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ALV多重PCR检测方法建立及ALV-J U3区嵌合病毒体外复制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 绪论第14-21页
   ·ALV病原学第14-15页
     ·ALV病毒亚型分类第14-15页
     ·ALV病毒粒子结构及其基因编码蛋白第15页
   ·ALV的传播、流行与防治第15-17页
     ·ALV的传播途径第15-16页
     ·ALV的流行情况第16页
     ·ALV的防治措施第16-17页
   ·ALV检测方法概况第17-18页
     ·抗原检测方法第17页
     ·抗体检测方法第17-18页
   ·ALV-J的研究进展第18-19页
     ·我国ALV-J的流行现状第18页
     ·ALV-J的致病机理第18-19页
   ·本研究的目的及意义第19-21页
第二章 禽白血病病毒多重PCR检测方法建立第21-30页
   ·实验材料第21-22页
     ·参考毒株和细胞株第21-22页
     ·实验动物第22页
     ·主要试剂第22页
   ·实验方法第22-24页
     ·引物设计与合成第22页
     ·病毒DNA的提取第22-23页
     ·病毒分离第23页
     ·构建标准质粒第23页
     ·多重PCR方法的建立第23-24页
     ·人工感染实验第24页
   ·实验结果第24-28页
     ·多重PCR方法扩增结果第24-25页
     ·多重PCR方法的特异性第25-26页
     ·多重PCR方法的敏感性第26页
     ·人工感染实验排毒检测结果第26-27页
     ·人工感染实验病毒血症检测结果第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 我国部分地区禽白血病流行病学调查第30-36页
   ·实验材料第30页
     ·检测样品第30页
     ·主要试剂第30页
   ·实验方法第30-33页
     ·病毒DNA的提取第30-31页
     ·常规PCR检测方法第31页
     ·多重PCR检测方法第31-32页
     ·病毒分离第32页
     ·多重PCR与常规PCR扩增产物测序第32页
     ·ALV-J流行毒株序列测定第32页
     ·ALV-J U3区序列比对第32-33页
   ·实验结果第33-34页
     ·ALV流行病学调查结果第33页
     ·ALV-J U3区序列比对结果第33-34页
   ·讨论第34-36页
第四章 J亚群禽白血病病毒U3区嵌合病毒体外复制研究第36-45页
   ·实验材料第36页
     ·病毒株、细胞、质粒第36页
     ·主要试剂第36页
   ·实验方法第36-40页
     ·引物合成第36-37页
     ·融合PCR第37-38页
     ·嵌合病毒HPRS-103△DP04U3株感染性克隆构建第38页
     ·ALV-J蛋鸡分离株SD09DP04感染性克隆构建第38页
     ·细胞转染与病毒拯救第38-39页
     ·拯救病毒的鉴定第39页
     ·病毒TCID50测定第39-40页
     ·U3区启动子活性差异检测第40页
     ·U3区增强子活性差异检测第40页
   ·实验结果第40-44页
     ·ALV-J感染性克隆及嵌合病毒重组质粒的鉴定第40-41页
     ·病毒粒子的鉴定第41-42页
     ·拯救病毒体外复制水平比较第42-43页
     ·U3区启动子活性差异第43页
     ·U3区增强子活性差异第43-44页
   ·讨论第44-45页
第五章 全文结论第45-46页
参考文献第46-52页
附录第52-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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