| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| ·果胶简介 | 第10-12页 |
| ·果胶的分子结构与存在形式 | 第10-11页 |
| ·果胶物质的理化性质 | 第11-12页 |
| ·果胶的来源与应用 | 第12-14页 |
| ·果胶的原材料 | 第12-13页 |
| ·果胶的应用 | 第13-14页 |
| ·果胶的生产 | 第14-15页 |
| ·原果胶酶简介 | 第15-16页 |
| ·聚阿拉伯糖苷酶 | 第16页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第16-17页 |
| ·本课题的主要内容 | 第17-18页 |
| 第2章 菌种的筛选与鉴定 | 第18-25页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·试剂 | 第18-19页 |
| ·主要设备和仪器 | 第19-20页 |
| ·菌种的来源 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·结果和讨论 | 第23-24页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第23页 |
| ·菌种筛选与鉴定 | 第23-24页 |
| ·本章小结 | 第24-25页 |
| 第3章 产原果胶酶青霉菌的发酵优化 | 第25-39页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·酶活测定方法 | 第26-27页 |
| ·发酵优化实验设计 | 第27页 |
| ·结果和讨论 | 第27-38页 |
| ·单因素优化实验 | 第27-32页 |
| ·Plackett-Burman实验 | 第32-34页 |
| ·Box-Behnken Design(BBD)实验设计 | 第34-38页 |
| ·B型原果胶酶的确定 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第4章 基因的克隆和表达 | 第39-67页 |
| ·引言 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第40-43页 |
| ·主要菌株和质粒 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·生物试剂 | 第41页 |
| ·试剂和培养基的配制 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-55页 |
| ·内切聚阿拉伯糖酶的测定方法 | 第43页 |
| ·内切型聚阿拉伯糖酶基因的克隆与分析 | 第43-46页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第46-47页 |
| ·目的基因克隆载体的构建与转化 | 第47-48页 |
| ·重组质粒的提取 | 第48页 |
| ·内切型聚阿拉伯糖酶重组表达载体的构建与转化 | 第48-49页 |
| ·质粒pPIC9K-AbnC的线性化与浓缩 | 第49页 |
| ·毕赤酵母GS115感受态的制备 | 第49-50页 |
| ·毕赤酵母的电转化 | 第50页 |
| ·抗遗传霉素转化子的筛选 | 第50页 |
| ·毕赤酵母重组子的PCR验证 | 第50-51页 |
| ·内切型聚阿拉伯糖酶AbnC基因的表达 | 第51页 |
| ·重组内切型聚阿拉伯糖酶的分离纯化 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第52页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第52页 |
| ·重组内切聚阿拉伯糖酶(AbnC)酶学性质的研究 | 第52-54页 |
| ·产AbnC酶毕赤酵母的发酵优化 | 第54页 |
| ·AbnC酶对原果胶的水解作用 | 第54-55页 |
| ·结果和讨论 | 第55-66页 |
| ·内切聚阿拉伯糖酶的测定方法 | 第55页 |
| ·AbnC基因的克隆与分析 | 第55-57页 |
| ·目的基因与T载体的连接 | 第57页 |
| ·重组质粒pPIC9K-AbnC的构建与转化 | 第57页 |
| ·蛋白标准曲线的绘制 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白AbnC的分离纯化 | 第58-59页 |
| ·酶学性质的研究 | 第59-63页 |
| ·产AbnC酶毕赤酵母的发酵优化 | 第63-65页 |
| ·AbnC酶对原果胶的水解作用 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 第5章 结论与展望 | 第67-69页 |
| ·结论 | 第67-68页 |
| ·展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |