| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 林木基因克隆研究进展 | 第12-14页 |
| ·林木抗逆境方面基因研究进展 | 第12-13页 |
| ·林木抗病基因研究 | 第12-13页 |
| ·林木抗旱基因研究 | 第13页 |
| ·林木抗盐碱基因研究 | 第13页 |
| ·林木抗寒基因研究 | 第13页 |
| ·林木木材改良方面基因研究进展 | 第13-14页 |
| 2 14-3-3 蛋白的研究进展 | 第14-19页 |
| ·14-3-3 蛋白的发现及种类 | 第14-15页 |
| ·14-3-3 蛋白的发现 | 第14页 |
| ·14-3-3 蛋白的种类 | 第14-15页 |
| ·14-3-3 蛋白的结构 | 第15-16页 |
| ·14-3-3 蛋白在植物中的功能 | 第16-19页 |
| ·14-3-3 蛋白在植物基础代谢中的作用 | 第16-18页 |
| ·14-3-3 蛋白提高 H+-ATPase 的活性 | 第16-17页 |
| ·14-3-3 蛋白抑制硝酸还原酶的活性 | 第17页 |
| ·14-3-3 蛋白对蔗糖磷酸合成酶活性的调节 | 第17页 |
| ·14-3-3 蛋白对 K+通道蛋白活性的调节 | 第17-18页 |
| ·14-3-3 蛋白对转录的调控 | 第18页 |
| ·14-3-3 蛋白对植物病害及非生物胁迫的响应 | 第18页 |
| ·14-3-3 蛋白在植物激素信号转导中的作用 | 第18-19页 |
| ·14-3-3 蛋白对植物生长发育的调控作用 | 第19页 |
| 3 本研究的目的意义 | 第19-21页 |
| 第一章 杉木 14-3-3 蛋白基因的实验克隆 | 第21-32页 |
| 1 材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器及设备 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·中间片段的获取 | 第21-24页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·第一条链 cDNA 的合成 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·PCR 反应体系与程序 | 第23页 |
| ·PCR 产物的电泳检测 | 第23页 |
| ·目的片段的回收 | 第23页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第23-24页 |
| ·5’RACE 和 3’RACE | 第24-27页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第24页 |
| ·5’RACE cDNA 及 3’RACE cDNA 的合成 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·Touchdown PCR 反应体系与程序 | 第26页 |
| ·PCR 产物的电泳检测 | 第26-27页 |
| ·目的片段的回收 | 第27页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第27页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因全长拼接及实验验证 | 第27-28页 |
| ·CAP3 软件拼接 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·第一条链 cDNA 的合成 | 第27页 |
| ·PCR 反应体系与程序 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的电泳检测 | 第28页 |
| ·目的片段的回收 | 第28页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第28页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因不同成员保守序列的扩增 | 第28-29页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因 cDNA 5’末端的扩增 | 第29-30页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因 cDNA 3’末端的扩增 | 第30页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因全长 cDNA 的验证 | 第30-31页 |
| ·序列拼接与实验验证结果 | 第30页 |
| ·序列分析 | 第30-31页 |
| 3 小结 | 第31-32页 |
| 第二章 杉木 14-3-3 蛋白基因的生物信息学分析 | 第32-55页 |
| 1 材料与方法 | 第32页 |
| ·生物信息学分析使用的软件 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-54页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白的生物信息学分析 | 第32-38页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白的疏水性/亲水性分析 | 第32-33页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白的等电点和分子量预测 | 第33页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白二级结构预测 | 第33-34页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白的亚细胞定位与跨膜结构预测 | 第34-35页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白的三维结构预测 | 第35-36页 |
| ·杉木 14-3-3-0 蛋白基因进化树分析 | 第36-38页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白的生物信息学分析 | 第38-43页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白的疏水性/亲水性分析 | 第38页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白的等电点和分子量预测 | 第38-39页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白二级结构预测 | 第39-40页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白的亚细胞定位与跨膜结构预测 | 第40-41页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白的三维结构预测 | 第41页 |
| ·杉木 14-3-3-1 蛋白基因进化树分析 | 第41-43页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白的生物信息学分析 | 第43-48页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白的疏水性/亲水性分析 | 第43页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白的等电点和分子量预测 | 第43-44页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白二级结构预测 | 第44-45页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白的亚细胞定位与跨膜结构预测 | 第45-46页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白的三维结构预测 | 第46页 |
| ·杉木 14-3-3-3 蛋白基因进化树分析 | 第46-48页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白的生物信息学分析 | 第48-53页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白的疏水性/亲水性分析 | 第48页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白的等电点和分子量预测 | 第48-49页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白二级结构预测 | 第49-50页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白的亚细胞定位与跨膜结构预测 | 第50-51页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白的三维结构预测 | 第51页 |
| ·杉木 14-3-3-4 蛋白基因进化树分析 | 第51-53页 |
| ·杉木 4 个 14-3-3 蛋白同源性分析 | 第53-54页 |
| 3 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 杉木 14-3-3 蛋白基因的表达分析 | 第55-61页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| ·实验材料及其处理 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·RNA 提取及第一条链 cDNA 的合成 | 第55页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-60页 |
| ·荧光定量 PCR 引物的扩增效率的确定 | 第56-57页 |
| ·14-3-3 蛋白基因与β-actin 引物熔解曲线分析 | 第57-59页 |
| ·杉木 14-3-3 蛋白基因在干旱胁迫条件下的表达情况 | 第59-60页 |
| 3 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 全文总结 | 第61-63页 |
| 1 总结 | 第61-62页 |
| 2 关于后续研究 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-77页 |
| 附录Ⅰ 缩写词（Abbreviation） | 第70-71页 |
| 附录Ⅱ 序列 Blast 结果 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
