| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·松褐天牛的研究现状 | 第13-14页 |
| ·天牛的化学生态学 | 第14-16页 |
| ·昆虫气味结合蛋白 | 第16-19页 |
| ·昆虫OBPs结构和分类 | 第16-18页 |
| ·昆虫气味结合蛋白功能研究 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 松褐天牛cDNA文库构建 | 第21-32页 |
| ·材料与方法 | 第22-28页 |
| ·供试昆虫 | 第22页 |
| ·所用试剂 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·RNA提取 | 第23-24页 |
| ·一二链合成 | 第24-26页 |
| ·目的片段回收 | 第26页 |
| ·连接转化 | 第26-27页 |
| ·菌落鉴定 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·松褐天牛触角cDNA文库分析 | 第28-31页 |
| ·松褐天牛嗅觉相关基因 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 松褐天牛OBPs的克隆及序列分析 | 第32-43页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·供试昆虫 | 第32页 |
| ·实验试剂及试剂盒 | 第32-33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·松褐天牛cDNA的获取 | 第33-34页 |
| ·松褐天牛OBPs PCR扩增及其产物的获取 | 第34-37页 |
| ·松褐天牛OBPs序列分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·松褐天牛OBPs的RT-PCR扩增 | 第37页 |
| ·松褐天牛OBPs基因序列分析 | 第37-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 松褐天牛MaltOBP3与MaltOBP5的表达纯化与结合特性分析 | 第43-60页 |
| ·材料与方法 | 第43-50页 |
| ·主要菌株、试剂盒和试剂 | 第43-44页 |
| ·荧光结合气味物质 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·质粒提取 | 第44-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第47页 |
| ·融合蛋白表达条件优化 | 第47页 |
| ·融合蛋白大量表达 | 第47页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白切除GST标签 | 第48页 |
| ·蛋白过GST亲和层析柱 | 第48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| ·荧光探针适合性测定 | 第49页 |
| ·荧光竞争结合试验 | 第49页 |
| ·荧光竞争结合实验数据分析 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-58页 |
| ·构建pGEX-6p-1-MaltOBPx表达载体 | 第50页 |
| ·松褐天牛OBPs融合蛋白表达 | 第50页 |
| ·MaltOBP3和MaltOBP5融合蛋白大量表达及纯化 | 第50页 |
| ·MaltOBP3和MaltOBP5融合蛋白酶切 | 第50-51页 |
| ·MaltOBP3与MaltOBP5的纯化 | 第51页 |
| ·探针适合性检验 | 第51-52页 |
| ·MaltOBP3和MaltOBP5与挥发物的结合特性 | 第52-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 结语 | 第60-62页 |
| ·主要结果 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献(References) | 第62-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
