| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 图目录 | 第11-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| ·牛结核病的研究概况与现状 | 第13页 |
| ·牛结核病的危害 | 第13页 |
| ·牛结核病的流行情况 | 第13页 |
| ·牛分枝杆菌 TB10.4 蛋白 | 第13-14页 |
| ·巨噬细胞在结核杆菌感染中发挥的免疫机制 | 第14-20页 |
| ·结核分枝杆菌感染巨噬细胞引起的非特异性免疫反应机制 | 第14-18页 |
| ·结核分枝杆菌感染宿主细胞的相关信号传导通路 | 第18-20页 |
| ·研究目的 | 第20-22页 |
| 第二章 牛分枝杆菌 rTB10.4 诱导巨噬细胞分泌细胞因子的研究 | 第22-30页 |
| 摘要 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·牛分枝杆菌重组蛋白 | 第22页 |
| ·主要试剂耗材 | 第22页 |
| ·溶液及试剂配置方法 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| ·RAW264.7 细胞的培养 | 第23页 |
| ·rTB10.4 的制备 | 第23页 |
| ·rTB10.4 刺激小鼠巨噬细胞实验 | 第23页 |
| ·rTB10.4 刺激 RAW264.7 细胞分泌细胞因子检测 | 第23-24页 |
| ·抗 TLR2 抗体阻断 rTB10.4 刺激 RAW264.7 分泌细胞因子的检测 | 第24页 |
| ·统计学处理 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-29页 |
| ·rTB10.4 能刺激 RAW264.7 细胞大量表达 TNF | 第24-25页 |
| ·rTB10.4 能够刺激 RAW264.7 细胞表达 IL-6 | 第25-26页 |
| ·rTB10.4 能刺激 RAW264.7 细胞中 IL-12p40 水平的显著增高 | 第26-27页 |
| ·rTB10.4 依赖 TLR2 通路诱导 RAW264.7 细胞表达 TNF，IL-6，IL-12 p40 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 rTB10.4 激活 MAPK 通路诱导巨噬细胞表达细胞因子的分子机理 | 第30-44页 |
| 摘要 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30-33页 |
| ·实验细胞株 | 第30页 |
| ·实验菌株 | 第30页 |
| ·牛分枝杆菌重组蛋白 | 第30页 |
| ·主要试剂耗材 | 第30-31页 |
| ·主要溶液配制 | 第31-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·RAW264.7 细胞的培养与处理 | 第33页 |
| ·rTB10.4 的制备 | 第33页 |
| ·rTB10.4 刺激 RAW264.7 细胞 | 第33页 |
| ·rTB10.4 刺激 RAW264.7 细胞激活 MAPK 信号通路检测 | 第33-34页 |
| ·抗 TLR 抗体阻断 rTB10.4 诱导 RAW264.7 细胞 MAPK 信号通路 | 第34-35页 |
| ·细胞信号传导通路抑制剂 SB203580 和 U0126 抑制 rTB10.4 诱导RAW264.7 细胞分泌细胞因子 | 第35页 |
| ·量化流式细胞分析仪检测 RAW264.7 细胞 p38,ERK 核转位 | 第35页 |
| ·统计分析 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-42页 |
| ·rTB10.4 诱导 RAW264.7 细胞激活 MAPK 通路 | 第36页 |
| ·rTB10.4 诱导 RAW264.7 细胞中 p38 和 ERK1/2 通路发生核转位 | 第36-39页 |
| ·rTB10.4 诱导 RAW264.7 细胞中 p38 和 ERK1/2 通路依赖 TLR2 | 第39-40页 |
| ·rTB10.4 激活细胞因子的表达依赖于 p38 和 ERK1/2 信号通路 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 rTB10.4 激活 NF-κB 通路诱导巨噬细胞表达细胞因子的分子机理 | 第44-57页 |
| 摘要 | 第44页 |
| ·实验细胞系 | 第44-46页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·牛分枝杆菌重组蛋白 | 第44页 |
| ·主要试剂耗材 | 第44-45页 |
| ·主要溶液及试剂配置方法 | 第45-46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-50页 |
| ·RAW264.7 细胞的培养与处理 | 第46页 |
| ·rTB10.4 的制备 | 第46页 |
| ·质粒的大量制备与提取 | 第46-47页 |
| ·rTB10.4 刺激 RAW264.7 细胞 | 第47页 |
| ·RAW264.7 细胞转染、荧光素酶报告基因检测 | 第47页 |
| ·rTB10.4 刺激 RAW264.7 细胞激活 NF-κB 信号通路检测 | 第47-49页 |
| ·量化流式细胞分析仪检测 RAW264.7 细胞中 P65 核转位 | 第49页 |
| ·统计学方法 | 第49-50页 |
| ·结果及分析 | 第50-55页 |
| ·rTB10.4 诱导 RAW264.7 激活 NF-κB | 第50页 |
| ·rTB10.4 蛋白通过诱导 IκB 降解激活 NF-κB 信号通路 | 第50-51页 |
| ·rTB10.4 诱导 RAW264.7 细胞中 NF-κB p65 核转位 | 第51-53页 |
| ·rTB10.4 激活细胞因子的表达依赖于 NF-κB 信号通路 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
