主骨”理论的联系 | 第10-11页 |
| 2、现代医学对中医“肾主骨”理论的研究 | 第11-12页 |
| 3、骨髓间充质干细胞的相关研究 | 第12-13页 |
| 4、BMSCs向成骨与成脂分化过程中的表观遗传学修饰 | 第13-14页 |
| 5、本实验研究的相关工作 | 第14-15页 |
| 第三章 实验研究 | 第15-39页 |
| 1、实验材料 | 第15-16页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·实验主要仪器与试剂 | 第15-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15-16页 |
| 2、实验方法 | 第16-24页 |
| ·中药含药血清的制备 | 第16-17页 |
| ·中药方药的组成 | 第16页 |
| ·确定大鼠的给药剂量及含药血清的制备 | 第16-17页 |
| ·骨髓间充质干细胞的分离、原代培养 | 第17页 |
| ·BMSCs 的体外扩增传代 | 第17页 |
| ·补骨脂素与齐墩果酸药物配制及使用浓度的测定 | 第17-18页 |
| ·补骨脂素与齐墩果酸药物的配制 | 第17-18页 |
| ·补骨脂素与齐墩果酸药物MTT实验 | 第18页 |
| ·不同药物干预BMSCs过程中相关基因表达的测定 | 第18-19页 |
| ·实验分组 | 第18-19页 |
| ·BMSCs形态学初步鉴定 | 第19页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第19页 |
| ·RTQ-PCR技术检测β-catenin、PPARγ基因 | 第19-21页 |
| ·RTQ-PCR实验原理 | 第19-20页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第20页 |
| ·RNA质量检测及RNA含量计算 | 第20页 |
| ·RNA的逆转录 | 第20-21页 |
| ·荧光定量PCR扩增 | 第21页 |
| ·MSP法检测β-catenin、PPARγ基因甲基化状态 | 第21-24页 |
| ·从细胞中提取DNA | 第21-22页 |
| ·甲基化修饰 | 第22-23页 |
| ·纯化亚硫酸盐修饰的DNA | 第23页 |
| ·甲基化PCR（MSP） | 第23-24页 |
| ·PCR产物电泳 | 第24页 |
| ·分析 | 第24页 |
| 3、运用统计学方法数据分析 | 第24页 |
| 4、结果 | 第24-35页 |
| ·SD大鼠灌药与腹主动脉采血制备血清 | 第24-25页 |
| ·骨髓间充质干细胞的培养及其形态学鉴定 | 第25-26页 |
| ·补骨脂素与齐墩果酸使用浓度的测定 | 第26-27页 |
| ·RTQ-PCR检测β-catenin、PPARγ基因的表达 | 第27-32页 |
| ·RNA、DNA纯度检测 | 第27-28页 |
| ·溶解曲线分析 | 第28页 |
| ·定量分析曲线分析 | 第28-29页 |
| ·RTQ-PCR检测β-catenin、PPARγ表达情况的分析 | 第29-32页 |
| ·MSP法检测β-catenin、PPARγ基因甲基化状态 | 第32-35页 |
| 5、讨论 | 第35-37页 |
| ·补肾中药介导β-catenin、PPARγ基因调控BMSCs的机制 | 第35-36页 |
| ·补肾中药干预BMSCs成骨与成脂的表观遗传学机制 | 第36页 |
| ·DNA甲基化调控成骨与成脂平衡的机制 | 第36-37页 |
| ·存在的问题 | 第37页 |
| 6、结语 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 附录 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43页 |
