| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-35页 |
| 第一章 转基因动物技术研究概述 | 第13-29页 |
| ·转基因动物技术概述 | 第13-22页 |
| ·基因显微注射法 | 第13-14页 |
| ·病毒载体法 | 第14-16页 |
| ·精子介导的基因转移法 | 第16页 |
| ·胚胎干细胞介导法 | 第16-17页 |
| ·转基因体细胞核移植技术 | 第17-18页 |
| ·转座子介导的基因转移法 | 第18-19页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第19-20页 |
| ·锌指核酸酶基因打靶技术 | 第20-21页 |
| ·TALE 核酸酶介导的基因组定点修饰技术 | 第21页 |
| ·Cas9 核酸酶介导的基因组编辑技术 | 第21-22页 |
| ·转基因动物的应用前景 | 第22-27页 |
| ·转基因动物在基础生物学研究中的学术价值 | 第23页 |
| ·转基因动物在医药生产和临床治疗中的应用 | 第23-25页 |
| ·转基因动物技术在动物育种和畜牧渔业生产中的应用 | 第25-26页 |
| ·生产生物材料 | 第26-27页 |
| ·转基因动物研究存在的问题 | 第27-29页 |
| ·转基因动物成功率低 | 第27页 |
| ·外源基因稳定性差 | 第27页 |
| ·生物安全问题多 | 第27-29页 |
| 第二章 体外操作卵母细胞及胚胎的细胞骨架研究概述 | 第29-35页 |
| ·细胞骨架与卵母细胞成熟和受精 | 第29-31页 |
| ·微管与卵母细胞成熟和受精 | 第30-31页 |
| ·微丝与卵母细胞成熟和受精 | 第31页 |
| ·体外受精、孤雌激活及核移植胚胎的细胞骨架 | 第31-35页 |
| ·体外受精胚的细胞骨架研究 | 第31-33页 |
| ·孤雌激活胚的细胞骨架研究 | 第33页 |
| ·核移植重构胚的细胞骨架研究 | 第33-35页 |
| 试验研究 | 第35-67页 |
| 第三章 小鼠受精卵原核显微注射体系的建立 | 第35-48页 |
| ·材料和方法 | 第35-39页 |
| ·试剂与仪器 | 第35-36页 |
| ·显微注射 DNA 液的准备 | 第36页 |
| ·结扎公鼠、假孕鼠的准备 | 第36页 |
| ·雌鼠超数排卵与受精卵采集 | 第36-37页 |
| ·原核显微注射 | 第37页 |
| ·原核注射后受精卵的体外培养 | 第37页 |
| ·原核注射后 2-细胞胚胎移植 | 第37页 |
| ·外源基因的整合鉴定 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·注射用 DNA 片段的制备 | 第39-40页 |
| ·原核注射后胚胎体外培养结果 | 第40-41页 |
| ·胚胎移植结果 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第四章 昆白小鼠受精卵原核注射后微管和微丝的动态变化 | 第48-55页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂及液体 | 第48页 |
| ·小鼠超排及原核期受精卵的采集 | 第48页 |
| ·小鼠受精卵的原核注射 | 第48-49页 |
| ·原核注射后受精卵的体外培养 | 第49页 |
| ·原核注射后 2-细胞胚胎移植 | 第49页 |
| ·原核注射后受精卵微管免疫荧光染色与激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第49页 |
| ·原核注射后受精卵微丝免疫荧光染色与激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第49页 |
| ·统计学处理 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·原核注射后胚胎发育结果 | 第49-50页 |
| ·原核注射后受精卵中微管的动态变化 | 第50-52页 |
| ·原核注射后受精卵中微丝的动态变化 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第五章 昆白小鼠受精卵原核注射后纺锤体相关细胞骨架结构的动态变化 | 第55-67页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·实验动物 | 第55页 |
| ·主要试剂及液体 | 第55-56页 |
| ·小鼠超排及原核期受精卵的采集 | 第56页 |
| ·小鼠受精卵的原核注射及培养 | 第56页 |
| ·原核注射后受精卵微管免疫荧光染色与激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第56页 |
| ·原核注射后受精卵微丝免疫荧光染色与激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第56-57页 |
| ·细胞骨架基因及其调控基因实时荧光定量 PCR | 第57-58页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western blot） | 第58-59页 |
| ·统计学处理 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-64页 |
| ·原核注射后受精卵中α-微管和γ-微管的动态变化 | 第59-61页 |
| ·原核注射后受精卵中微丝的动态变化 | 第61-62页 |
| ·原核注射后受精卵中α-tubulin, β-actin 和γ-tubulin 的表达量变化 | 第62-63页 |
| ·原核注射后受精卵中 Aurora A, Aurora B 和 Tpx 2 的表达量变化 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
