| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-13页 |
| ·WRKY转录因子简介 | 第9-10页 |
| ·WRKY转录因子的生物学功能 | 第10-12页 |
| ·调节植物生长发育 | 第10页 |
| ·应答生物胁迫和非生物胁迫 | 第10-11页 |
| ·对次生代谢物合成调控的研究进展 | 第11-12页 |
| ·WRKY转录因子的表达调控 | 第12-13页 |
| 2. 引言 | 第13-14页 |
| 3. 材料与方法 | 第14-21页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第14页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·菌株、载体与主要试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-21页 |
| ·总RNA的提取 | 第14页 |
| ·cDNA第一链的制备 | 第14页 |
| ·烟草NtWRKY-R1基因的电子克隆 | 第14-15页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtWRKY-R1的构建 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第15页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第15页 |
| ·大肠杆菌转化子的鉴定 | 第15-16页 |
| ·烟草NtWRKY-R1的序列分析 | 第16页 |
| ·烟草NtWRKY-R1的内含子序列分析 | 第16页 |
| ·提取烟草根尖组织总DNA | 第16页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtWRKY-R1（DNA）的构建 | 第16页 |
| ·烟草NtWRKY-R1的组织特异性表达分析 | 第16页 |
| ·烟株打顶后24h内根尖组织NtWRKY-R1的表达分析 | 第16-18页 |
| ·RT-PCR检测 | 第16-17页 |
| ·Northern杂交检测 | 第17-18页 |
| ·变性琼脂糖凝胶电泳分离RNA（甲醛变性胶电泳） | 第17页 |
| ·转膜和固定RNA | 第17页 |
| ·探针标记 | 第17-18页 |
| ·预杂交、杂交和显色 | 第18页 |
| ·表达载体pRSETB-NtWRKY-R1的构建 | 第18页 |
| ·NtWRKY-R1在大肠杆菌中的诱导表达 | 第18-19页 |
| ·过表达载体pROK2-NtWRKY-R1构建 | 第19页 |
| ·烟草原生质体的制备 | 第19页 |
| ·原生质体的转化 | 第19页 |
| ·原生质体提取和转化中用到的试剂配方 | 第19-21页 |
| ·酶解液 | 第19-20页 |
| ·原生质体RNA的提取 | 第20页 |
| ·RT-PCR检测 | 第20-21页 |
| 4. 结果与分析 | 第21-34页 |
| ·WRKY-LIKE转录因子的克隆和生物信息学分析 | 第21-28页 |
| ·WRKY-like转录因子的克隆 | 第21-22页 |
| ·烟草根尖组织总RNA质量的检测 | 第21页 |
| ·烟草根尖组织NtWRKY-R1基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·NtWRKY-R1转录因子的生物信息学分析 | 第22-28页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtWRKY-R1的构建 | 第22页 |
| ·烟草根尖组织NtWRKY-R1基因的序列分析 | 第22-23页 |
| ·烟草根尖组织NtWRKY-R1的同源性分析 | 第23-24页 |
| ·烟草根尖组织NtWRKY-R1的蛋白结构分析 | 第24-26页 |
| ·烟草NtWRKY-R1序列中内含子分析 | 第26-28页 |
| ·烟草根尖组织中总DNA的提取 | 第26页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtWRKY（DNA）-R1的构建 | 第26-28页 |
| ·烟草NTWRKY-R1的表达特异性分析 | 第28-29页 |
| ·烟草NtWRKY-R1的组织特异性分析 | 第28页 |
| ·烟草NtWRKY-R1基因在烟株打顶前后根尖组织中的表达特性分析 | 第28页 |
| ·烟草NtWRKY-R1在烟株打顶后24h内的表达谱分析 | 第28-29页 |
| ·烟草NTWRKY-R1基因的原核表达 | 第29-30页 |
| ·表达载体pRSETB-NtWRKY-R1的构建 | 第29页 |
| ·烟草NtWRKY-R1基因在大肠杆菌中的表达 | 第29-30页 |
| ·烟草NTWRKY-R1基因的瞬时表达 | 第30-32页 |
| ·过表达载体PROK2-NtWRKY-R1的构建 | 第30-31页 |
| ·原生质体的制备 | 第31页 |
| ·瞬时表达分析 | 第31-32页 |
| ·克隆烟草PMT1基因的启动子并进行生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·克隆载体pMD19-T-PMT1promoter的构建 | 第32-33页 |
| ·PMT1启动子的顺式作用元件分析 | 第33-34页 |
| 5. 结论与讨论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| Abstract | 第40-41页 |
