| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-30页 |
| ·细胞周期 | 第13-14页 |
| ·细胞周期调控 | 第14-16页 |
| ·细胞周期检测点 | 第14-15页 |
| ·细胞周期的调控蛋白 | 第15页 |
| ·细胞周期调控蛋白的降解 | 第15-16页 |
| ·细胞周期同步化 | 第16-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第17-18页 |
| ·PRRSV 生物学特征 | 第18-20页 |
| ·PRRSV 基因组结构 | 第20-23页 |
| ·非结构蛋白 | 第21页 |
| ·结构蛋白 | 第21-23页 |
| ·PRRSV 免疫学研究进展 | 第23-24页 |
| ·体液免疫 | 第23-24页 |
| ·细胞免疫 | 第24页 |
| ·PRRSV 受体的研究进展 | 第24-28页 |
| ·硫酸乙酰肝素 | 第25页 |
| ·唾液酸粘附素 | 第25页 |
| ·CD163 | 第25-26页 |
| ·波形蛋白 | 第26页 |
| ·非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链 A | 第26-28页 |
| ·病毒感染与细胞周期 | 第28页 |
| ·病毒感染对细胞 G_1/S 检查点的调控 | 第28页 |
| ·病毒感染对细胞 G_2/M 期休眠的调控 | 第28页 |
| ·研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-46页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·细胞、毒株与抗体 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·主要试剂与药品 | 第30页 |
| ·主要试剂配制 | 第30-32页 |
| ·主要设备及仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-46页 |
| ·Marc-145 细胞的传代培养及 PRRSV 增殖 | 第32-34页 |
| ·Marc-145 细胞的培养及传代 | 第32-33页 |
| ·PRRSV 的增殖与病毒滴度测定 | 第33-34页 |
| ·单克隆抗独特型抗体 5G2 与 6D10 的制备与纯化 | 第34-35页 |
| ·腹水的制备 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第34-35页 |
| ·Marc-145 细胞周期同步化方法的建立 | 第35-37页 |
| ·Marc-145 细胞 G_0/G_1期细胞周期同步化方法的建立 | 第35-36页 |
| ·Marc-145 细胞 S 期细胞周期同步化方法的建立 | 第36页 |
| ·Marc-145 细胞 G_2/M 期细胞周期同步化方法的建立 | 第36-37页 |
| ·药物 Nocodazole 对 Marc-145 细胞分裂的影响 | 第37页 |
| ·流式细胞仪检测 Marc-145 细胞周期同步化效果 | 第37页 |
| ·统计学处理 | 第37-38页 |
| ·PRRSV 在 Marc-145 细胞不同周期内的易感性测定 | 第38-44页 |
| ·实时荧光定量（Real time PCR）测定 | 第38-40页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）测定 | 第40-41页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western blot）测定 | 第41-43页 |
| ·病毒上清 TCID_50测定 | 第43-44页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期内 PRRSV 细胞受体表达量测定 | 第44-46页 |
| ·实时荧光定量（Real time PCR）测定细胞受体表达量 | 第44-45页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western blot）测定细胞受体表达量 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-57页 |
| ·单克隆抗独特型抗体 5G2 以及抗 PRRSV N 蛋白单克隆抗体 6D10 的制备与纯化 | 第46页 |
| ·Marc-145 细胞周期同步化方法的建立 | 第46-52页 |
| ·Marc-145 细胞 G_0/G_1期细胞周期同步化方法的建立 | 第46-48页 |
| ·Marc-145 细胞 S 期细胞周期同步化方法的建立 | 第48-49页 |
| ·Marc-145 细胞 G_2/M 期细胞周期同步化方法的建立 | 第49-51页 |
| ·药物 Nocodazole 对 Marc-145 细胞分裂的影响 | 第51-52页 |
| ·PRRSV 在 Marc-145 细胞不同周期内的易感性测定 | 第52-55页 |
| ·实时荧光定量（Real time PCR）测定 PRRSV 在 Marc-145 细胞不同周期内的吸附性差异 | 第52-53页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）测定 PRRSV 在 Marc-145 细胞不同周期内的感染差异 | 第53-54页 |
| ·Western blot 测定 PRRSV 在 Marc-145 细胞不同周期内的感染差异 | 第54页 |
| ·TCID_50测定 PRRSV 感染不同周期 Marc-145 细胞后上清病毒含量的差异 | 第54-55页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期内 PRRSV 细胞受体表达水平的检测 | 第55-57页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期内 PRRSV 细胞受体基因水平的检测 | 第55-56页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期内 PRRSV 细胞受体蛋白水平的检测 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| ·Marc-145 细胞周期同步化方法的建立 | 第58-59页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期对 PRRSV 感染细胞的影响 | 第59页 |
| ·Marc-145 细胞不同周期 PRRSV 细胞受体表达水平的差异 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |
