| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 OTU1在结肠癌组织样本中的表达 | 第10-18页 |
| 1 材料 | 第10-11页 |
| ·组织标本 | 第10页 |
| ·结肠癌新鲜组织标本 | 第10页 |
| ·结肠癌甲醛固定组织标本 | 第10页 |
| ·主要实验试剂及配制 | 第10-11页 |
| ·主要设备仪器 | 第11页 |
| 2 方法 | 第11-14页 |
| ·新鲜冻存结肠癌组织总RNA抽提 | 第11-12页 |
| ·总RNA逆转录 | 第12页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第12-13页 |
| ·结肠癌组织样本免疫组化学染色 | 第13-14页 |
| ·免疫组织化学染色(SP法) | 第13-14页 |
| ·免疫组织化学染色结果评分标准 | 第14页 |
| ·数据分析 | 第14页 |
| 3 结果 | 第14-16页 |
| ·OTU1 mRNA在结肠癌组织中的表达分析 | 第14-15页 |
| ·免疫组织化学分析OTU1在结肠癌组织中的表达 | 第15-16页 |
| ·OTU1蛋白在27例癌旁正常粘膜-腺瘤-结肠癌中的表达 | 第15页 |
| ·OTU1在108例结肠癌组织中的表达 | 第15-16页 |
| ·OTU1蛋白的表达与临床病理特征的关系 | 第16页 |
| 4 小结 | 第16-18页 |
| 第二章 OTU1对结肠癌细胞生物学功能的影响 | 第18-31页 |
| 1 材料 | 第18-20页 |
| ·细胞、菌株、质粒 | 第18页 |
| ·细胞 | 第18页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂、培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·设备仪器 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-28页 |
| ·OTU1 mRNA在结肠癌细胞中的表达 | 第20-22页 |
| ·结肠癌细胞总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA逆转录 | 第21页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第21-22页 |
| ·质粒转化感受态细菌 | 第22-23页 |
| ·质粒抽提 | 第23页 |
| ·OTU1过表达稳定转染细胞株的建立 | 第23-25页 |
| ·细胞复苏及培养 | 第23-24页 |
| ·OTU1过表达质粒转染细胞 | 第24页 |
| ·OTU1过表达细胞LoVo单克隆株的筛选及建立 | 第24-25页 |
| ·OTU1过表达的鉴定 | 第25-26页 |
| ·实时定量PCR鉴定 | 第25页 |
| ·Western blotting鉴定 | 第25-26页 |
| ·OTU1干扰稳转SW480细胞株的建立 | 第26-27页 |
| ·含OTU1发卡结构shRNA干扰质粒的合成 | 第26页 |
| ·OTU1干扰SW480单克隆植株的筛选及建立 | 第26-27页 |
| ·OTU1干扰效率的测定 | 第27页 |
| ·OTU1对结肠癌细胞生物学功能的影响 | 第27-28页 |
| ·细胞增殖及活力检测 | 第27页 |
| ·细胞迁移实验 | 第27-28页 |
| ·细胞侵袭实验 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| ·OTU1在结肠癌细胞系中的表达分析 | 第28页 |
| ·OTU1过表达细胞株及干扰细胞株的建立 | 第28-29页 |
| ·OTU1过表达对结肠癌细胞生物学功能的影响 | 第29页 |
| ·OTU1过表达能够促进LoVo细胞的生长 | 第29页 |
| ·OTU1过表达能够促进LoVo细胞的迁移能力 | 第29页 |
| ·OTU1过表达能够促进LoVo细胞的侵袭能力 | 第29页 |
| ·OTU1干扰对结肠癌细胞生物学功能的影响 | 第29-30页 |
| ·OTU1干扰能够抑制SW480细胞的生长 | 第29-30页 |
| ·OTU1干扰能够抑制LoVo细胞的迁移能力 | 第30页 |
| ·OTU1干扰能够抑制LoVo细胞的侵袭能力 | 第30页 |
| 4 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 讨论 | 第31-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 问题的展望 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 附图 | 第39-46页 |
| 综述 | 第46-59页 |
| 综述参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59-60页 |
| 英文缩略词表 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |