| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| ·端粒和端粒生物学概况 | 第11-24页 |
| ·端粒和端粒酶 | 第11-12页 |
| ·端粒结构和端粒蛋白复合体 | 第12-15页 |
| ·端粒维持和保护 | 第15-18页 |
| ·端粒调控网络 | 第18-21页 |
| ·端粒损伤、衰老和疾病 | 第21-24页 |
| ·THE PHOSPHATIDYLINOSITOL 3-KINASE (PI3-K)/AKT 信号通路 | 第24-25页 |
| ·AKT 信号通路和端粒调控 | 第25-26页 |
| ·本文的研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 AKT 信号通路在端粒保护中的作用 | 第27-66页 |
| 引言 | 第27页 |
| ·材料 | 第27-33页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·抗体 | 第28页 |
| ·酶 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·溶液 | 第29-33页 |
| ·方法 | 第33-50页 |
| ·质粒构建 | 第33-36页 |
| ·PCR | 第36-37页 |
| ·细胞培养 | 第37-39页 |
| ·细胞转染 | 第39-40页 |
| ·稳定干扰细胞株的构建、筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| ·REAL-TIME PCR | 第41-43页 |
| ·免疫荧光 | 第43页 |
| ·免疫共沉淀、PAGE 及 WESTERN BLOTTING | 第43-47页 |
| ·染色质共沉淀（CHIP） | 第47-48页 |
| ·点杂交 | 第48-49页 |
| ·超级感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·数据量化及分析 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-64页 |
| ·AKT 活性对端粒末端保护的影响 | 第51-54页 |
| ·AKT 活性抑制诱导的端粒损伤是可逆的过程 | 第54-55页 |
| ·药物抑制 AKT 活性对端粒蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
| ·AKT 活性影响端粒蛋白在端粒的招募 | 第56-57页 |
| ·AKT1 干扰效果的分析及其在端粒保护中的作用 | 第57-59页 |
| ·AKT1 SIRNA 干扰耐受细胞系建立及其活性对端粒保护的影响 | 第59-61页 |
| ·AKT2 和 AKT3 干扰效果的分析 | 第61-62页 |
| ·AKT2 和 AKT3 在端粒保护中的作用 | 第62-64页 |
| ·讨论与结论 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第三章 AKT 调控 TPP1 寡聚化对端粒保护的影响 | 第66-85页 |
| 引言 | 第66页 |
| ·材料和方法 | 第66-70页 |
| ·流式细胞仪的样品制备和分析 | 第66-69页 |
| ·体外 GSTPULLDOWN实验 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-82页 |
| ·TPP1 在体内可以形成寡聚体 | 第70-72页 |
| ·OB 折叠结构域缺失会破坏 TPP1 寡聚体的形成 | 第72-73页 |
| ·OB 折叠结构域可以介导 TPP1 寡聚体的形成 | 第73-74页 |
| ·AKT1 干扰细胞系中过表达 TPP1 和 TPP1 DELTAOB | 第74-75页 |
| ·TPP1 寡聚体对端粒保护的影响 | 第75-76页 |
| ·药物抑制 AKT 活性对 TPP1 寡聚体的调控 | 第76-78页 |
| ·AKT1 对 TPP1 寡聚体的影响 | 第78-79页 |
| ·AKT1 SIRNA 干扰耐受细胞系建立及其活性对 TPP1 寡聚体的影响 ..69 | 第79-82页 |
| ·讨论与结论 | 第82-85页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·结论 | 第83-85页 |
| 第四章 结论、创新与研究展望 | 第85-88页 |
| ·主要结论 | 第85-86页 |
| ·主要创新点 | 第86页 |
| ·研究展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-105页 |
| 已发表和待发表的论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 缩写 | 第108-109页 |
